特别提示：包括大肠杆菌蛋白提取试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：大肠杆菌蛋白提取试剂盒
英文名称：Escherichia coli protein extraction kit
产品货号：HR0065
产品规格：50T|100T

大肠杆菌总蛋白提取试剂盒可以从各种菌体中提取总蛋白，可用于纯化蛋白的粗品制备及总蛋白制备。提取过程简单方便。该试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物和磷酸酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高质量的蛋白提供了保证。该试剂盒提取的蛋白具有天然活性，可用于报告基因检测、SDS-PAGE电泳检测、Western blotting、凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活分析等下游实验。每毫升菌液大概可以提得5-10mg蛋白。采用BCA或Lowry 法进行蛋白定量。

储存条件：蛋白稳定剂、蛋白酶抑制剂-20℃保存；磷酸酶抑制剂2-8℃保存；蛋白提取液室温保存。
有效期：一年。

注意事项：
●本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

产品特点：
1．使用方便：不需昂贵设备。
2．可以处理各种细菌菌体，包括新鲜菌液和冰冻菌体。
3．将蛋白提取的时间缩短至 30分钟-1小时。
4．采用温和的中性裂解组分，保持蛋白活性。
5．含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
6．紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
7．蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。
该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
8．本试剂盒中不有 EDTA，与金属螯和层析等兼容。

试剂盒以外自备试剂和仪器：
● 移液器、吸头 ●离心机及离心管
● 涡旋振荡器 ●冰箱，冰盒

使用方法：

使用注意事项：
1．旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
2．实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
3．蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
4.可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
5．本试剂盒中提取液和蛋白酶抑制剂中均不含 EDTA，根据需要可自行加入。
大肠杆菌蛋白提取
1．提取液的准备：根据所需要提取的样本量，每500μl提取液中加入2μl蛋白酶抑制剂混合物和2μl磷酸酶抑制剂混合物和5μl蛋白稳定液，充分混匀后置冰上备用。
2．在4℃，12000RPM条件下将菌液离心5分钟，弃上清，尽量吸干剩余液体，收集菌体，用PBS洗菌体2次。若为冷冻菌体直接进行下面操作步骤即可。
3．按每20mg湿重菌体样本加入500μl蛋白提取液，混匀，冰上放置20-30分钟，中间每隔几分钟涡旋振荡混匀或用移液器吹打混匀。
4．300w，10s超声/10s间隔条件下冰浴超声至菌液变清。
5．在4℃，12000RPM条件下将菌液离心5分钟，将上清移入冷的干净离心管。
6．即得到大肠杆菌总蛋白样品。
7．将总蛋白样品定量后分装置于-80℃冰箱或直接用于下游实验。

根据您的关注的大肠杆菌蛋白提取试剂盒，您可能还对以下产品有需求：



名称：蛋白marker(3.3～20.1kD)
货号：BTN70102A
规格：15次
本产品为蛋白质电泳标准系列，为已知的标准蛋白质混合物，在SDS-PAGE时可以作为分子量标准，估计其他蛋白质的分子量大小。

产品特点：
1．简单，不需要自己单独购买各种蛋白质配置。
2．本产品有粉末型和溶液型两种，十分稳定。
3．本系列三种产品涵盖从 3.3 KD-200 KD的分子量范围。

所含成分及其分子量		A型	B型	C型
肌球蛋白重链	200.0KD			有
钙调素结合蛋白	130.0KD			有
兔磷酸化酶B	97.4KD		有	有
牛血清白蛋白	66.2KD		有	有
兔肌动蛋白	43.0KD		有	有
牛碳酸酐酶	31.0KD		有
人生长激素	22.0KD
大豆胰蛋白酶抑制剂A	20.1 KD	有	有
鸡蛋清溶菌酶	14.4KD	有	有
人工合成肽1	7,823D	有
人工合成肽2	5,856D	有
人工合成肽3	3,313D	有

产品组成：

成分	A型	B型	C型
蛋白分子量标准A型(低分子量)	15T	-	-
蛋白分子量标准B型(中分子量)	-	20T	-
蛋白分子量标准C型(高分子量)	-	-	10T
1×SDS-PAGE上样液	0.5ml	0.5ml	0.5ml
说明书	1份	1份	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期两年。

使用方法：

一、干粉型的使用：
1．开封后将1×SDS-PAGE上样液加入到样品管中溶解蛋白质粉末，各分子量标准所需的1×SDS-PAGE上样液的体积如下:
低分子量标准(BTN70102A)需要150μL。
中分子量标准(BTN70102B)需要200μL。
高分子量标准(BTN70102C)需要100μL。
2．沸水浴中加热 5分钟。
3．短暂离心后将溶液按每管10μL的体积分装到多个塑料离心管中，置-20℃长期保存。
4．使用时每次取一管，室温放置直到液体融化后，沸水浴中加热3～5分钟，即可上样进行SDS-PAGE电泳。BTN70102A型推荐使用Tricine-甘油SDS-PAGE胶、BTN70102B 推荐使用12%的分离胶、BTN70102C 推荐使用8%的分离胶。
5．电泳后进行考马斯亮蓝G-250染色，染色后出现的带型见上表。

二、溶液型的使用：
1．将溶液按每管一次电泳的用量分装到塑料离心管中冻存，每次只用一管，这样避免反复冻融。
2．使用时取一管室温放置直到液体融化。
3．沸水浴中加热3～5分钟后趁热上样并进行SDS-PAGE电泳。BTN70102A型推荐使用Tricine-甘油SDS-PAGE胶、BTN70102B 推荐使用12%的分离胶、BTN70102C 推荐使用8%的分离胶。
4．电泳后进行考马斯亮蓝G-250染色，染色后出现的带型见上表。

疑难解答：
1.分子量不同，SDS-PAGE的分离胶和浓缩胶浓度不同。需要自己根据具体情况调整。
2.电泳之后可将胶进行染色观察，如果使用传统配方进行染色时效果不好或考虑其毒性，请选择本公司的一步式蓝色PAGE染液(BTN61204)，该产品具有染色快，无毒，灵敏性高等物点，是常规蛋白染色液的替代品。

关注大肠杆菌蛋白提取试剂盒，的同时，为您推荐更多您可能感兴趣的产品：


BTN131120 8M盐酸胍溶液 250mL
BTN70102C 蛋白marker(43～200kD) 10次
YT039 SDS裂解液 100ml
YT627 蛋白质分子量标准(14.4-116kD) 200μl|1ml
SNM487 胃蛋白酶 1g
KFS017 SSEA-1/3/4免疫荧光试剂盒(IF) 50T
KFS028 一步法免疫组化试剂盒(兔、鼠通用) 300 片
KFS071 2%封闭试剂 500ml