TEV蛋白酶(GST和His标签)(≥95%)--性能参数，报价/价格，图片

基本信息

产品名称：

TEV蛋白酶(GST和His标签)(≥95%)

英文名称：

TEV Protease (GST & His-tag)

国产/进口：

国产

产地/品牌：

百奥莱博

型号：

YTB4023

参考报价：

销售商：

北京百奥莱博科技有限公司

总点击数：

2210

更新日期：

2025-07-31

产品类别：

分子生物学试剂

性能参数

特别提示：包括TEV蛋白酶(GST和His标签)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：TEV蛋白酶(GST和His标签)
英文名称：TEV Protease (GST & His-tag)
产品货号：YTB4023
产品规格：1KU|10KU

本制品是一种在大抽杆菌中重组表达的同时带有GST标签和His标签(6X His tag)的烟草蚀纹病毒(Tobacco Etch Virus,TEV)的半胱氨酸蛋白酶，能特异性地识别七肽序列Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln-Gly/Ser，并在Gln和Gly/Ser氨基酸残基之间进行酶切，常用于去除融合蛋白的Glutathione S-transferase (GST)、His或者其它标签的蛋白酶。本制品每毫升含有1000单位的酶，可用于约3mg带有TEV Protease识别位点的融合蛋白的切割。

建议把GST或His等标签设计在融合蛋白的N端，并在GST或His等标签与目的蛋白之间设计加入TEV Protease专一性识别与酶切的上述七肽序列。这样在GST或His标签被酶切后，在目的蛋白的N端仅有一个额外的Gly/Ser氨基酸残基，从而最大限度地减少了对目的蛋白结构和功能的影响。构建含有TEV Protease专一性识别位点的目的蛋白表达质粒，可以考虑选购百奥莱博的质粒pET-N-His-TEV (货号：YT976)。

TEV Protease的最佳酶切温度是30℃，在29-34℃范围内均具有较高的酶活性，但当温度达到或高于高37℃时，其酶活性会急剧下降。在实际操作过程中，为尽量保留目的蛋白的结构和生物活性，建议在4℃用TEV Protease酶切过夜。TEV Protease在pH6.0-9.0范围内具有活性，而当pH小于或等于5时，会失去酶活性。

TEV Protease还有一个突出的优点是在400mM咪唑中仍有较高活力，因此对于很多用镍柱纯化的His标签目的蛋白，可直接将TEV Protease加入含高浓度咪唑的刚刚纯化的目的蛋白溶液中，在4℃边透析去除咪唑边进行酶切。当然也可以在透析后再用TEV Protease进行酶切以去除His标签。经过酶切的目的蛋白，溶液中带有His标签的本TEV Protease以及切除下来的His标签，都可以通过与镍柱结合而去除。His标签蛋白的纯化可以考虑选购百奥莱博的GoldBalb His-tag Purification Resin(还原螯合耐受型) (货号：YT616)或His标签蛋白纯化试剂盒(还原螯合耐受型)(货号：YT046)以及百奥莱博的GoldBalb His-tag Purification Resin (变性剂耐受型) (货号：YTB4204)或His标签蛋白纯化试剂盒(变性剂耐受型) (货号：YTB046)。

TEV Protease的酶活性不会被常见的丝氨酸蛋白酶抑制剂(serine protease inhibitor)如PMSF、AEBSF、bestatin、pepstatin、E-64、TLCK和EDTA所抑制。但靶向半胱氨酸(Cysteine)残基的蛋白酶抑制剂如NEM或IAA等，可以显著抑制TEV Protease的酶活力，因为天然的TEV Protease含有其维持酶活力所必需的Cys151。

百奥莱博TEV蛋白酶(GST和His标签)比较适用于酶切带His标签的蛋白，因为酶切后没有完全酶切的重组蛋白蛋白、切除下来的His标签以及TEV蛋白酶(GST和His标签)都可以结合于镍柱上而被除去，穿柱液中则含有所需的靶蛋白；百奥莱博TEV蛋白酶(GST和His标签)同样比较适用于酶切带有GST标签的重组蛋白，因为酶切后没有完全酶切的重组蛋白、切除的GST标签以及TEV蛋白酶(GST和His标签)都可以结合于GST纯化介质上而被除去，穿柱液中则含有所需的靶蛋白。

TEV蛋白酶(GST和His标签)与TEV蛋白酶(His标签，货号：YT984)相比，最大的优点是不仅适合用于酶切去除带有TEV酶切位点的His标签，同时适合用于切除带有TEV酶切位点的GST标签。

酶活性单位定义：30℃，pH8.0条件下反应1小时，能够切割3μg对照底物达85%以上所需的酶量为一个活性单位。
百奥莱博TEV蛋白酶(GST和His标签)酶活性鉴定结果可参考图1。

图1.TEV Protease (GST-tag/His-tag)切割GST标签蛋白的效果图。含有TEV Protease识别位点的76kD GST标签蛋白与TEV Protease进行反应，底物的用量为3μg，酶的用量依次为0、0.1、0.25、0.5、0.67、1、2U，30℃在1X TEV Buffer中反应1小时后取样进行SDS-PAGE电泳和考马斯亮蓝染色。酶切产物大小为约50kD的目的蛋白和约26kD的GST标签。

技术指标：
分子量：28kDa
纯度：≥95%。
储存液：25mM Tris-HCl,150mM NaCl,1mM EDTA,5mM DTT,50%(v/v)甘油,pH8.0。
10×TEV Buffer：500mM Tris-HCl,500mM NaCl,5mM EDTA,10mM DTT,pH8.0。

产品组成：

组分	1KU	10KU
TEV蛋白酶(GST和His标签) (1U/μl)	1ml	10ml
10X TEV Buffer	2ml	20ml
说明书	1份	1份

保存条件：-20℃保存。

使用说明：
由于不同标签蛋白具有不同的特性，所以在实际使用时，建议对酶和标签蛋白的比例进行适当优化，以下是一个简单的估计酶用量的实验方案。

按照下表设置酶切反应体系：

组分	体积(μl)
H₂O	X
10X TEV Buffer	5
标签蛋白(8μg)	Y
TEV蛋白酶(GST和His标签) (1U/μl)	0、1.5或2.5
总体积	50

注：如果标签蛋白浓度为2μg/μl，那么Y=8/2=4，即须使用4μl 2μg/μl的标签蛋白。

将反应混合物放置于30℃反应1、2、4或6小时。如果目的蛋白在30℃很不稳定，可以考虑4℃反应过夜(16小时左右)。正常情况下按照上述反应体系，无论30℃反应1小时还是4℃反应16小时实际测定发现都可以充分剪切并去除标签的。

取20μl样品进行SDS-PAGE电泳分析，确定反应所需的合适酶量和合适的反应时间。

根据您的关注的TEV蛋白酶(GST和His标签)(≥95%)，TEV半胱氨酸蛋白酶，您可能还对以下产品有需求：

名称：T4聚核苷酸激酶
货号：BTN120506
规格：250U
T4聚核苷酸激酶能够催化ATP的γ-位磷酸基团转移到寡核苷酸链(双链或单链DNA或RNA)的5′-羟基末端以及3′-单磷酸核苷上。本产品还具有3′磷酸酶活性，将3′-磷酸基团从寡核苷酸的3′磷酸末端、脱氧3′-单磷酸核苷和脱氧3′-二磷酸核苷上水解掉。其反应示意图如下：
T4聚核苷酸激酶催化ATP的γ-位磷酸基团转移到寡核苷酸链(双链或单链DNA或RNA)的5′-羟基末端以及3′-单磷酸核苷上

T4聚核苷酸激酶催化ATP的γ-位磷酸基团转移到寡核苷酸链(双链或单链DNA或RNA)的5′-羟基末端以及3′-单磷酸核苷上

产品用途：
1．DNA或RNA的末端标记，用作寡核苷酸探针和进行DNA测序。
2．寡核苷酸5′末端的磷酸化，以便进行连接反应。
3．除去3′磷酸基团。

产品组成：

成分	规格
T4聚核苷酸激酶，10U/μL	25μl
10×反应缓冲液	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：1 单位指在37℃条件下，30分钟内催化 1nmol 酸不溶性 [32P] 掺入所需要的酶量。

1×反应缓冲液：[70mM Tris-HCl(pH7.6@25℃)，10mM MgCl2，5mM DTT]，37℃温育。

热失活：65℃加热20分钟。

来源：重组E.coli菌株，克隆有T4多聚核苷酸激酶或修饰的T4多聚核苷酸激酶基因。

自备试剂：0.5M EDTA(pH8.0)、[γ-32P或γ-33P]-ATP或0.1mM ATP、DNA纯化试剂盒。

使用方法：

一、DNA 5′末端标记：
1．参考如下表格设置反应体系：

待磷酸化DNA	1～50 pmol(5′末端)
10×反应缓冲液	5μL
自备的[γ-32P或γ-33P]-ATP(3000Ci/mmol)	50pmol
补充无核酸酶的去离子水	至48μL
T4聚核苷酸激酶,10U/μL	2μL

2．按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用Vortex在最低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。
3．37℃孵育30分钟。
4．加入自备的1μL 0.5M EDTA(pH8.0)混匀，以终止反应。
5．后续可以使用酚lǜ仿抽提、乙醇沉淀等方法纯化标记的DNA，也可以使用适当的DNA 纯化试剂盒进行纯化。DNA纯化试剂盒可以向我公司订购。

二、DNA 5′末端磷酸化：
1．参考如下表格设置反应体系：

待磷酸化DNA	1～50 pmol(5′末端)
10×反应缓冲液	5μL
自备的0.1mM ATP	3μL
补充无核酸酶的去离子水	至48μL
T4聚核苷酸激酶，10U/μL	2μL

2．按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用Vortex在最低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。
3．37℃孵育30分钟。
4．加入自备的1μl 0.5M EDTA(pH8.0)混匀，以终止反应。
5．后续可以使用酚lǜ仿抽提、乙醇沉淀等方法纯化标记的DNA，也可以使用适当的DNA 纯化试剂盒进行纯化。

公司简介

北京百奥莱博科技有限公司一家专注于生命科学研究领域的生物技术公司，坚持“质量至上，服务为本，全心全意助力生命科学”的理念，为广大用于提供稳定、可靠、专业的产品和服务支持，产品线包括分子生物学，细胞生物学，免疫检测，抗体，重组蛋白，血液制品等系列。“忙忙碌碌的平凡，铸就事业的不凡”。让我们携起手来，共同创造生命科学的蓬勃发展。

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