动物试剂

XL10-Gold 电击感受态细胞

基本信息
产品名称:
XL10-Gold 电击感受态细胞
英文名称:
XL10-Gold Electroporation-Competent Cell
国产/进口:
国产
产地/品牌:
雅吉生物
型号:
11-1181
参考报价:
总点击数:
474
更新日期:
2026-03-26
产品类别:

性能参数
  • 介绍: 基 因 型TetrΔ(mcrA)183 Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lac Hte[F´proAB lacIqZΔM15 Tn10 (Tetr) Amy Camr]简 要 说 明XL10-Gold是目前转化效率最高的感受态细胞,由Stratagene开发的特异性用于大质粒或珍贵连接产物转化或构建文库的超级感受态细胞。XL10-Gold菌株为Hte(high transformation efficiency)基因型,Hte是Stratagene开发的特异性提高感受态转化效率及大质粒转化能力的宿主菌基因型,已成功应用于40kd质粒的构建。[Δ(mcrA)183 Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)173]赋予XL10-Gold缺失几乎所有已知的限制酶切系统;同时缺失核酸内切酶(endA),提高了质粒DNA的产量和质量;重组酶缺陷型(recA)减少插入片段的同源重组概率,保证了插入DNA的稳定性;Tetr, Camr赋予菌株四环素和氯霉素抗性;lacIqZΔM15的存在使XL10-Gold可用于蓝、白斑筛选。 High5TM系列XL10-Gold感受态细胞经特殊工艺制作,经pUC19质粒检测转化效率>2×109cfu/μg。操 作 说 明1.0.1cm电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上5分钟,待其沥干水分,正置5分钟,使乙醇充分挥发,待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面0.5cm以方便盖上杯盖,冰中静置5分钟充分降温。2.取-80℃保存的XL10-gold电击感受态细胞插入冰中5分钟,待其融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打 EP 管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。A.测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19;B.对于连接产物,请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬,DNA 浓度不超过 100 ng/μl,体积不超过 5 μl/50 μl 感受态。3.用 200 μl 枪头(用刀切除 0.5cm 枪尖)将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中,避免产生气泡,盖上杯盖。4.启动电转仪,设置参数:C=25 μF,PC=200 Ω,V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数,也可按所用 电转仪推荐的参数操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。5.立即 向电击杯中加入1000 μl不含抗生素的无菌培养基 S.O.C.,混匀后转移到空50ml管中,并用1ml SOC轻柔冲洗电转杯并转移到50ml管中,另补加3ml SOC培养基, 37℃,200 rpm复苏60分钟。6.5000 rpm 离心一分钟收菌,重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上(因菌量较大, 若全部涂板请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个)。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养过夜。注 意 事 项1. 加入DNA 时体积不应大于感受态体积的1/10。2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡,气泡会增加弧光放电风险。3. 当DNA 不纯或存在盐,乙醇,蛋白及缓冲液等污染时,转化效率急剧下降。4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导,增大在含有细胞和DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率,推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。6. 对于连接产物转化,最好转化前乙醇沉淀DNA 后用适量TE 缓冲液(10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产物,保证DNA 浓度不超过100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率,增加弧光放电的风险。7. 混入质粒时应轻柔操作,吸取感受态细胞时避免用力过猛,以免剪切力过大损伤细胞膜,降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。8. 电击感受态细胞最好保存在-80℃以下,高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
  • 储存条件: -80℃
  • 用途: 克隆感受态细胞
  • 注意:部分产品我司仅能提供部分信息,我司不保证所提供信息的权威性,仅供客户参考交流研究之用
公司简介
       上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月,是一家面向生命科学领域,科研机构、高校、院所及企业产品开发研究提供所需要的科研类试剂、耗材、仪器、技术服务等。包括分子生物学、免疫学、微生物学、细胞学,通过公司各个部门所有员工的共同努力在行业内拥有较高知名度,深得新老客户的厚爱,本着“优质、服务、信誉”的精神,坚持以先进的技术、优质的产品、良好的信誉,为国内外广大用户提供优质生物产品和服务。公司在重视产品质量的同时,也建立了一套集技术支持、物流、售后服务等多个部门联动服务体系,努力把我们方便、快捷、周到的服务提供给每一个客户本研究所郑重承诺:质量保证、供货及时、服务周到,公司总投资超过2000万元,并先后引进了自动化设备,组建了专业的研发技术团队。凭借着洁净化的生产车间、标准化的质量管理系统,为生产高质量的产品提供了有效保证。
     雅吉生物自主研发的ELISA试剂盒,在国内众多重点实验室广泛使用,深受广大科研人员的好评,先后在权威杂志文章中被引用。
 
上海雅吉生物科技有限公司以极强的职业精神,积极、负责、坦诚的服务令我们的客户满意! 
客户服务承诺
    以“服务、客户、技术”为根本。客户是我们的核心,坚持以高质量的产品服务客户, 秉持诚信原则,重视客户的意见与感受;我们愿意为大家提供良好的售后服务。希望老师们对我们的服务及工作提出意见,您的满意是我们工作的动力,祝广大师生客户生活工作愉快!
更多产品详情可查询官网:www.yajimall.com

售后服务
试剂盒售后:本公司出售的试剂盒均保质保量,质量问题均可免费退换,另提供免费代测服务。 细胞售后: 1. 细胞运输丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等,重发; 3. 细胞收到当天以及第2,3天请拍照,未告知的视为产品合格。4-10天内出现问题,请提供细胞照片和细胞出现问题的照片以及细胞相关操作的详细步骤,并跟我公司人员及时沟通判定是否重发,具体可以参照我官网或者随货说明书相关售后条款。
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