货号:LV-HSC002
细胞数:1 million/vial
产品形式:冻存(现货/P1代)、新鲜培养(需定制)
报价:询价(19902901483)
用途:仅用于科学研究与生物医药研发。
大鼠原代肝星形细胞
Rat hepatic stellate cells
(可贴壁,Cat# LV- HSC002)
(仅用于科学研究)
该说明书方法适用于本公司提取的大鼠原代肝星形细胞,您使用时,请按随货的说明书操作,如有任何疑问可咨询公司技术人员。
I 简介
肝星形细胞占肝脏细胞的比例相对较低,呈梭形或多边形,胞浆内有多个富含维生素A的脂滴。在正常肝脏中,星状细胞处于静止状态,表达marker基因Desmin,增殖活性低。依靠本公司在原代肝脏细胞分离与纯化上的技术优势,大鼠原代肝星形细胞分离自SPF级大鼠,来源清晰,细胞活力高(>85%),细胞纯度高(>90%),性价比高,可广泛应用于基础生命科学研究以及药物研发中。公司可个性化定制原代细胞,可分离不同品系、不同药物处理(如CCl4)的细胞,满足不同客户的需求。
II 试剂与材料
-冻存大鼠原代肝星形细胞(Cat# LV- HSC002)
-肝星形细胞培养基(DMEM+10% FBS+1%PS)
-无菌15ml离心管(冰上预冷)
-宽口移液枪头(普通移液枪头剪去尖头,再灭菌使用)
-生物安全柜
-移液枪
-恒温水浴锅(38℃预热)
-冷冻离心机
-37℃/5%CO2培养箱
-75%酒精
III 细胞的复苏与铺板
1. 将所有试剂耗材至于生物安全柜中,紫外消毒15min;预冷离心机;铺板培养基放入38℃恒温水浴锅中充分预热。
2. 将冻存的肝星形细胞从冷藏位置迅速转移至38℃恒温水浴锅中,尽可能多的浸入38℃水中,顺时针水平摇动,但必须确保冻存管盖子保持在水面以上。
3. 解冻冻存管约90 ~120s,至冻存管中只有少量碎冰漂浮即可。
4. 600×g,4℃离心5min。
5. 利用75%酒精消毒冻存管,并将其转移到生物安全柜,去上清并用肝星形细胞培养基重悬。
6. 沉淀的细胞用星形细胞专用培养基重悬并定容至4ml,用台盼蓝排除法测定星形细胞的存活率和细胞总量。
7. 将细胞以2×104cells/cm2的密度接种至培养皿中,摇匀,在37℃/5%CO2培养箱中培养,24h后换液,之后隔天换液。
IV 肝星形细胞培养与传代
1. 通常情况下,我司不建议客户对细胞进行传代,因为传代细胞可能会丢失部分细胞特性。
2. 如需要传代培养,在本培养体系中,细胞在铺板培养后第7-8天可传代,细胞可检测到肝星形细胞标记基因Desmin及a-SMA的表达。客户可根据实验需求加以考虑。
3. 肝星形细胞可制备成永生化细胞,满足部分基础实验研究。
V 关于售后
如您发现有产品任何质量问题,请您收集原始数据,请第一时间联系公司销售或者技术支持,公司安排人员保证售后。每个实验室条件不同,操作人员习惯不同,熟练程度不一样,实验失败存在客观因素。如未严格按照说明书操作、超过售后时限,公司不做售后,请老师理解与支持。
售后有效期与提供的原始数据:
复苏问题:复苏24小时以内;提供台盼蓝染色或者PI染色。
污染问题:复苏96小时以内;提供相差显微镜照片。
纯度问题:一个月内;提供免疫荧光或者流式结果。
VI 联系电话
公司电话:0755-28284050
技术支持:19902901483(周博士)