角质形成细胞
基本信息
产品名称：
角质形成细胞
英文名称：
Human keratinocytes
国产/进口：
国产
产地/品牌：
深圳/立沃LV-BIOTECH
型号：
LV-KTC001
参考报价：
销售商：
总点击数：
266
更新日期：
2022-02-16
产品类别：
性能参数
货号：LV-KTC001
细胞数：2 million/vial
产品形式：冻存（现货）、新鲜培养（需定制）
报价：询价（19902901483）
用途：仅用于科学研究。
I 简介
本产品通过胶原酶、分离酶消化分离至新鲜包皮组织，仍保留原来的生物学特性、遗传特性，也最接近和反应体内生长特性，经检测本司细胞无细菌、真菌、放线菌等污染，活力和生长状态都好，细胞的纯度可达到90%以上，适宜用于药物敏感性试验、化妆品测试、细胞分化等试验研究，以获得更准确的研究和数据。公司可个性化定制原代细胞，可分离不同品系、不同药物处理的细胞，满足不同客户的需求。
II 试剂与材料
-人角质形成层细胞（Cat# LV- KTC001）
-复苏培养基（Cat#LV-Rec001）
-角质形成层细胞培养基（DMEM or RPMI-1640+10%FBS+1%PS）
-碎冰及冰盒
-无菌15ml离心管（冰上预冷）
-一次性移液管
-宽口移液枪头（普通移液枪头剪去尖头，再灭菌使用）
-移液枪
-恒温水浴锅（38℃预热）
-冷冻水平离心机（带水平转子，可离心15ml离心管）
-生物安全柜
-37℃/5%CO2培养箱
-75%酒精
III 细胞的复苏与铺板
1. 将15ml离心管插入盛有足量碎冰的冰盒中，紫外消毒15min；预冷离心机。
2. 复苏培养基放碎冰中充分预冷，角质形成层细胞培养基放入38℃恒温水浴锅中充分预热。
3. 将冻存的肝细胞从冷藏位置迅速转移至38°C恒温水浴锅中。尽可能多的浸入38°C水中，顺时针水平摇动，但必须确保冻存管管盖保持在水面以上。
4. 解冻冻存管约90 ~ 120s，至冻存管中只有少量碎冰漂浮即可。
5. 利用75%酒精消毒冻存管，并将其转移到生物安全柜。
6. 用宽口枪头将细胞重悬（轻轻吹打2次），并转移至预冷的15ml离心管中（注意：冻存管与枪头上残留细胞，可用1ml复苏培养基清洗冻存管与枪头）。
7. 向细胞悬液逐滴加入预冷复苏培养基，每1ml细胞悬液加入10ml复苏培养基（注意：前3ml要缓慢逐滴加入并轻微摇晃，后面7ml可加快速度），轻微上下颠倒1次混匀。
8. 400×g，4°C离心5min，去上清。
9. 沉淀的细胞用角质形成层细胞培养基重悬并定容至4ml，用台盼蓝排除法测定细胞的活力和细胞总量。
10. 将细胞以2×104cells/cm2的密度接种至培养皿中，摇匀，在37°℃/5%CO2培养箱中培养，24h后换液，之后隔天换液。
IV 细胞培养与传代
1. 细胞融合度达到80-90%时可进行传代。
2. 提前将培养基、PBS、胰酶放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内。
3. 吸除旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察。
4. 待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液（角质细胞对胰酶不太敏感，消化时间可能会增加到10-15min，有时需要配合使用无菌细胞刮铲进行传代；控制吹打的力度，避免产生大量的气泡）。
5. 400×g，室温离心5min，去上清并用培养基重悬。
6. 按体积比1：3或1：4传代，将细胞悬液接种到新的细胞瓶内， 置37℃/5%CO2培养箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
V 联系方式
公司电话：0755-28284050
技术支持：19902901483（周博士）
细胞数：2 million/vial
产品形式：冻存（现货）、新鲜培养（需定制）
报价：询价（19902901483）
用途：仅用于科学研究。
人角质形成层细胞
Human keratinocytes
（可贴壁，Cat# LV- KTC001）
(仅用于科学研究)
该说明书方法适用于本公司提取的人角质形成层细胞，您使用时，请按随货的说明书操作，如有任何疑问可咨询公司技术人员。Human keratinocytes
（可贴壁，Cat# LV- KTC001）
(仅用于科学研究)
I 简介
本产品通过胶原酶、分离酶消化分离至新鲜包皮组织，仍保留原来的生物学特性、遗传特性，也最接近和反应体内生长特性，经检测本司细胞无细菌、真菌、放线菌等污染，活力和生长状态都好，细胞的纯度可达到90%以上，适宜用于药物敏感性试验、化妆品测试、细胞分化等试验研究，以获得更准确的研究和数据。公司可个性化定制原代细胞，可分离不同品系、不同药物处理的细胞，满足不同客户的需求。
II 试剂与材料
-人角质形成层细胞（Cat# LV- KTC001）
-复苏培养基（Cat#LV-Rec001）
-角质形成层细胞培养基（DMEM or RPMI-1640+10%FBS+1%PS）
-碎冰及冰盒
-无菌15ml离心管（冰上预冷）
-一次性移液管
-宽口移液枪头（普通移液枪头剪去尖头，再灭菌使用）
-移液枪
-恒温水浴锅（38℃预热）
-冷冻水平离心机（带水平转子，可离心15ml离心管）
-生物安全柜
-37℃/5%CO2培养箱
-75%酒精
III 细胞的复苏与铺板
1. 将15ml离心管插入盛有足量碎冰的冰盒中，紫外消毒15min；预冷离心机。
2. 复苏培养基放碎冰中充分预冷，角质形成层细胞培养基放入38℃恒温水浴锅中充分预热。
3. 将冻存的肝细胞从冷藏位置迅速转移至38°C恒温水浴锅中。尽可能多的浸入38°C水中，顺时针水平摇动，但必须确保冻存管管盖保持在水面以上。
4. 解冻冻存管约90 ~ 120s，至冻存管中只有少量碎冰漂浮即可。
5. 利用75%酒精消毒冻存管，并将其转移到生物安全柜。
6. 用宽口枪头将细胞重悬（轻轻吹打2次），并转移至预冷的15ml离心管中（注意：冻存管与枪头上残留细胞，可用1ml复苏培养基清洗冻存管与枪头）。
7. 向细胞悬液逐滴加入预冷复苏培养基，每1ml细胞悬液加入10ml复苏培养基（注意：前3ml要缓慢逐滴加入并轻微摇晃，后面7ml可加快速度），轻微上下颠倒1次混匀。
8. 400×g，4°C离心5min，去上清。
9. 沉淀的细胞用角质形成层细胞培养基重悬并定容至4ml，用台盼蓝排除法测定细胞的活力和细胞总量。
10. 将细胞以2×104cells/cm2的密度接种至培养皿中，摇匀，在37°℃/5%CO2培养箱中培养，24h后换液，之后隔天换液。
IV 细胞培养与传代
1. 细胞融合度达到80-90%时可进行传代。
2. 提前将培养基、PBS、胰酶放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内。
3. 吸除旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察。
4. 待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液（角质细胞对胰酶不太敏感，消化时间可能会增加到10-15min，有时需要配合使用无菌细胞刮铲进行传代；控制吹打的力度，避免产生大量的气泡）。
5. 400×g，室温离心5min，去上清并用培养基重悬。
6. 按体积比1：3或1：4传代，将细胞悬液接种到新的细胞瓶内， 置37℃/5%CO2培养箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
V 联系方式
公司电话：0755-28284050
技术支持：19902901483（周博士）
公司简介
立沃生物科技（深圳）有限公司 （Liver Biotechnology (Shenzhen) Co., Ltd），坐落于深圳市大鹏新区国际生物谷生命科学产业园，是国内专业从事原代细胞分离、冻存、再生的国家高新技术企业，拥有国家生物二级实验室、ISO9001质量管理体系认证、GB/T29490-2013知识产权贯标认证。瞄准糖尿病、肝衰竭、肿瘤等重大临床疾病，聚焦未来精准医疗新技术，开发胰岛细胞治疗、肝细胞/人工肝治疗、肿瘤精准用药等新方法和新产品，转化于深圳未来医院，满足深圳市乃至全国的重大临床需求。公司首席科学顾问由美国医学与生物工程院院士担任，拥有国家杰青、国家“973”首席科学家、深圳市高层次人才等多名技术专家，拥有博士后、博士、硕士、本科等全职工作人员20余人。目前，公司正式落户于深圳市大鹏新区国际生物谷生命科学产业园，拥有2000+平方米实验室、2000+平方米办公场地、2000+万仪器设备、SPF级动物房等，配套建设有1000平方米GMP车间。 有需要合作的同行可随时咨询！ 合作咨询：0755-28284050 下单咨询：181-2981-2531微信同号（邓）9540132657 技术支持：199-0290-1483微信同号（周）7788987205 网址: https://www.liver-biotech.com 地址：深圳市大鹏新区国际生物谷生命科学产业园A10栋
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