ROS活性氧检测
原理
DCFH-DA本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,进入细胞后,被水解生成DCFH。而DCFH不能透过细胞膜。细胞内的ROS可以氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF。DCF被488nm激发光激发后,发射530nm的荧光信号,被FITC通道接收,检测DCF的荧光就可以判定细胞内活性氧ROS的水平。
实验流程
收集细胞→PBS清洗→JC-1工作液孵育→荧光显微镜观察或流式细胞仪分析
注意事项
样品为带培养基的活细胞,常温运输
应用:
1、ROS可对细胞膜结构、核酸和蛋白分子产生氧化作用,引起其结构和功能障碍。
2、ROS增多会导致机体产生氧化应激反应(Oxidative Stress)造成细胞损伤
3、ROS参与多种病理机制,百种以上的疾病状态都可能有ROS的参与。
4、检测细胞ROS的含量,可以了解ROS在细胞一些生理和病理状态中的变化,分析药物效应和相关机制
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