生化试剂

JC-10 线粒体膜电位荧光探针

基本信息
产品名称:
JC-10 线粒体膜电位荧光探针
英文名称:
JC-10 forMitochondrial MembranePotential
国产/进口:
国产
产地/品牌:
西安强化生物科技有限公司
型号:
参考报价:
总点击数:
148
更新日期:
2025-04-01
产品类别:

性能参数
简要介绍

JC-10是一种替换JC-1,用于检测线粒体膜电位△Ψm的荧光探针。JC-10以电势依赖性的方式积聚在线粒体内,可以用来检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。
正常线粒体内,JC-10聚集在线粒体基质中形成聚合物,聚合物发出强烈的红色荧光(Ex=540 nm, Em=590 nm);
不健康的线粒体由于膜电位的下降或丧失,JC-10 只能以单体的形式存在于胞浆中,产生绿色荧光(Ex=490 nm, Em=525 nm)。
JC-10不仅可用于定性检测,因颜色的变化可以直接反映出线粒体膜电位的变化。也可以用于定量检测,因线粒体的去极化程度可以通过红/绿荧光强度的比例来衡量。
观察时,只需使用常规的观察红色荧光和绿色荧光的设置即可。
JC-10可用来检测大量细胞类型如神经元和心肌细胞的线粒体膜电位,也可用来研究细胞生理活动,比如ATP合成,活性氧(ROS)和凋亡发生等。

物理性质

【化学名称】:5,6-Dichloro-1,1′,3,3′-tetraethyl-imidacarbocyanine iodide
【分子式】:C25H27Cl2IN4
【分子量】:~600
【状态】:红色粉末
【溶解性】:DMSO
【纯度】:≥95%
【储存条件】:-20℃避光干燥

使用方法

【染色工作液制备 】
JC-10储存液制备:取本品溶于无水DMSO配制成2mg/ml储存液(比如5mg JC-10加入2.5ml DMSO),混匀后,按照单次用量分装,避光冻存,避免反复冻融。
JC-10(1×)工作液制备:取一管JC-10储存液置于室温,使其融化,之后用HHBS或其他缓冲液配制成10-30μM的1×工作液,漩涡混匀待用。
注:对于某些细胞系pH8的工作液可能防止JC-10泄露。
【JC-10染色步骤(荧光酶标仪)】
1)用待测药物处理细胞一段时间(比如,Jurkat细胞用喜树碱camptothecin)处理4-6h)以诱导凋亡。对于空白孔(不含细胞的培养基)加入相应体积的药物缓冲液。
2)按照100μl/孔/96孔板或25μl/孔/384孔板的量加入JC-10工作液到培养孔内。
3)将整个培养板置于37℃,5% CO2孵育15-60min。
4)用荧光酶标仪监测Ex/Em = 500/525 nm(FITC通道)和540/595 nm(TRITC通道)的荧光变化,计算两者荧光信号比值,以判断细胞健康程度。
注:合适的孵育时间取决于细胞类型和细胞浓度。每次试验建议调整孵育时间。
可选:吸掉JC-10染色工作液,按照100μl/孔/96孔板或25μl/孔/384孔板的量加入HHBS缓冲液或其他生理缓冲液,然后再进行荧光信号分析。
【JC-10染色步骤(荧光显微镜或流式细胞仪)】
1)用待测药物处理细胞一段时间(比如,Jurkat细胞用喜树碱camptothecin)处理4-6h)以诱导凋亡。对于空白孔(不含细胞的培养基)加入相应体积的药物缓冲液。
2)离心去上清,调整细胞密度为1-5×105细胞/管。
3)用500µl JC-10染色工作液重悬细胞。
4)室温孵育或37℃,5%CO2孵育10-30 min,避光。
5)用荧光显微镜分别观察Ex/Em = 490/525 nm(FITC通道)和540/595 nm(TRITC通道)的荧光变化;或者用流式细胞仪(FL1和FL2通道进行检测)。
注:合适的孵育时间取决于细胞类型和细胞浓度。每次试验建议调整孵育时间。
可选:离心后吸掉JC-10染色工作液,加入500µl HHBS缓冲液或其他缓冲液重悬细胞使其密度为1-5×105细胞/管,然后再进行荧光分析。

注意事项

储存与稳定性:
避光保存于-20℃,避免反复冻融,有效期通常为12个月。
染色后需在30分钟内完成检测,避免荧光信号衰减。
细胞依赖性:不同细胞系对JC-10的响应可能存在差异,需优化孵育时间及浓度(如HeLa细胞与Jurkat细胞条件不同)。
安全防护:操作时需佩戴手套,避免直接接触强光或高温环境。

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公司简介
西安强化生物科技有限公司位于陕西省西安市未央区,传承十三朝古都历史文化底蕴,融合西安“开放包容、务实创新”的地域文化基因,秉持“科技创新驱动发展,产学研协同共赢”的核心理念,依托由多名博士组建的专业研发团队,聚焦高新生物制品、医药中间体及生物催化材料研发,为制药企业及科研机构提供从克级到公斤级的产品定制开发、工艺优化及质量检测服务。 通过深度联动西安交通大学、西北大学等高校科研资源,公司构建“基础研究-技术开发-产业应用”全链条协同体系,重点突破酶工程、合成生物学等领域技术瓶颈。依托未央区生物医药产业集聚优势,持续推动生物制造技术转化,践行"科技赋能医药未来"的企业使命。

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