这是一款重组兔单克隆抗体,宿主来源为兔,抗原名称是 Myoglobin,其分子别名包括 Mb、MB。该抗体的免疫原是重组蛋白,细胞定位在细胞质,对应的登录号是 P02144,克隆号是 SDT - 097 - 10,抗体类型为重组单克隆抗体,可应用于免疫细胞化学(ICFCM)、免疫组化(IHC - P)、免疫印迹(WB)、免疫荧光(IF)实验,与人(Hu)、小鼠(Ms)、大鼠(Rt)的相应抗原发生反应。其纯化方式是 Protein A 纯化,浓度为 1mg/ml,性状为液体,缓冲体系为 PBS,储存条件是在收到日期起的 12 个月内,4℃保存。在稀释度方面,WB 实验推荐稀释度为 1:500,IHC - P 实验推荐稀释度为 1:1000,ICFCM 实验推荐稀释度为 1:250,IF 实验推荐稀释度为 1:1000。
背景方面,肌红蛋白是一种存在于骨骼肌(附着在骨骼和肌腱上的肌肉)和心肌中的蛋白质。其主要功能是为肌肉细胞(肌细胞)提供氧气。所有细胞都需要氧气才能正常工作。肌红蛋白与血红蛋白关系较远,与血红蛋白相比,肌红蛋白对氧的亲和力更高,且不像血红蛋白那样与氧具有协同结合。在人体中,肌红蛋白仅在肌肉损伤后才会出现在血液中。
在验证数据方面,流式细胞术分析显示,SK - BR - 3 细胞标记肌红蛋白抗体(1/250 稀释度)与兔单克隆 IgG(黑色)同种型对照和未标记对照(未用一抗和二抗孵育的细胞)(蓝色)相比,呈现红色。使用山羊抗兔 IgG Alexa Fluor®488 作为二抗。
在免疫印迹实验中,以肌红蛋白兔单克隆抗体作为一抗,稀释度为 1/500,二抗为山羊抗兔 IgG(H + L)HRP 结合物,稀释度为 1/10000 时,小鼠脑匀浆 20µg、小鼠心肌匀浆 20µg、小鼠骨骼肌匀浆 20µg 的预测分子量为 17kDa,观察到的分子量为 14kDa;大鼠脑匀浆 20µg、大鼠心肌匀浆 20µg、大鼠骨骼肌匀浆 20µg 的预测分子量为 17kDa,观察到的分子量为 14kDa。
在免疫组化实验中,该抗体在人、小鼠、大鼠的心肌石蜡切片中均显示出阳性染色,在人骨骼肌石蜡切片中也显示出阳性染色,而在人肝脏石蜡切片中显示出阴性染色。实验中抗体稀释度为 1/1000,随后使用山羊抗兔 IgG H&L(HRP)即用型进行检测,用苏木精进行复染,且在 IHC 染色前进行了热介导的抗原修复,使用 Tris/EDTA 缓冲液(pH9.0)。
在免疫荧光实验中,该抗体在人的心肌石蜡切片中显示出阳性染色,在人的肝脏石蜡切片中显示出阴性染色。实验中抗体稀释度为 1/1000,随后使用山羊抗兔 IgG - H&L(Alexa Fluor®488)作为二抗,稀释度为 1/1000,用 DAPI 进行复染,且在 IF 染色前进行了热介导的抗原修复,使用 Tris/EDTA 缓冲液(pH9.0)。
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