分子生物学试剂

AnnexinV-EGFP/PI

基本信息
产品名称:
AnnexinV-EGFP/PI
英文名称:
Annexin V-EGFP/PI双染细胞凋亡检测试剂盒/Annexin V-EGFP/PI Apoptosis Detection Kit
国产/进口:
进口
产地/品牌:
M3023
型号:
25T/50T/100T/400T
参考报价:
840
总点击数:
2962
更新日期:
2011-07-14
产品类别:

性能参数


一、概述
Mbchem™ Annexin V-EGFP/PI双染法细胞凋亡检测试剂盒可以方便快捷的检测细胞凋亡情况,使用流式细胞仪、荧光显微镜或其它荧光检测设备进行检测  

l 方便:可用流式细胞术或荧光显微镜检测;
l 快速:1 小时内即可完成实验;
l 准确:能准确区分活细胞、凋亡细胞和坏死细胞,并计数各群细胞的比例。
   本试剂盒适用于检测活细胞,不适用于检测组织样本
 

二、产品简介
细胞凋亡普遍存在于生物界,既发生于生理状态下,也发生于病理状态下。细胞凋亡对胚胎发育及形态发生(morphogenesis)、组织内正常细胞群的稳定、机体的防御和免疫反应、疾病或中毒时引起的细胞损伤、老化、肿瘤的发生进展起着重要作用。
在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine, PS)位于细胞膜的内侧,但在细胞凋亡的早期,PS可从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中。Annexin-V是一种分子量为35.8KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与PS高亲和力特异性结合。本试剂盒采用重组人Annexin V-EGFP 融合蛋白作为荧光探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生  
碘化丙啶(Propidine Iodide, PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但在凋亡中晚期的细胞和死细胞,PI能够透过细胞膜而使细胞核红染。因此将Annexin-V与PI匹配使用,就可以将凋亡早晚期的细胞以及死细胞区分开来(图1)
三、试剂盒组分

组分
编号
M3021-1
25 assays
M3021-2
50 assays
M3021-3
100 assays
M3021-4
400 assays
Annexin V-EGFP
M3033
125μl
250μl
500μl
2ml
1×Binding Buffer
M3036-1
10 ml
20 ml
40ml
160ml
Propidium Iodide染色液
M3032
250μl
500μl
1ml
4ml
用户手册
——
1份
1份
1份
1份
 

n Annexin V-EGFP:rh Annexin V由E.coli表达, 20μg/ml储存在Tris-HCl (20mM), NaCl(50mM) 缓冲液中,含1mg/ml BSA。
n 1×Binding Buffer:  Hepes(10 mM) /NaOH (pH 7.4), NaCl (140 mM), CaCl2,(2.5 mM). 经0.2 μm孔径过滤器除菌。
n 碘化丙啶染色液: 25 μg/ml 溶于PBS (pH7.4)中。
注意:
  1、Annexin V-EGFP和碘化丙啶染液应该避光存放和使用。
  2、碘化丙啶有毒,应小心保存和使用,注意个人保护。
 
四、保存条件
    试剂盒所有组分2-8℃避光保存,保质期一年。生产日期请见包装  

五、试剂盒以外自备试剂和仪器
v PBS
v 蒸馏水或去离子水
v 分离收集细胞用的离心机
v 流式细胞仪或荧光显微镜
v 微量移液器

六、操作步骤
ü   操作注意事项 
Ø 由于细胞凋亡是一个快速和动态的过程,因此我们建议您最好在着色后立即进行分析。
  Ø 操作过程中应该带上橡胶或一次性手套,避免接触皮肤

 

Ø 对可能产生污染的器皿/试剂进行清洗并做灭菌处理,最好的方法是在121.5°C高压灭菌1小     时。
Ø 如果您需要固定细胞,请在固定前先将细胞与Annexin V-EGFP进行孵育,并用Annexin V-EGFP结合液洗掉未结合的Annexin V。因为固定产生的细胞碎片可以和Annexin V结合,对结果产生干扰。
Ø 如果细胞样品中含有血小板,如血液样品,请使用含有EDTA的缓冲剂并200×g离心洗去血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,从而干扰实验结果。
Ø 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
Ø 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
Ø Annexin V-EGFP 和Propidium iodide 是光敏物质,在操作时请注意避光。
  Ø 成功的检测凋亡受以下几种因素的影响,如细胞类型、细胞膜上PS 的密度、发生凋亡时PS 翻转的比例、诱导细胞凋亡的方法、所用试剂、诱导凋亡的时间等,把这些影响因素进行优化对实验成功与否至关重要。  

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M3023-4   400次      询价


公司简介

上海美吉生物医药科技有限公司是上海美季生物技术有限公司旗下的一家面向市场提供多种分子生物学方面技术服务的高科技公司,座落在美丽的张江高科技园区。

2008年6月,美季公司顺应市场需求,成立了项目部,为客户提供从实验方案设计,实验过程执行,到后期数据分析等一系列的“全托管”式服务。内容包括454高通量测序,大片段全长鸟枪法测序,cDNA文库构建及EST测序,SNP检测,STRs分析,荧光定量PCR等。为了给客户提供更专业的服务,美季公司经过近一年的精心准备,于2009年2月成立了上海美吉生物医药科技有限公司专门为客户提供专业的项目服务。目前美吉公司拥有一支实力雄厚的技术队伍,有从事分子生物学研究十多年、经验丰富的技术骨干,也有锐意创新进取、拼劲十足的希望之星。我们秉承了美季生物“以客户为本,让客户满意”的服务宗旨,凭借先进的管理方法和标准化的工作流程,为您提供准确、快速、周到的技术服务!


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