抗菌药物残留现场拭子检测试法(STOP)是一种动物组织中抗菌药物残留简单、快速、准确、价廉的微生物学检测方法。
1、适用范围
STOP适用于养殖场、屠宰场、食品加工厂和残留监控机构等对动物的肾脏等组织中青霉素类、大环内酯类、四环素类、氨基苷类、氟喹诺酮类等抗菌药物的多残留检测。
2、测定原理
本法是一种检测动物组织中是否有抗菌药物的微生物学方法。它是基于动物组织的体液能否抑制平皿中敏感微生物的生长来判定组织中是否有抗菌药物的残留。在制备好的培养基上均一地涂上芽孢杆菌悬液,当芽孢生长后,培养基表面呈现均匀的菌苔。吸满组织液的棉拭子放置在培养基上,如果组织液中有抗菌药物,这些药物就会从棉拭子中扩散至培养基中,抑制细菌的生长,在棉拭子头处周围出现明显透明的抑菌圈。
3、测定步骤
菌液涂布 取出培养基和应用工作菌液,平衡至室温。剧烈摇动应用工作菌液,使芽孢混合均匀。取无菌棉拭子浸入应用工作菌液中,待拭子完全浸透后取出均匀涂布于培养基表面。
新霉素纸片和拭子的放置 将棉拭子插入可疑屠体的肾脏组织,待棉拭子吸入饱满的肾脏体液后,用剪刀剪断拭子杆,剩约10~15mm长,置于已涂布菌液的培养基表面,呈兔耳状,同时放置新霉素纸片,轻压,使之与培养基充分接触,避免拭子与新霉素纸片位置挪动。
细菌培养与观察 将培养基置于28~30℃培养18h,观察新霉素纸片和棉拭子周围是否有抑菌圈,同时用测量新霉素纸片的抑菌圈直径。
4、结果判定
若新霉素纸片所产生的抑菌圈直径在20~26mm范围内,棉拭子周围没有抑菌圈者,或抑菌圈直径小于1mm,结果判定为阴性。若新霉素纸片所产生的抑菌圈直径在20~26mm范围内,棉拭子周围有抑菌圈,且抑菌圈直径大于1mm者,结果判定为阳性。若新霉素纸片所产生的抑菌圈直径不在20mm~26mm范围内,则不能进行结果判定,需检查各试验环节,重新操作。
如果STOP的结果为阴性,屠体可立刻投放市场;若STOP的结果为阳性时,屠体可送往实验室作进一步的确证检测,确定残留物的性质和剂量,以适当处理这些屠体。
5、产品特点
STOP试剂盒对常用的兽用抗菌药物如青霉素类、大环内酯类、四环素类、氨基苷类、氟喹诺酮类等五类抗菌药物的最低检测限均低于或等于于我国规定的最高残留限量。简便而经济,不需要复杂的仪器设备,在一般的实验条件下即可操作,可保证残留超标的动物性食品被有效地检出,方法的重现性良好。其灵敏度、精确度、稳定性、特异性指标到达国际同类产品。该试剂盒作为国内首次开发的抗菌药物残留快速检测工具,具有应用面广、操作简便、性能稳定、成本低廉等优点。农业部组织的专家鉴定认为,本产品达到国际先进水平,将为我国兽药管理、食品卫生检疫、进出口贸易等部门全面监控抗菌药物多残留提供有力的技术支撑,具有较大的市场应用价值。