免疫学/诊断检测试剂

禽流感病毒通用型核酸检测试剂盒

基本信息
产品名称:
禽流感病毒通用型核酸检测试剂盒
英文名称:
国产/进口:
国产
产地/品牌:
广州维伯鑫
型号:
25T/50T
参考报价:
详情请咨询13539886748
总点击数:
2154
更新日期:
2025-02-19

性能参数
【产品名称】
商品名称: 禽流感病毒通用型(AIV-U)核酸检测试剂盒(荧光 PCR 法)
Name: Avian Influenza Virus Detection Kit (Real-Time PCR Method)
【包装规格】25T/盒、50T/盒
【预期用途】
       禽流感是禽类流行型感冒的简称,它是由甲型流感病毒的一种亚型(也称禽流感病毒)引起的一种急性传染病,经变异后也能感染人类,被国际兽疫局定为甲类传染病。禽流感病毒(AIV)为正粘病毒科甲型流感病毒属,单股负链 RNA 病毒。依据其外膜血凝素(H)和神经氨酸酶(N)蛋白可分为 H 亚型和 N 亚型,目前已发现 18 个 HA 和11 个 NA 亚型。
本试剂盒适用于检测拭子样品、气管、肺、脑、肠(包括内容物)、肝、脾、肾、心等组织脏器中禽流感病毒 RNA,适用于禽流感病毒感染的诊断、检疫、检测、监测和流行病学调查等。
【检验原理】
       本试剂盒针对禽流感病毒 M 基因高度保守区域设计特异性引物和探针,用一步法荧光 RT-PCR 技术对禽流感病毒 RNA 进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染病料的病原学诊断。
【试剂组成】
说明:不同批号的试剂盒组分不可交互使用。
【储存条件及有效期】】
-20℃±5℃,避光保存、运输、反复冻融次数不超过 5 次,有效期 12 个月。
【适用仪器】
ABI7500、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列荧光定量PCR 检测仪。
【标本采集】
拭子样品:采集咽喉拭子时将拭子每人喉头及上颚裂来回刮 2 次~3 次并旋转,取分泌液;采集泄殖腔拭子
时将拭子深入泄殖腔至少旋转 3 圈并沾取少量粪便;将采样后的拭子分别放入盛有 1.2 mL 样品稀释液(配制方法见 GB/T 18936-2020 高致病性禽流感诊断技术)的 2 mL 采样管中,编号并填写相应采样单。发病禽鸟可无菌采集气管、肺、脑、肠(包括内容物)、肝、脾、肾、心等组织脏器,装入 15 mL 或 50 mL带螺口的有机材料保存管中,编号并填写相应采样单。
【保存和运输】
采集或处理好的样品在 2℃~8℃条件下保存应不超过 24 h;若需长期保存,应放置-70℃以下保存,冻融不超过 3 次。
【使用方法】
1. 样品处理(样本处理区)
1.1 样本前处理
将棉拭子充分捻动、挤干后弃去拭子;粪便,研碎的组织加 PBS 充分研磨,按照 1g 组织加 10 mL PBS 的比
例配成悬液。样品液经 3 000 r/min 离心 10 min,取上清作为核酸检测材料。
1.2 核酸提取
推荐采用广州维伯鑫生物科技有限公司生产的核酸提取或纯化试剂(磁珠法或离心柱法)进行核酸提取,
请按照试剂说明书进行操作。
2. 试剂配制(试剂准备区)
根据待检测样本总数,设所需要的 PCR 反应管管数为 N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照;反应管
数每满 10 份,多配制 1 份),每测试反应体系配制如下表:
将混合好的测试反应液分装到 PCR 反应管中,20μL /管。
3. 加样(样本处理区)将步骤 1 提取的核酸、阳性质控品、阴性质控品各取 5μL,分别加入相应的反应管中,盖好管盖,混匀,短暂离心。
4. PCR 扩增(核酸扩增区)
4.1 将待检测反应管置于荧光定量 PCR 仪反应槽内;
4.2 设置好通道、样品信息,反应体系设置为 25μL;荧光通道选择:检测通道(ReporterDye)FAM,淬灭通道
(QuencherDye)NONE,ABI 系列仪器请勿选择 ROX 参比荧光,选择 None 即可。
4.3 推荐循环参数设置:
5. 结果分析判定
5.1 结果分析条件设定(请参照各仪器使用说明书进行设置,以分析 ABI7500 仪器为例)
反应结束后自动保存结果,根据分析后图像调节 Baseline 的 Start 值、End 值以及 Threshold 值(用户可根据实际情况自行调整,Start 值可设在 3~15、End 值可设在 5~20,使阈值线位于扩增曲线指数期,阴性质控品的扩增曲线平直或低于阈值线),点击 Analyze 自动获得分析结果。
5.2 结果判断
阳性:检测通道 Ct 值≤40,且曲线有明显的指数增长曲线;
阴性:样本检测结果无 Ct 值,且无特异性扩增曲线;
可疑:样本检测结果 40<Ct 值≤45,建议重复检测,如果检测通道仍为 40
5.3 质控标准
阴性质控品:无特异性扩增曲线或无 Ct 值显示;
阳性质控品:扩增曲线有明显指数增长期,且 Ct 值≤32;
以上条件应同时满足,否则实验视为无效。
6. 检测方法的局限性
1.样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关;
2.样本提取过程中没有控制好交叉污染,会出现假阳性结果;
3.阳性对照、扩增产物泄漏,会导致假阳性结果;
4.病原体在流行过程中基因突变、重组,会导致假阴性结果;
5.不同的提取方法存在提取效率差异,会导致假阴性结果;
6.试剂运输,保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降,出现假阴性或定量检测不准确的结果;
7.本检测结果仅供参考,如须确诊请结合临床症状以及其他检测手段。
【注意事项】
1.所有操作严格按照说明书进行;
2.试剂盒内各种组分使用前应自然融化,完全混匀并短暂离心;
3.反应液应避光保存;
4.反应中尽量避免气泡存在,管盖需盖紧;
5.使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服;
6.样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行,以免交叉污染;
7.实验完毕后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器;
8.试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
【参考文献】
[1] 国家质量监督检验检疫总局. GB/T 19438.1-2004 禽流感病毒通用荧光 RT-PCR 检测方法[S].
[2] 国家质量监督检验检疫总局. GB/T 18936-2020 高致病性禽流感诊断技术[S].
公司简介

广州维伯鑫生物科技股份有限公司

是一家从事生物医药研究、产品开发和技术服务的高科技公司,是一家产学研相结合、科工贸一体化的,集试剂的研发、生产、销售及技术服务为一体的生物医药高科技企业。

公司拥有雄厚的技术力量和一流的专业人才,拥有数十位硕士、博士和海外留学人员,同时拥有多位具有高级职称的专业技术人员。目前主要从事分子诊断试剂的研发以及分子生物学、细胞生物学、免疫学、动物学等相关领域的技术服务。公司的核心研发团队已经研制出涵盖分子诊断和免疫检测等领域的180多种产品,具体包括公共卫生系列荧光PCR检测试剂盒、动物疫控系列荧光PCR检测试剂盒、临床/科研类荧光定量PCR试剂盒、转基因鉴定系列检测试剂盒(ZL2006)等,并已经在全国包括北京、上海、杭州、南京、西安、重庆、兰州、郑州、青岛等十多个城市形成分销网络。

公司科研团队具有丰富的科研经验,立足于生物医学领域,以客户需求为导向,建立了实验设计和评估、动物实验、细胞实验、基因水平实验、蛋白质水平实验、整体课题协作服务等平台,为客户提供最佳的实验设计服务和专业的实验解决方案,帮助客户缩短科研周期、节省试验成本,使客户的科学研究具有持续性。

在未来发展中,维伯鑫将坚持不懈地致力于提升产品和服务的质量,并将依托快捷高效的研究平台、丰富的生物医学资源,广泛和深入地开展生物医学领域产品研发和科学研究的工作,为人类健康和生命科学研究服务。质量是生命,创新是灵魂,我们将坚持不懈的秉承这一理念,努力成长为一家诊断/科研试剂和医学科研技术服务最优质供应商。


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