人胚胎祖细胞株SK17克隆来源于已注册的亲代人胚胎干细胞系H9(WA09) (West et al,2008)。它表达肌肉祖细胞的标识基因,如转录因子肌分化-1(M-YOD1)和肌细胞生成素(MYOG),胚胎肌球蛋白重联3(MYH3)(Karsch-Mizrac-hi,I.,et,al,1989),肌动蛋白ACTC1和ACTA1,肌管M钙粘蛋白(CDH15)。它的远端HOX基因表达的是HOXA9,B8,C9。在分化培养基ES-K140分化下,这株细胞表达近肾小球细胞标识,包括肾素蛋白酶(REN)的转录,此激活血管紧张素原生成血管紧张素1(Fuchs et al, 2002), 还相对高的平滑肌标识肌球蛋白重链11(MYH11)和肌动蛋白A2(ACTA2).
阳性mRNA标记:MYOD1, MYOG, MYH3, ACTC1,ACTA1, CDH15
产品信息
来源:人胚胎祖细胞株SK17克隆来源于已在NIH注册的亲代人胚胎干细胞系H9(WA09)(West, M.D.et al,2008)
应用范围:骨骼肌
细胞数:每管含有>500,000细胞, 冷冻保存在1mL含10%DMSO的胎牛血清(FBS)中。
推荐生长培养基:ES-M150
推荐培养环境:细胞应培养在有0.1%明胶涂层的组织培养级别的聚苯乙烯的培养皿上。快速融解,随后用培养基缓慢稀释,细胞最初的接种密度应该是大约20,000细胞/cm2。 细胞应培养在37℃的5%CO2和5%O2可增湿培养箱中,培养基每周至少更换两次。对常规的培养,在细胞长汇合后,按1:3的比例进行传代。
注意:生长汇合后超过两天,不传代将会导致细胞的终末分化。
可用分化培养基:
分化培养基: Cat No. ES-K140
细胞群体倍增时间:大约50个小时
细胞群体倍增:细胞株SK17在12代出售(最初从长汇合1.9cm2细胞培养皿中分离出的克隆设为P1),以1.9cm2细胞培养皿记,其对应大约15倍增,以原始的培养记,其对应大约31.5倍增。在体外,这株细胞有有限的细胞周期,在大约70个细胞群体倍增时停止生长。在正确的使用情况下,这株细胞可以扩增至少10个群体倍增。
质量控制:
无菌试验:HIV(1,2)、HBV、HCV、EBV、细菌、支原体和真菌检测为阴性。
冷冻复苏测试结果:>50% 细胞活性,>25%的附着性,具有生长汇合性,保持原始的细胞形态。
分析证明:请询要
使用限制:这些细胞只能做研究使用。不能人用,也不能以商业的目的使用。获得该细胞株后,用户确保正确使用和操作。
参考:
Fuchs, S., Germain, S., Philippe, J., Corvol, P. and Pinet, F. 2002. Expression of Renin in Large Arteries Outside the Kidney Revealed by Human Renin Promoter/LacZ Transgenic Mouse. Am. J. Pathol. 161(2) 717-725.
Karsch-Mizrachi, I., Travis, M., Blau, H. & Leinwand, L.A. Expression and DNA sequence analysis of a human embryonic skeletal muscle myosin heavy chain gene. Nucleic Acids Res 17, 6167-6179 (1989).
West, M.D., Sargent, R.G., Long, J., Brown, C., Chu, J-S., Kessler, S., Derugin, N., Sampathkumar, J., Burrows, C., Vaziri, H., Williams, R., Chapman, K.B., Larocca, D., Loring, J.F., and Murai, J. 2008. The ACTCellerate Initiative: large-scale combinatorial cloning of novel human embryonic stem cell derivatives. Reg. Med. 3(3): 287-308.