细胞生物学试剂

Sciencell 1001 ECM 内皮细胞培养基

基本信息
产品名称:
Sciencell 1001 ECM 内皮细胞培养基
英文名称:
ECM Endothelial Cell Medium
国产/进口:
进口
产地/品牌:
Sciencell/美国
型号:
500mL
参考报价:
¥1500
总点击数:
422
更新日期:
2026-03-19
产品类别:

性能参数
产品名称 ECM内皮细胞培养基/ECM Endothelial Cell Medium
品牌 Sciencell
货号 1001
规格 500mL(基础培养基)
25mL FBS(货号 #0025)
5mL 内皮细胞生长补充剂(ECGS,货号 #1052)
5mL 青霉素/链霉素溶液(P/S,货号 #0503)
存储 将基础培养基储存在4°C,将ECGS、FBS和P/S溶液储存在-20°C,避光。
航运 基础培养基:室温。补充剂:干冰。
 

一、产品概述
内皮细胞培养基(ECM)与内皮细胞生长补充剂(ECGS,Cat #1052)和25ml胎牛血清(FBS)一起使用时,是一种完整的培养基,设计用于体外正常内皮细胞的最佳生长。它是一种无菌液体培养基,含有必需和非必需氨基酸、维生素、有机和无机化合物、激素、生长因子、微量矿物质和低浓度的胎牛血清(5%)。该培养基由HEPES和碳酸氢盐缓冲,在气氛为5%CO2/95%空气的培养箱中平衡时,pH值为7.4。该培养基的配制(定量和定性)可提供最佳平衡的营养环境,选择性地支持正常内皮细胞在体外的生长。
 

二、产品组成
ECM培养基为即用型完全培养基,主要组成成分包括:
1.基础培养基:采用特殊配方的基础培养液,为细胞提供基本的碳源、氮源、维生素、矿物质等营养物质。
2.胎牛血清(FBS):添加经过严格筛选和质量控制的胎牛血清(终浓度通常为5-10%),提供细胞生长所需的天然生长因子、激素、脂质和黏附蛋白等。
3.内皮细胞生长添加物(ECGS):包含特定的重组蛋白生长因子(如VEGF、EGF、bFGF等)、激素(如氢化可的松)以及其他促进内皮细胞增殖和维持其表型的关键成分。
4.抗生素:通常添加青霉素(Penicillin)和链霉素(Streptomycin)混合液,以预防细菌污染,保障细胞培养环境的无菌性。
 

三、产品特性与优势
1.高特异性:针对内皮细胞的代谢特点和生长需求量身定制,显著提高内皮细胞的贴壁率、增殖速度和传代能力,优于通用型培养基。
2.功能维持:有效维持内皮细胞的典型形态特征(如铺路石样外观)和生物学功能,如血管形成能力、吞噬功能及对血管活性物质的反应性。
3.质量保障:所有原材料均经过严格筛选和质量检测,生产过程遵循标准化操作流程,确保每批次产品质量稳定、性能一致。
4.使用便捷:即开即用的完全培养基形式,无需用户自行配制和添加复杂成分,简化实验操作步骤,节省时间并减少实验误差。
5.低批次差异:通过严格的质量控制体系,最大限度降低不同批次产品间的性能差异,保证实验结果的可重复性。
 

四、适用细胞类型
适用于多种来源的原代内皮细胞培养,包括但不限于:
  • 人脐静脉内皮细胞(HUVEC)
  • 人微血管内皮细胞(HMEC)
  • 人主动脉内皮细胞(HAEC)
  • 小鼠/大鼠主动脉内皮细胞
  • 其他组织来源的大血管或微血管内皮细胞
 
五、储存与运输条件

1.储存条件:收到产品后,应立即置于2-8°C避光保存,请勿冷冻。
2.保质期:在规定储存条件下,自生产日期起保质期通常为6个月,请在保质期内使用,逾期禁止使用。
3.运输条件:采用冰袋低温运输,确保运输过程中温度维持在2-8°C,收到后请及时检查包装及产品状态。
 

六、产品的使用说明
(1)使用前准备
1.复温:若培养基为冷冻储存,使用前需将其从-20℃冰箱取出,置于2-8℃冰箱中缓慢解冻,或在室温下自然解冻,避免使用微波炉等快速加热方式,以防破坏培养基成分。
2.混匀:解冻后的培养基需轻轻颠倒混匀,使其中的营养成分和添加物均匀分布,避免剧烈振荡产生气泡。
3.预热:在进行细胞培养操作前,将所需量的培养基置于37℃恒温培养箱中预热30分钟左右,使培养基温度达到细胞培养的适宜温度。


(2)操作步骤
1.细胞复苏(若适用):
  • 从液氮或-80℃冰箱中取出冻存的内皮细胞,迅速置于37℃水浴锅中摇晃解冻,直至冻存管内仅剩少量冰晶。
  • 用75%酒精擦拭冻存管外壁消毒后,在超净工作台内将细胞悬液转移至含有适量预热ECM培养基的离心管中,轻轻混匀。
  • 以1000-1200 rpm的速度离心5-8分钟,弃去上清液。
  • 向离心管中加入适量预热的ECM培养基,吹打重悬细胞,调整细胞密度后接种于培养瓶或培养板中,置于37℃、5% CO₂的恒温培养箱中培养。
2.细胞传代
  • 当培养瓶中的内皮细胞生长至汇合度达到80%-90%时,即可进行传代。
  • 弃去培养瓶中的旧培养基,用无菌PBS缓冲液洗涤细胞2-3次,以去除残留的培养基和血清。
  • 加入适量的胰蛋白酶消化液,覆盖细胞表面,置于37℃培养箱中孵育2-5分钟,期间在显微镜下观察细胞形态变化,当细胞变圆、间隙增大时,立即加入适量预热的ECM培养基终止消化。
  • 用移液管轻轻吹打培养瓶底部,使细胞完全脱落并形成单细胞悬液。
  • 将细胞悬液转移至离心管中,以1000-1200 rpm的速度离心5-8分钟,弃去上清液。
  • 加入适量预热的ECM培养基重悬细胞,根据需要按一定比例接种于新的培养瓶中,补充足量ECM培养基后,置于37℃、5% CO₂的恒温培养箱中继续培养。
3.细胞换液
  • 常规培养过程中,每隔1-2天更换一次ECM培养基。
  • 弃去培养瓶中的旧培养基,用无菌PBS缓冲液轻轻洗涤细胞1-2次。
  • 加入适量预热的新鲜ECM培养基,置于37℃、5% CO₂的恒温培养箱中继续培养。
 
(3)注意事项 
1.操作全过程需严格遵守无菌操作技术,避免细菌、真菌等微生物污染。
2.培养基在使用前应检查是否有浑浊、沉淀、颜色异常等现象,若出现上述情况,禁止使用。
3.避免培养基长时间暴露于光线直射下,以防某些敏感成分分解失效。
4.不同批次的培养基可能存在轻微差异,建议在使用新批次培养基时进行小范围细胞培养测试,确认其适用性。
5.胰蛋白酶的消化时间需根据细胞状态和消化液浓度灵活调整,避免消化过度损伤细胞。
6.培养过程中应密切观察细胞生长状态,如发现细胞生长异常(如形态改变、贴壁不良、污染等),应及时处理。
7.避免反复冻融:培养基一经解冻,请勿再次冷冻,多次冻融会导致营养成分失活和沉淀产生。
8.颜色变化观察:培养基中酚红指示剂可反映pH变化,正常为橙红色;若变为黄色(偏酸性)或紫色(偏碱性),需及时检查培养箱CO₂浓度或是否存在污染。
9.血清沉淀处理:低温储存可能导致血清中部分蛋白成分析出,若出现轻微沉淀,可在37°C水浴中轻轻摇晃至沉淀溶解,不影响使用;若沉淀严重或培养基浑浊,请勿使用。
10.安全提示:本产品仅供科研使用,不可用于临床诊断或治疗,操作时请佩戴适当的个人防护装备(如手套、实验服、护目镜)。
11.细胞系验证:建议定期对培养的内皮细胞进行身份验证(如特异性标志物CD31、vWF免疫荧光染色)和污染检测(如支原体检测)。
 

(4)常见问题及解决方法
1.细胞生长缓慢
  • 可能原因:培养基预热不充分、培养箱温度或CO₂浓度异常、细胞接种密度过低、细胞老化或污染等。
  • 解决方法:确保培养基预热至37℃;检查培养箱参数并校准;适当提高细胞接种密度;更换新的细胞种子;若怀疑污染,及时进行无菌检测并处理。
2.细胞形态异常
  • 可能原因:培养基质量问题、消化过度、污染、培养环境不适等。
  • 解决方法:更换新批次的ECM培养基;优化胰蛋白酶消化时间和操作;检查是否存在微生物污染并清除;确保培养箱内温度、湿度和CO₂浓度适宜。
3.培养基出现沉淀
  • 可能原因:储存温度不当(如反复冻融、温度过低)、培养基中某些成分溶解度变化等。
  • 解决方法:若沉淀在37℃预热后可溶解,且培养基其他性质正常,可尝试继续使用;若沉淀无法溶解或培养基出现其他异常,则应丢弃该批次培养基。
 
七、质量控制标准
每批次产品均通过以下严格质量检测:
  • 无菌性检测:细菌、真菌、支原体检测结果均为阴性。
  • pH值检测:在37°C、5% CO₂条件下,pH值维持在7.2-7.4范围内。
  • 渗透压检测:符合内皮细胞正常生长的渗透压范围。
  • 细胞活力检测:使用标准内皮细胞进行培养,细胞贴壁率>90%,连续传代5次以上仍保持良好生长状态和形态。
  • 内毒素检测:内毒素含量≤0.1 EU/ml。
公司简介

公司简介:
       武汉科昊佳生物成立于2011年是一家进口胎牛血清专业供应商,专注细胞生物学试剂开发、销售、服务的高新技术企业。
主要代理产品如下:
1.进口胎牛血清:美国GIBCO、德国PAN-biotech、以色列BI、澳大利亚Ausgene-X、德国CAPRICORN、美国GEMINI、美国Hyclone等。
2.MP Bio、日本同仁、TAKARA、Biolog微生物鉴定板、Borer清洗产品、台湾旭基。 3.Thermo、SIGMA、QIAGEN、MERCK、LEICA、Millipore、Whatman等。
以好产品+好价格+好服务为经营理念,希望不断发展的科昊佳成为您最佳的选择!

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