细胞生物学试剂

磷酸钙法细胞转染试剂盒

基本信息
产品名称:
磷酸钙法细胞转染试剂盒
英文名称:
Calcium Phosphate Cell Transfection Kit
国产/进口:
国产
产地/品牌:
雅吉生物
型号:
C0508
参考报价:
总点击数:
899
更新日期:
2025-09-25
产品类别:

性能参数
 磷酸钙法细胞转染试剂盒(Calcium Phosphate Cell Transfection Kit),在传统的磷酸钙细胞转染方法的基础上进行了改良,提高了转染效率,并降低了毒性。用磷酸钙法转染细胞,不仅可以瞬时表达,也可以筛选稳定株。

HEK293或HEK293T细胞,即通常所谓的293细胞,是最适合磷酸钙法转染的细胞之一,优化条件后转染效率可以高达90%以上;通常很容易达到40-50%左右的转染效率。大多数常见的细胞例如Hela细胞、CHO细胞等也都适合磷酸钙法转染,但效率比293细胞要略低一些。
本试剂盒不仅适合于大多数贴壁细胞的转染,也适用于一些悬浮细胞的转染。
本试剂盒提供的试剂都经无菌处理,可以直接使用。
关于不同的细胞转染试剂的主要特点和差异方面的比较,以及如何选择适当的细胞转染试剂
本试剂盒足够转染不少于200个细胞样品。
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
C0508-1 BBS溶液 20ml
C0508-2 氯化钙溶液 20ml
说明书 1份

保存条件:
-20℃保存,一年有效。
注意事项:
转染时,把DNA-氯化钙溶液加入到BBS溶液中,不要把BBS溶液加入到DNA-氯化钙溶液中。
高纯度的质粒是获得高转染效率的必要条件,要确保A260/A280大于1.8,并且电泳检测抽提到的质粒90%以上都是超螺旋。
在用磷酸钙法转染细胞时应使用浓度不高于5%的二氧化碳,二氧化碳的最佳浓度为3%左右。
BBS溶液的pH值直接关系到转染效率,尽量避免把BBS溶液长时间暴露在空气中,以免被空气中的二氧化碳酸化。
转染时由于质粒不同、细胞不同,最佳的质粒用量需自行摸索。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1. 对于贴壁细胞:
a) 将细胞培养于培养皿或培养板内,通常在铺板后1-2天内长到70-80%满为宜。后续说明都按6孔板内一个孔进行说明,如果有更多个孔或大小不相同的培养器皿,请自行换算。
b) 在转染前30-60分钟,吸去细胞培养液,加入新鲜的不含抗生素的完全培养液2毫升。注意:转染时最好使用新鲜配制且pH值经过精心调校的培养液;转染用的培养液可以在配制后分装冻存,使用时再解冻。
c) 取2-6微克待转染的质粒DNA (质粒总体积不宜超过20微升),加入到100微升氯化钙溶液中,混匀。
d) 把DNA-氯化钙溶液加入到100微升BBS溶液中,混匀,室温孵育10-20分钟。此时不会产生可见的沉淀。
e) 把DNA-氯化钙-BBS混合物均匀滴加到整个6孔板内。在含5%二氧化碳的37℃细胞培养箱内培养。
f) 根据实验要求和磷酸钙对于不同细胞的毒性不同,在4-16小时后轻轻晃动培养板数次以充分悬浮一些磷酸钙沉淀,吸去含磷酸钙沉淀的培养液,加入2毫升新鲜的完全培养液,继续培养。
g) 通常在转染约24小时后就可以检测到转染基因的表达。
2. 对于悬浮细胞:
a) 离心收集悬浮细胞,用PBS洗涤一次。
b) 按照上面的步骤c)和d)制备DNA-氯化钙-BBS混合物。
c) 每106个细胞的沉淀,用100微升DNA-氯化钙-BBS混合物重新悬浮,室温放置20分钟。
d) 在一个6孔板孔内加入2毫升完全培养液,然后加入来自上一步的细胞-DNA-氯化钙-BBS混合物,混匀。
e) 在含5%二氧化碳的37℃细胞培养箱内培养。
f) 根据实验要求和磷酸钙对于不同细胞的毒性不同,在4-16小时后离心收集细胞,用PBS洗一次,然后用2毫升完全培养液重新悬浮细胞,继续培养。
g) 通常在转染约24小时后就可以检测到转染基因的表达。

公司简介
       上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月,是一家面向生命科学领域,科研机构、高校、院所及企业产品开发研究提供所需要的科研类试剂、耗材、仪器、技术服务等。包括分子生物学、免疫学、微生物学、细胞学,通过公司各个部门所有员工的共同努力在行业内拥有较高知名度,深得新老客户的厚爱,本着“优质、服务、信誉”的精神,坚持以先进的技术、优质的产品、良好的信誉,为国内外广大用户提供优质生物产品和服务。公司在重视产品质量的同时,也建立了一套集技术支持、物流、售后服务等多个部门联动服务体系,努力把我们方便、快捷、周到的服务提供给每一个客户本研究所郑重承诺:质量保证、供货及时、服务周到,公司总投资超过2000万元,并先后引进了自动化设备,组建了专业的研发技术团队。凭借着洁净化的生产车间、标准化的质量管理系统,为生产高质量的产品提供了有效保证。
     雅吉生物自主研发的ELISA试剂盒,在国内众多重点实验室广泛使用,深受广大科研人员的好评,先后在权威杂志文章中被引用。
 
上海雅吉生物科技有限公司以极强的职业精神,积极、负责、坦诚的服务令我们的客户满意! 
客户服务承诺
    以“服务、客户、技术”为根本。客户是我们的核心,坚持以高质量的产品服务客户, 秉持诚信原则,重视客户的意见与感受;我们愿意为大家提供良好的售后服务。希望老师们对我们的服务及工作提出意见,您的满意是我们工作的动力,祝广大师生客户生活工作愉快!
更多产品详情可查询官网:www.yajimall.com

售后服务
试剂盒售后:本公司出售的试剂盒均保质保量,质量问题均可免费退换,另提供免费代测服务。 细胞售后: 1. 细胞运输丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等,重发; 3. 细胞收到当天以及第2,3天请拍照,未告知的视为产品合格。4-10天内出现问题,请提供细胞照片和细胞出现问题的照片以及细胞相关操作的详细步骤,并跟我公司人员及时沟通判定是否重发,具体可以参照我官网或者随货说明书相关售后条款。
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联系方式
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