细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面,改变之一是磷脂酰丝氨酸(PS)从细胞膜内转移到细胞膜外,使PS暴露在细胞膜外表面。Annexin V是一种易于结合到磷脂类如PS的蛋白,可充当一敏感的探针检测暴露在细胞膜表面。PS转移到细胞膜外不是凋亡所独特的,也可发生在细胞坏死中。两种细胞死亡方式间的差别是在凋亡的初始阶段细胞膜是完好的,而细胞坏死在其早期阶段细胞膜的完整性就破坏了。因此,可建立一种用Annexin V结合在细胞膜表面作为凋亡的指示并结合一种染料(如PI、DAPI、7-AAD等)排除试验以检测细胞膜的完整性的检测方法。
实验材料:
试剂:凯基Annexin V-EGFP/EGFP/PE/APC细胞凋亡检测试剂盒等
仪器:低温高速离心机、流式细胞仪、孵育箱、荧光显微镜等
实验内容与方法:
1. 收集细胞,洗涤、悬浮细胞;
2. 加Annexin V-EGFP(或其它)及PI(或其它)混匀,避光、反应;
3. 荧光显微镜、激光共聚焦或流式细胞仪观察和检测。
客户提供:
1、 实验信息
2、实验材料提供
(1)样本材料
新鲜或冷冻细胞不少于2×105个
(2)试剂:
采用凯基生物自产的Annexin V-EGFP/EGFP/PE/APC细胞凋亡检测试剂盒等。或可按客户要求代订和使用其它品牌公司试剂。
服务周期:1周以内(具体视样品数而定)
结果提交:提交实验报告书(包括实验材料、试剂、仪器、实验过程方法、结果及分析)、原始数据、图片,文本或电子版。
收费标准与付费方式:
Annexin V-FITC/EGFP/PE/APC荧光显微镜或流式检测 100元/样品;
Annexin V-FITC/EGFP/PE/APC激光共聚焦检测 250元/样品;
选购网站:http://www.shyuanxiang.cn/