全自动单细胞分选及样品前处理系统
全自动单细胞分选及样品前处理系统使用了皮升级的液体分配技术,以皮升级的液滴分离出了单细胞或颗粒,并且可以使用该系统分配超微量缓冲液或试剂,并允许几乎所有下游应用(包括单细胞蛋白质组样品制备)的小型化,都可以大大降低试剂成本。该系统基于CMOS相机实时明场成像,因此可以在分选单细胞过程中可以实时观察到细胞情况,比如直径大小、伸长率、圆度等。此外,该系统分选过程中非常温和,不会在分选细胞时产生高剪切力损伤珍贵的细胞样品。与流式细胞分选仪等传统方法相比,全自动单细胞分选及样品前处理系统更擅长的是将单细胞从混合样品中分离出来并释放到任意的孔板里(孔板包括96、384、1536或用户自定义的收集板)。此外,还可以执行超微量加液任务,实现集单细胞分选和超微量加液两个功能于一个机器上!该平台通过压电陶瓷喷嘴产生声波控制实现准确的液体转移,喷射液滴单位可以低至300pl。传统移液设备在转移更小体积液体时精密度降低(CV升高),而全自动单细胞分选及样品前处理系统精密度在很广的移液体积范围内都在3%以内,尤其适合研究人员在针对自己关注的全新特征技术领域,需要极小微量反应体系的实验!
技术特点:
√基于温和而高精确的压电声学分配技术
√对分配器喷嘴内的细胞进行自动光学监测
√根据每个样品,机器对分配步骤测绘
√分配后的单细胞具有高活性
√细胞的位置决定是否满足单细 胞条件,从而决定是否在下一液滴中被分选
技术原理:
我们开发了一个非常简单的过程。使用我们的基于玻璃毛细管的PDC技术,可吸取少量微米的细胞悬液,几乎没有死体积。然后,使用专利的分配/成像技术,监测每滴药液的分配情况。我们的PDC分配技术通常分配100-300皮升的液滴体积。由于每个液滴都将被弹出,因此我们监视它是否存在单个单元。如果有一个细胞存在,我们将其存入您选择的目标血管中。它可能是一个微单元,一个微米板,一个幻灯片或其他你喜欢的东西。如果液滴中没有细胞,或者有多个细胞,我们会回收液滴以保证您的宝贵稀有细胞没有浪费。
应用领域:
ü细胞分选
ü单细胞采集
ü细胞克隆扩增
ü细胞组织特异性研究
üNGS组学分析
应用案例
HuBBBTM技术:
HuBBBTM技术是一种非常强大的B细胞永生化系统,然而只有10%的永生化B细胞被成功克隆,因此数据仍非常有限。HuBBBTM和CELLEN ONE的结合,使得克隆的效率显著提升至90%,节省了大量的时间,并确保对最优秀的克隆体的识别。
克隆领域:
目的:展示克隆用于mAb发育的细胞的能力(如CHO、杂交瘤)
困难:确保单独分离和培养的细胞的单克隆性和存活能力
CellenONE方法:在显微镜载片上打印单细胞,验证单克隆性,克隆恢复/存活通过将单克隆分配到96孔板中,并在7天后计数n个菌落/存活。
FACS vs CellenONEX1:
1.比较目的:比较BDfacsaria 3和CellenONEX1的克隆恢复情况
2.实验细胞:具有GFP阴性报告基因和耐药基因融合相关基因的CHO细胞转化。实验时,70%的CHOs为GFP阴性。
3.实验细节:克隆是在96孔板里进行,每个孔与200μl培养基补充肾上腺素选择性抗生素。培养5天后,单菌落至少有5个细胞的孔数为阳性。(GFP+克隆由于选择性存在而被淘汰)
4.预期结果:
i. FACS分类后的成功率在100% (不包括GFP +ve)
ii. CellenONE分选后成功率70%。
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