纳米磁珠法细菌RNA快速提取试剂盒
我们公司利用国际领先技术生产的纳米磁珠试剂盒适用于从细菌细胞中提取总RNA。采用独特的试剂系统配合纳米磁珠可以快速从1-4ml样品中提取几到几十微克完整性好的RNA。提取到的RNA可用于northern, primer extension,RT-PCR,体外翻译,S1酶切图谱,第二代核酸测序,生物芯片等应用。提取过程中不需要抽真空或反复离心,节约您宝贵时间，耗材及经费。 不用苯酚、氯仿、异戊醇,免去您接触有毒、有害试剂。 温馨提示：RNA的得率与样品的类型、储存条件、储存时间长短等有很大关系。
以下试剂、器皿需操作者提前准备：
- 无水乙醇,分析纯异丙醇(IPA),β-巯基乙醇,DNaseI (optional)
- 1-1000ul移液枪及枪头, 1.5 ml离心管，磁力分离架,旋涡混合器,高速离心机
- 如发现BR11 试剂有些浑浊,在37-70 oC水浴中加热几分钟溶解即可
第一次使用需准备的溶液：
- 加7.5 毫升分析纯异丙醇到RWB11试剂瓶里,混合均,并在瓶盖上打勾
- 加10.5 毫升无水乙醇到RWB22试剂瓶里,混合均,并在瓶盖上打勾
1) Lysis Cell and Remove Protein
取 1.5ml（约2 OD)对数前期菌体到 1.5ml 离心管, 7k rpm,1min,弃上清液,如菌量少可再收集一次
如果菌体分泌多糖较多，可加 1ml PBS悬浮，5000rpm, 1min,弃上清，反复洗2-4次
加 600ul 70oC 预热的 BR11 到上步 1.5ml 离心管，充分混匀
70oC, 5-10 min (溶液应变清亮。裂解时间 5-20min 取决于细菌本身)
加 120 ul BR22,120ul 无水乙醇,混匀,室温 5-10分钟
13k rpm, 3分钟
2) Bind RNA to RNA Nano Beads(RNB)
取约 650 ul上清液体到新的 1.5ml 离心管中 (不要取到下面的沉淀)
加 650 ul IPA, 30ul 刚混好的 RNB 磁珠 到上步的离心管,混匀
室温 5min,混匀
把上步的离心管放到磁力分离架上 3-5min,弃上清
3) Purify RNA
加 500 ul RWB11 到上步的离心管,混匀
放到磁力分离架上,1-3 min,弃上清
加 500 ul RWB22 到上步的离心管,混匀
放到磁力分离架上,1-3 min,弃上清
风干 1-3 min
4) Release RNA
加 200 ul REB(RNA elution buffer) 到上步的离心管,混匀
室温 5-10min, 混匀
放到磁力分离架上,3-5分钟
把上清液转到没有 RNase 的干净离心管里,注意不要取到磁珠
如果需要做DNA消化，可直接到下一步 5）Remove DNA。否则可在此步测试RNA样品。
5) Remove DNA (optional)
DNaseI 的用量取决于DNA含量及DNase 的活性，可参照下述方法去除 DNA。
在不含 RNA酶的离心管中加入以下试剂：
混匀, 室温 10 min
70oC,5 min
每个胶孔加 2-5ul RNA 溶液 跑 1.5% 胶检测核酸；RNA 保存在-20 oC 或 -80 oC
DNase 酶处理后的 RNA 可用于 RT-PCR, real time PCR 等 对DNA敏感的 RNA分子生物学应用。
天津迦美惠众科技有限公司公司是一家中美合资的绿色环保型高科技创新企业，中国总部位于天津高新区，美国总部位于纽约。由世界五百强美国公司首席研究员、天津“千人计划”特聘专家李广善博士创立，致力于纳米磁珠及其试剂盒的研发,中试及产业化。公司具有国际一流的纳米材料、生物科技以及试剂盒研发及产业化团队。
公司自主研发出的产品目前有三大类：1)多种粒径多种功能团的纳米磁珠、抗体磁珠；2)可用在动物、植物、微生物、血液、环境水、土壤等的纳米磁珠核酸试剂盒、抗体试剂盒；3)配套的不同规格的磁力分离架等产品。 公司生产的国际上最新一代纳米磁珠及其配套试剂盒产品正在生物类的科研单位、大专院校、生物医药公司、生物检测单位、疾控中心等核酸、蛋白、抗体样品制备及检测中得到广泛应用。产品已销售到北京、天津、广州、深圳、青岛、济南、山西、福建、重庆等地，受到众多用户的好评。我们将以“务实高效”的企业理念为每一位客户提供更优质的产品和更专业的服务。
