耻垢分枝杆菌过表达RV基因菌株
晶诺一直致力于结核分枝杆菌基因组规模基因表达调控文库的建立，其中备受大家关注的核心产品——结核分枝杆菌功能基因敲除文库已基本完成，已成功构建2016个功能基因敲除菌株。为更好地为大家开展基础和应用科研工作提供重要生物资源和技术支撑，我们即将推出新的菌株库——耻垢分枝杆菌过表达结核分枝杆菌功能基因的菌株库，目前已成功构建近4000个过表达H37Rv基因的耻垢分枝杆菌。
研究结核基因功能国际上普遍采用基因敲除、过表达、回补等方式，通过比较分析表型、毒力、转录调控等方面的变化，进一步研究基因功能以及致病机制等。然而结核突变体菌株实验操作成本较高、周期较长，不利于筛选及初步的预实验。鉴于此，我们用易于操作、生长较快速的耻垢分枝杆菌作为模式菌对H37Rv全基因组规模的基因开展过表达菌株的构建，可用于初步实验筛选目的基因和药物作用机制研究等，节省成本及时间。
耻垢过表达菌株构建流程：
PCR扩增结核分枝杆菌目的基因，通过无缝克隆方法将目的基因整合到载体pMV261（游离型载体）多克隆位点处，抽提质粒并测序验证，目前已完成4000余个pMV261-Rv基因质粒库的构建工作。质粒通过电转化方法转入耻垢分枝杆菌中，获得过表达菌株，利用载体上来源于结核分枝杆菌的hsp60基因启动子实现插入基因的表达。
研究方向：
1、毒力基因初步研究，例如感染巨噬细胞→检测细胞因子分泌、细胞自噬、凋亡、病原体存活等→评估该基因的研究价值。
2、耐药基因的筛选，可通过对耻垢过表达菌株的MIC检测评估该基因是否与耐药相关。
3、转录调控机制，某基因过表达后，通过检测其它基因的转录表达水平分析该基因的转录调控功能。
过表达菌株列表详情见链接：
https://www.gene-optimal.com/ms261rv/
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