HI-MMLV Reverse Transcriptase Kit 逆转录
基本信息
产品名称：
HI-MMLV Reverse Transcriptase Kit 逆转录
英文名称：
HI-MMLV Reverse Transcriptase Kit
国产/进口：
国产
产地/品牌：
河北三狮生物
型号：
25T/50T/100T
参考报价：
390-1280元
销售商：
总点击数：
209
更新日期：
2022-02-18
产品类别：
性能参数
产品说明：
本品提供了所有的用于cDNA第一链合成的试剂，其中逆转录酶的RNase H活性较低，在50℃下具有更高的热稳定性和更长的半衰期，可提供较其他逆转录酶更高的全长cDNA产量，能够利用起始RNA稳定地生成具有完整基因代表性的cDNA，优化后的体系显著提高反应的灵敏性，避免假阴性结果。本品可获得代表起始RNA的高保真度的cDNA，适用于灵敏度要求较高的实时荧光定量RT-PCR和芯片实验。本品中HI-MMLV Reverse Transcriptase的浓度为200U/μl。
产品内容：
储存条件：
-15℃至-25℃保存一年，避免反复冻融，使用时注意标签上的有效时间。
活性单位定义：
以Po为模板/引物ly (rA)·Oligo (dT)，在37℃、10min条件下，掺入1nmol的[3H]dTTP所需要酶量定义为1个活性单位（U）。
产品应用：
First-Strand cDNA合成的实验操作方法：
1、在无菌的RNase -free的离心管配制以下体系：
1）2µl Random Primer (10µM)或2pmol基因特异引物或2µl Oligo (dT)16 Primer (10μM)。
2）10pg 5µg总RNA或50-500ng mRNA；0.4µl dNTP Mixture（dATP、dGTP、dCTP和dTTP各25mM）。
3）补RNase-Free ddH2O到10µl。
2、65℃保温5min后迅速在冰上冷击至少1min以上。
3、离心数秒钟使模板RNA/引物的变性溶液聚集于离心管底部。
4、在上述离心管中配制下列逆转录反应液。
5、轻弹离心管，50℃保温30-60min，或随机引物的反应在37℃保温60min，其他引物的反应在37℃保温60min。
6、80℃保温15min后冰上冷却，得到的cDNA溶液可直接用于2nd-Strand cDNA的合成或者PCR扩增等，PCR扩增时cDNA溶液的使用量建议使用10µl。
注意事项：
本品提供了所有的用于cDNA第一链合成的试剂，其中逆转录酶的RNase H活性较低，在50℃下具有更高的热稳定性和更长的半衰期，可提供较其他逆转录酶更高的全长cDNA产量，能够利用起始RNA稳定地生成具有完整基因代表性的cDNA，优化后的体系显著提高反应的灵敏性，避免假阴性结果。本品可获得代表起始RNA的高保真度的cDNA，适用于灵敏度要求较高的实时荧光定量RT-PCR和芯片实验。本品中HI-MMLV Reverse Transcriptase的浓度为200U/μl。
产品内容：
| 试剂组成 | ER001-01 (25T) | ER001-02 (50T) | ER001-03 (100T) |
| HI-MMLV Reverse Transcriptase (200U/μl) | 25μl | 50μl | 100μl |
| 5x HI-MMLV Buffer (Mg2+ plus) | 125μl | 250μl | 500μl |
| 10x HI-MMLV Solution I | 60μl | 120μl | 240μl |
| RNase Inhibitor (40U/μl) | 25μl | 50μl | 100μl |
| RNase-Free ddH2O | 1ml | 1ml | 1ml*2 |
| Oligo (dT)16 Primer (10μM) | 60μl | 120μl | 240μl |
| Random Primer (10μM) | 60μl | 120μl | 240μl |
| dNTP Mixture (25mM each) | 12μl | 25μl | 50μl |
-15℃至-25℃保存一年，避免反复冻融，使用时注意标签上的有效时间。
活性单位定义：
以Po为模板/引物ly (rA)·Oligo (dT)，在37℃、10min条件下，掺入1nmol的[3H]dTTP所需要酶量定义为1个活性单位（U）。
产品应用：
- First-Strand cDNA的合成；
- cDNA Probe的制备；
- 一步法RT-PCR反应；
- Real Time PCR反应和芯片实验。
First-Strand cDNA合成的实验操作方法：
1、在无菌的RNase -free的离心管配制以下体系：
1）2µl Random Primer (10µM)或2pmol基因特异引物或2µl Oligo (dT)16 Primer (10μM)。
2）10pg 5µg总RNA或50-500ng mRNA；0.4µl dNTP Mixture（dATP、dGTP、dCTP和dTTP各25mM）。
3）补RNase-Free ddH2O到10µl。
2、65℃保温5min后迅速在冰上冷击至少1min以上。
3、离心数秒钟使模板RNA/引物的变性溶液聚集于离心管底部。
4、在上述离心管中配制下列逆转录反应液。
| 试剂名称 | 使用量 | 终浓度 |
| 上诉模板RNA/引物的变性溶液 | 10µl | - |
| 5x HI-MMLV Buffer (Mg2+ plus) | 4µl | 1× |
| 10x HI-MMLV Solution I | 2µl | 1× |
| RNase Inhibitor (40U/μl) | 1µl | 2U/µl |
| HI-MMLV Reverse Transcriptase (200U/μl) | 1µl | 10U/µl |
| RNase-Free ddH2O | Up to 20µl | - |
6、80℃保温15min后冰上冷却，得到的cDNA溶液可直接用于2nd-Strand cDNA的合成或者PCR扩增等，PCR扩增时cDNA溶液的使用量建议使用10µl。
注意事项：
- 当同时需要进行数次反应时，应先配制各种试剂的混合液（Master Mix；其中包括RNase Free dH2O、Buffer、酶等），然后再分装到每个反应管中。这样可使所取的试剂体积更准确，减少试剂损失，避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验之间产生的误差。
- HI-MMLV Reverse Transcriptase (200U/μl)在使用前要小心地离心收集到反应管底部。由于酶保存液中含有50%的甘油，粘度高，分取时应慢慢吸取。同时，要使用精确、量程适合的移液枪，并且不要使枪头插入液面过深，否则会因枪头壁粘着造成损失，而使酶量不足。
- 5x HI-MMLV Buffer (Mg2+ plus)在使用前需振荡混匀，轻轻离心后使用。
- 分装试剂时务必使用新的枪头，以防止样品间污染。
公司简介
石家庄赛迪生物科技有限公司成立于2015年，是一家提供实验室检测设备、实验室建设整体解决方案的综合服务性公司。公司团队由从事实验室检测设备市场多年的销售团队和各大院校生物相关专业技术人员组成。公司根据客户不同需求，提供实验室构建方案，优势产品整合，技术培训等。目前公司和华南农业大学、暨南大学、河北农业大学等多所高校有产品联合开发项目，拥有专业的销售团队和技术服务团队。为了给客户提供全面完善的实验室构建服务方案，目前公司产品包括实验室通用设备，食品安全分子检测产品设备，试剂耗材等等。
公司总经理时凡荣获2015年河北省优秀青年创业奖，河北农业大学优秀毕业生创业实践类项目特等奖，曾在广州知名生物科技公司担任营销总监一职，2015年带领原来的销售以及技术团队建立该公司。凭借过硬的技术和良好的服务质量赢得了市场诸多客户的认可，自公司创建以来，服务客户对象包括北京食品药品监督管理局、青县市场监督管理局、武强县食品和市场监督管理局等多个政府检测机构。
公司本着“以人为本、服务至上”的经营理念，“厚德载物、勇于开拓”的企业精神，以优质的产品和专业的服务，为工商、食品药品监督、高校、农业等行业提供完善的实验室仪器设备集成以及实验室建设解决方案和技术支持。
公司使命：用最优势的产品和服务方法解决中国食品安全问题，服务大众，回报社会。
公司总经理时凡荣获2015年河北省优秀青年创业奖，河北农业大学优秀毕业生创业实践类项目特等奖，曾在广州知名生物科技公司担任营销总监一职，2015年带领原来的销售以及技术团队建立该公司。凭借过硬的技术和良好的服务质量赢得了市场诸多客户的认可，自公司创建以来，服务客户对象包括北京食品药品监督管理局、青县市场监督管理局、武强县食品和市场监督管理局等多个政府检测机构。
公司本着“以人为本、服务至上”的经营理念，“厚德载物、勇于开拓”的企业精神，以优质的产品和专业的服务，为工商、食品药品监督、高校、农业等行业提供完善的实验室仪器设备集成以及实验室建设解决方案和技术支持。
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