可以提供高灵敏度ATP检测试剂盒,可满足各种需要,如总ATP检测、微生物ATP检测、细胞内ATP检测、卫生学ATP检测等,最高灵敏度可达1attomole, 为市场可提供的最高灵敏度的ATP试剂盒。试剂盒中提供ATP内标,比一般的ATP标准品曲线检测方法得到的样品ATP浓度更精确。
Intracellular ATP Kit HS
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在消除胞外ATP干扰的前提下,可以检测细胞以及微生物组织中的ATP
快速分析:几分钟内得到结果
高灵敏度:10-17 mol ATP(~5细菌)
可靠:液状ATP标准品
方便:可选择微孔板和试管
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使用目的
这个试剂盒用于检测活细胞内的ATP,样品中细胞外的ATP通过酶已经被降解了。所有的活细胞中都含有ATP,在不同的细胞过程中,ATP都充当着能量流的角色。在各类型的细胞中,细胞内的ATP都被严格的调节在一个相似的水平。在这里,ATP成了一个很好的细胞评估值。大部分细菌细胞含有大约2×10-18mol/细胞的ATP浓度,而大部分的真核细胞,由于它们的体积较大,含有的ATP浓度在10-15mol/细胞或更多。用灵敏的化学发光检测仪,这个试剂盒的检测极限在10×10-18molATP。
应用
如果不考虑动物细胞中ATP的降解,这个试剂盒的灵敏度使得它可以用于众多环境条件下低ATP水平的检测。
1.液体中的细菌生物学控制(例如饮用水,工程用水,饮料和啤酒)
2.药品和化妆品中的生物量检测
3.物体表面附着的细胞量
4.洗涤的质量确认
5.细菌生长
6.抗生素对细菌的作用效果
分析原理
在分析前,胞外的ATP用酶降解掉;然后用抽提剂B/S释放胞内的ATP,同时使ATP降解酶失活。最后用ATP试剂HS进行分析。
体系的发光量与ATP的量成正比,并能通过化学发光检测仪检测。在加入已知量的ATP标准品的前后测量发光值。这样可以计算出样品中的ATP浓度,结果用pmol(10-12mol)表示。
仪器
任何的管式或微孔板式化学发光检测仪都可以使用。如果使用的是微孔板式化学发光检测仪,推荐有两个加样器。推荐使用具有双检测功能的Berthold Detection Systems的化学发光仪。
试剂盒成分
这个试剂盒能够进行150-375次的分析(每一个ATP试剂HS小瓶中试剂用管式化学发光仪检测可以做25次,用微孔板式化学发光仪检测可以做62.5次)。
1. ATP试剂HS(6小瓶)。冻干试剂中含有荧光素酶和luciferin。在工作状态的试剂体系中,荧光素酶消耗ATP的速率大概为6%/min。
2. 稀释缓冲液B,10ml(6小瓶)。缓冲液用于配置ATP试剂HS工作溶液。
3. 抽提剂B/S,10ml(1小瓶)。
4. ATP标准品,5ml(1小瓶,10-7mol/l ATP)。
5. ATP去除试剂(1小瓶)。
6. 稀释缓冲液C,10ml(1小瓶)。缓冲液用于配置ATP去除试剂工作溶液。
工作溶液准备
1. ATP去除试剂工作溶液:稀释缓冲液C与ATP去除试剂混合均匀。
2. ATP试剂HS工作溶液:1瓶稀释缓冲液B与1瓶ATP试剂HS混合均匀。
分析步骤
1. 混合样品与ATP去除试剂工作溶液,并在室温下孵育10min。
2. 加入抽提剂B/S。
3. 加入ATP试剂HS工作溶液,并测量发光值,Ismp。
4. 加入10μl 100nmol/l ATP标准品,也就是1pmol ATP,并测量发光值,Ismp+std。
结果计算
用以下等式计算样品中的ATP(pmol)量:
产品特性:
灵敏度:10-17molATP
检测次数: 150(管),37 5(微孔板)