抗体纯化填料系列
杭州纽龙生物科技有限公司（NUPTEC）成立于2009年，是国内为数不多的蛋白纯化填料生产企业，产品涵盖：亲和纯化填料、预活化填料、离子交换填料、疏水作用填料、凝胶过滤填料，产品以质量优、价格廉、品种多等特点得到广大下游客户的认可，产品远销国内外。
常用三款Nuptec抗体纯化填料介绍：
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蛋白A 琼脂 糖凝胶FF |
蛋白G 琼脂 糖凝胶FF |
耐碱 蛋白A 琼 脂糖凝胶FF |
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载量 |
≥40 mg/ml IgG |
≥40 mg/ml IgG |
≥40 mg/ml IgG |
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推荐流速 |
20 ~ 100 cm/h |
20 ~ 100 cm/h |
20 ~ 100 cm/h |
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主要特点 |
特异性结合抗体Fc 段，亲和力较proteinG 低一些，纯化多抗常用 |
结合抗体Fc段，亲和力较proteinA强，结合抗体亚型较多，一般腹水纯化常用 |
特性基本和普通proteinA 相似但是能耐受0.5M 碱洗，可以用 0.1 ~ 0.5 M NaOH 溶液清洗和去除热源，使用寿命长，目前广泛用于单抗药物的纯化 |
规 格： 20 ml，100 ml，500ml,1 L，1 ml预装柱，5 ml预装柱，特殊规格订制(实际填料体积）
运 输： 2 ~ 25℃，常压、避光
贮 存： 20%乙醇，2 ~ 8℃
保质期： 3 年
应用举例：
蛋白A琼脂糖凝胶
结合缓冲液：20 mM磷酸缓冲液，150 mM NaCl，pH 7.4
洗脱缓冲液：0.1 M柠檬酸缓冲液，pH 4.0
中和缓冲液：1 M Tris ~ HCl，pH 9.0
1)1 ml重组蛋白A琼脂糖凝胶预填柱用5 ~ 10个柱床体积的蒸馏水洗去保存液；
2)用结合缓冲液结合缓冲液平衡 5 ~ 10个柱床体积；
3)将5 ml兔多抗血清用结合缓冲液稀释到50 ml，0.45 μm滤膜过滤上样；
4)用结合缓冲液再洗 5 ~ 10个柱床体积；
5)用洗脱缓冲液洗脱抗体，收集洗脱峰，并用中和缓冲液调节其pH至中性；
6)每次使用后用3 ~ 5个柱床体积的0.1 M 柠檬酸缓冲液（pH 3.0）再生清洗；
7)SDS-PAGE（图1）电泳分析洗脱下来的兔多抗纯度在95%以上
重组蛋白G琼脂糖凝胶
结合缓冲液：20 mM磷酸盐缓冲液（PB），pH 7.4
洗脱缓冲液：0.1 M甘氨酸-盐酸缓冲液，pH 2.7
中和缓冲液：1 M Tris-HCl，pH 9.0
1)1 ml重组蛋白G琼脂糖凝胶预填柱，用5 ~ 10个柱床体积的蒸馏水洗去保存液；
2)用结合缓冲液平衡 5 ~ 10个柱床体积；
3)将5 ml兔多抗血清用结合缓冲液稀释至50 ml，0.45 μm滤膜过滤上样；
4)用结合缓冲液平衡 5 ~ 10个柱床体积至基线；
5)用洗脱缓冲液洗脱抗体，收集洗脱峰，并用中和缓冲液调节其pH至中性；
6)每次使用后再用3 ~ 5个柱床体积的洗脱缓冲液再生清洗；
7)SDS-PAGE（图1）电泳分析洗脱下来的兔多抗纯度在95%以上。
