英国OXOID哥伦比亚血琼脂基础
哥伦比亚血琼脂基础,CM0331B:
配方表:
| 成分* | 含量 g/L |
| 特殊蛋白胨 | 23.0 |
| 淀粉 | 1.0 |
| 氯化钠 | 5.0 |
| 琼脂 | 10.0 |
| pH 7.3±0.2 @25℃ |
制备方法:
取39g至1L蒸馏水中,煮沸至培养及完全溶解。121℃高压灭菌15分钟,冷却到50℃,加入5%脱纤维血。
产品描述:
传统上说,血琼脂基础可以是酪蛋白水解物或者肉源浸出物培养基。前者的优点在于可以快速产生大菌落,后者的优点在于可以产生明显的溶血环和良好的菌落区分性。
哥伦比亚血琼脂基础CM0331结合了这两种类型的培养基的优点,可以产生改良的多方面的优点。 这种新的培养基基础在一些应用中提现了多功能性和优越性。
布鲁氏菌:
添加1小瓶布鲁氏菌选择性添加剂SR0083到500ml已经灭菌的哥伦比亚血琼脂基础CM0331中, 培养基中要含5-10% V/V的灭活马血和1% w/v的葡萄糖。
弯曲杆菌和幽门螺旋杆菌:
可添加下列添加剂以制备选择性培养基:
Skirrow弯曲杆菌选择性添加剂SR0069
或Butzler弯曲杆菌选择性添加剂SR0085
或改良Butzler(ISO)弯曲杆菌选择性添加剂SR0214
或弯曲杆菌选择性添加剂(Blaser-Wang) SR0098
或幽门螺旋杆菌选择性添加剂SR0147
以上添加剂取1瓶加入500ml灭菌的哥伦比亚血琼脂基础CM0331中,培养基中含有弯曲杆菌生长添加剂SR0232和5-7% v/v的马血或羊血(SR0048,SR0050 or SR0051).
可以用哥伦比亚血琼脂基础CM0331加卵黄乳液SR0047制备成Egg Yolk Emulsion Agar 卵黄乳液琼脂,适合作为幽门螺旋杆菌的分离培养基。
革兰氏阳性球菌:
see 葡萄球菌/链球菌选择性添加剂 Staph/Strep Selective Supplement SR0070
see 改良CNA选择性添加剂 Modified CNA Selective Supplement SR0176
see 链球菌选择性添加剂 Streptococcus Selective Supplement SR0126
加德纳菌:
添加阴道加德纳菌选择性添加剂SR0119
其他应用:
Elek Test
哥伦比亚血琼脂基础CM0331加入无菌血,配成有效的白喉杆菌的毒理测试培养基。在经过一系列实验操作后,毒素-抗毒素的沉淀的线在48小时内清晰可见。
Nagler Test
添加5ml Fildes Extract SR0046 和 10ml of Egg Yolk Emulsion SR0047到100ml的无菌哥伦比亚血琼脂基础中,可作为产气荚膜梭菌的诊断培养基,当使用产气荚膜梭菌抗毒素(Nagler Test)测试时,与新霉素(100-125m/ml)一起使用。
Reversed CAMP Test for Clostridium perfringens
这个方法是个高度选择性的专一性的方法,可以是Nagler Test的另外一个选择,用来测试产气荚膜梭菌。
技术方法:
将疑似产气荚膜梭菌的培养基上的菌落接种到哥伦比亚血琼脂平板上,接种成一条直线。将已知的产生CAMP因子的无乳链球菌的过夜培养的或者旧的培养基接种上去,与前一次接种呈直角,但要小心与第一次接种不要碰到。35-37℃厌氧培养18-24小时。
阳性的reverse CAMP test结果会形成一个箭头形状的溶血,在产气荚膜梭菌和无乳链球菌的两条培养线的中间。
储存:
干粉10-30℃保存,效期之前使用,麦色粉末。制成培养基2-8℃保存。
注意事项:
布鲁氏菌具有高度的传染性,需要在具有保护措施的环境中对其培养:5-10%的二氧化碳环境中培养24-48小时;
空肠弯曲菌最佳生长在42℃的微需氧环境中,胎儿弯曲杆菌亚种除外,可使用微需氧产气袋CN0025或CN0035;
葡萄球菌/链球菌培养基应在35℃培养18小时,富二氧化碳环境下使用该培养基将抑制金黄色葡萄球菌的生长;
添加链球菌选择性添加剂SR0126后,可将培养基置于需氧或者微需氧环境中35℃培养18小时;
同时添加了两种添加剂的培养基应在制成后18小时内使用能达到最佳的选择性效果;
添加加德纳菌添加剂的培养基应置于35℃ 含7%二氧化碳环境下培养48小时;
Carry out confirmatory tests on all colonies from horse blood medium and on beta-haemolytic colonies from human or rabbit blood medium.
Incubate plates of Clostridium E-Y Agar anaerobically at 35°C for 18 hours, look for lecithinase activity (pearly layer) and for proteolysis. Lecithinase activity is inhibited in the presence of specific anti-toxin.
链球菌在哥伦比亚血琼脂平板上的生长:

葡萄球菌在哥伦比亚血琼脂平板上的生长:
