蛋白酶抑制剂混合物
- 1. Liu W, Qin F, et al. "Sodium aescinate significantly suppress postoperative peritoneal adhesion by inhibiting the RhoA/ROCK signaling pathway." Phytomedicine. 2020;69:153193. PMID:32120245
- 2. Monteiro-Brás T, Wesolowski J, et al. "Depletion of SNAP-23 and Syntaxin 4 alters lipid droplet homeostasis during Chlamydia infection." Microb Cell. 2019 Dec 3;7(2):46-58. PMID:32025513
- 3. Wang H, Wang Z, et al. "Homotypic targeting upconversion nano-reactor for cascade cancer starvation and deep-tissue phototherapy." Biomaterials. 2020;235:119765. PMID:31991338
- 4. Cap KC, Kim JG, et al. "P-Tyr42 RhoA GTPase amplifies superoxide formation through p47phox, phosphorylated by ROCK." Biochem Biophys Res Commun. 2020;523(4):972–978. PMID:31973815
- 5. Zhang H, Read C, et al. "The Human Cytomegalovirus Nonstructural Glycoprotein UL148 Reorganizes the Endoplasmic Reticulum." mBio. 2019 Dec 10;10(6). pii: e02110-19. PMID:31822584
在体外从培养基中提取分泌的蛋白质时，蛋白质产生停止，降解增加。细胞粗提取物中含有许多能够降解提取物中蛋白质的内源性酶，如磷酸酶和蛋白酶。提高完整蛋白质产量的最佳方法是加入已知存在的那些酶的抑制剂。
Protease Inhibitor Cocktail用于组织培养基以提高蛋白质的稳定性。该cocktail起到抑制降解非磷酸化或磷酸化蛋白质底物的蛋白酶的作用。这个cocktail用作组织培养基的补充物，以阻止分泌蛋白的降解。
该Protease Inhibitor Cocktail包含单独的组分，包括Aprotinin、Bestatin、E-64、Leupeptin和Pepstatin A，这些物质对半胱氨酸、丝氨酸、天冬氨酸和氨基肽酶具有广谱特异的抑制性。已经用组织培养基对这种蛋白酶抑制剂cocktail进行了优化和测试。该蛋白酶抑制剂cocktail溶剂为DMSO，作为即用型溶液提供。
批次: 1
建议适当地稀释cocktail以用于不同的细胞系。稀释测试至少以200倍的稀释倍数开始，因为DMSO浓度高于0.5%可能对细胞有害。由于不同的细胞系敏感性可能有差异，该cocktail可能需要进一步的稀释。这个cocktail的作用在培养基中可维持48小时，48小时后需要更换含有cocktail的新鲜培养基。
应用：WB，Co-IP，pull-down，IF，IHC，kinase assay等。
| Catalog No. | Product Name | Summary | Targets | CAS Number | Smiles |
| A2574 | Aprotinin | 牛胰蛋白酶抑制剂 | Proteases|Serine Protease | 9087-70-1 | CC(O)=O.CC.CC.CCccC.[R].[P].[2H].[L].[E].[P].[P].[Y].[3H].[G].[KH].[R].[R].[Y].F.[Y].[*].[L].F.[V].[Y].[G].[G].[R].[KH].[R].N.N.F.[KH].S.[*].[2H].[R].[G].[G].[*].[KH].[*].[3H].C.[*].F.[P].[*].I.I.N.[Q].[3H].[M] |
| A2575 | Bestatin | 氨肽酶抑制剂 | Proteases|Aminopeptidase | 58970-76-6 | CC(C)CC(C(=O)O)NC(=O)C(C(CC1=CC=CC=C1)N)O |
| A2576 | E-64 | 半胱氨酸蛋白酶（cysteine protease）抑制剂 | Proteases|Cathepsin | 66701-25-5 | CC(C)CC(C(=O)NCCCCN=C(N)N)NC(=O)C1C(O1)C(=O)O |
| A2570 | Leupeptin, Microbial | 丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶抑制剂 | Proteases|Serine Protease | 103476-89-7 | O=C(C(C([H])([H])C(C([H])([H])[H])([H])C([H])([H])[H])([H])N([H])C(C([H])([H])[H])=O)N([H])C(C(N([H])C(C([H])=O)([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])/N=C(N([H])[H])/N([H])[H])=O)([H])C([H])([H])C(C([H])([H])[H])([H])C([H])([H])[H] |
| A2571 | Pepstatin A | 天冬氨酸蛋白酶抑制剂 | Proteases|Other Proteases | 26305-03-3 | 3-hydroxy-4-[2-[[3-hydroxy-6-methyl-4-[[3-methyl-2-[[3-methyl-2-(3-methylbutanoylamino)butanoyl]amino]butanoyl]amino]heptanoyl]amino]propanoylamino]-6-methylheptanoic acid |
| -20°C条件下储存，稳定12个月以上。 | |||||
1）Q：实验中经常用PMSF来保护蛋白，蛋白酶抑制剂Cocktail和它比有什么优势？
A：PMSF只能抑制一种蛋白酶（丝氨酸蛋白酶），Cocktail抑制的更全面且更加持久；此外，PMSF毒性较高并且PMSF更容易降解失效。
2）Q：抑制剂Cocktail可以反复冻融吗？
A：可以反复冻融，但是尽量减少反复冻融的次数。
3）Q：应该选择片剂的Cocktail还是溶液型Cocktail？
A：两种类型的产品都含有添加物，片剂中含有若干种公司专利的未经公开的医药成分，而溶液型产品中含有溶剂成分DMSO。一般来说这些添加物是不会影响产品效果的。溶液型需要的加工步骤少，因而质量好价格低。而片剂产品在储存和运输两个环节具有优势。（片剂能够在4°C储存而不需要-20°C）。
4）Q：用了Cocktail，蛋白仍然降解是怎么回事？
A：蛋白酶抑制剂Cocktail作用是保护蛋白免受蛋白酶降解，提高蛋白得率。对于绝大多数蛋白，Cocktail都有很好的效果。如果还是出现蛋白得率低的情况，可检查实验操作步骤和设计，减少导致蛋白降解的环节。例如，细胞处理前，先要将Cocktail加入到裂解液中并混匀，收集完细胞后立即加入准备好的裂解液。
APExBIO（APExBIO Technology LLC）总部位于美国休斯顿，是一家自主研发生产、致力于为生命科学研究提供高性能产品和优质服务的供应商。公司现阶段涵盖丰富的产品线，主要包括： 1. 10000多种小分子抑制剂/激动剂——用于肿瘤、免疫、神经等生物医药各研究领域
2. 40余个高通量化合物库——药物筛选最佳工具
3. 分子生物学产品——PCR、逆转录、qPCR、克隆、高通量DNA文库构建等试剂和试剂盒，公司对相关酶进行改造，使其稳定性、催化活性等有极大的提升
4. 体外转录——公司拥有国内独家mRNA体外转录合成平台，提供优质的修饰核苷酸、转录酶等各种合成原料，并可提供mRNA订制服务
5. Cy染料、生物素——高纯度、种类丰富的Cy染料和生物素可用于蛋白检测、纯化等研究
6. 免疫学产品——各类细胞器染料及靶标信号放大的链霉亲和素系列和TSA系列
7. 试剂盒——高性能的MTT、CCK-8、EdU细胞增殖与毒性检测Kit和Annexin V、Caspase凋亡检测Kit
8. 蛋白研究——蛋白提取抑制剂cocktail、磷酸化蛋白研究新工具phosbind
9.组学服务——提供微生物多样性、转录组学等高通量测序服务
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