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猪传染性胸膜肺炎抗体检测试剂盒
AsurDxTM Actinobacillus pleuropneumoniae (APP) Antibody Test Kit
10079-02/05
一,概述
试剂盒用于检测猪血清中APP抗体。试剂盒原理是基于间接ELISA方法,酶标板上已经包被ApxIV重组抗原,添加样品后,样品内的抗体能与板上包被抗原特异性结合形成抗原抗体复合物,并与后面加入的酶标二抗结合,二抗上的酶再催化底物显色,显色深度与样品中的抗体含量成正相关。
二,试剂盒规格及组分
| 试剂盒组分 |
10079-02 |
10079-05 |
储存温度 |
| 抗原包被板APP antigen-Coated Plate |
2*96 |
5*96 |
4°C |
| 阳性对照(红盖) Positive Control |
2管 |
5管 |
4°C |
| 阴性对照(白盖) Negative Control |
0.2mL |
0.5mL |
4°C |
| 酶标二抗HRP-Conjugated Antibody Solution |
24mL |
58mL |
4°C |
| 10X稀释液10X Diluent Solution |
12mL |
28mL |
4°C |
| APP检测液 APP Assay Diluent |
24mL |
55mL |
4°C |
| 20X洗板液 20X Wash Solution |
56mL |
120mL |
4°C |
| TMB底物 TMB Substrate |
24mL |
58mL |
4°C |
| 终止液 Stop Solution |
24mL |
58mL |
4°C |
备注:如果试剂盒超过一个月不使用建议阴阳性对照和酶标二抗-20°C储存。
三,试剂以及样品制备
1X稀释液:用9体积的蒸馏水稀释1体积的10X稀释液,得到1X稀释液。
1X洗板液:用19体积的蒸馏水稀释1体积的20X洗板液,得到1X洗板液。
样品血清
预稀释:血清需在56°C预先孵育30分钟,再在血清稀释板上使用
1X稀释液将样品稀释10倍,例如将20uL的血清加入到180uL的1X稀释液中混匀,备用。
阳性对照:轻敲管盖,让所有粉末都落到管底,每管加入0.1ml 1X稀释液溶解,振荡后离心,至少溶解15分钟,溶解后的阳性对照在4°C可以保存1周,如需长期保存,请置于-20°C。
四,实验操作
| 试剂 |
每孔用量 |
| APP检测液 |
90uL |
| 样品/对照 |
10uL |
| 酶标二抗工作液 |
100uL |
| 1X洗板液 |
2mL |
| 底物 |
100uL |
| 终止液 |
100uL |
1. 实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出回复室温;
2. 设置好对照及样品在抗原包被板的位置,所有孔中加入90uL
APP检测液;
3. 加入10uL的阳性对照到抗原包被板两个孔中;
4. 加入10uL的阴性对照到抗原包被板的另外两个孔中;(强烈建议将阴性和阳性对照血清分隔加入,例如左上方加阳性对照,右下方加阴性对照)
5. 其他孔加入10uL预稀释的血清样品(已经预稀释了1:10).
6. 轻微振荡1分钟;
7. 封板,20-25°C孵育30分钟;(注意避免阳光直射和空气进入板中)
8. 弃去板中的液体;
9. 每孔加入250uL洗涤液洗板5次,最后一次请把板孔拍干;
10. 每孔加入100uL酶标二抗工作液,封板,20-25°C暗处孵育30分钟;
11. 弃去板中的液体;
12. 每孔加入250ul洗涤液洗板5次,最后一次请把板孔拍干;
13. 每孔加入100uL的TMB底物,室温下暗处孵育15分钟;
14. 每孔加入100uL终止液,然后酶标仪450nm读数;
五,结果判断
样品PP值=(样品OD值÷阳性对照OD值)*100%
有效性:阴性对照的PP值必须小于40%,阳性对照OD值的平均值必须≥0.5
阴性:样品的PP值小于60%,样品中抗体阴性
阳性:样品的PP值大于60%,样品中抗体阳性
四. 问题与解决
1.标准品无颜色变化或者无相应数值
| 可能原因 |
解决方法 |
| 试剂使用顺序混乱,或者操作步骤出错。 |
遵循实验说明重复实验。 |
| 使用了失效的酶标抗原, |
确保酶标抗原来自同一试剂盒,同一批次 |
| TMB底物失效。 |
使用新的TMB底物。 |
2.低吸光度(OD值)
| 可能原因 |
解决方法 |
| 试剂过期,或者不同的批次混用。 |
查证过期试剂和批次。 |
| 洗液配制错误。 |
使用试剂盒提供的洗液,正确配制。 |
| 过多次洗涤。 |
按照说明书要求进行洗涤。 |
| 孵育时间过短。 |
按照说明书要求,严格计算好时间。 |
| 实验室温度过低。 |
保持实验室温度在(22.5±2.5)°C不要在空调风口或者寒冷的窗户旁进行实验。 |
| 试剂或者微孔板温度过低。 |
确保试剂或者微孔板完全回温,在实验开始前,将试剂放置盒子外最少1小时。 |
| 使用错误波长读数,或者酶标仪失灵。 |
确保450nm波长读数,检查酶标仪。 |
| 试剂盒处于极端的条件。 |
检查试剂盒从冰箱拿出使用的次数,检查试剂盒是否放置极端温度(过冷或者过热)时间太长。 |
| 酶标板损坏 |
确保酶标板一直放置于有干燥剂密封的铝箔袋中置于冰箱保存,回温时也是放于铝箔袋回到室温。 |
3.过高的背景值或吸光度(OD值)
| 可能原因 |
解决方法 |
| 使用了质量差的水。 |
如果使用的水可疑,尝试使用蒸馏水配制洗液。 |
| 底物失效。 |
确保加入微孔板前,底物是无色的。 |
| 洗涤不当或者洗板机洗板效果不好。 |
采用说明书建议的洗涤次数,每次每孔至少加入250μL洗液。检查洗涤系统,排除故障。 |
| 酶标仪失灵。如果OD值读数很高而颜色很浅,那个这是非常可能的情况。 |
使用校正微孔板检查酶标仪,检查光源。 |
| 实验室温度过高。 |
保持实验室温度(22.5±2.5)°C,避免在热源或者阳光直射处实验。 |
| 试剂混淆,被污染或者配制不当。 |
确保使用正确的试剂,准确配制,避免污染。 |
Biostone Animal Health LLC
2860 Exchange Blvd. suite 160
Southlake, TX 76092USA
Tel: (817)329-0500
Fax: (817) 329-0501
R & D in USA, Assembled in the Local Country
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www.biostoneah.com
美国biostone抗体试剂盒产品目录
| |
产品名称 |
规格 |
货号 |
| 反刍动物 |
牛布鲁氏菌抗体试剂盒 |
2板 |
10008-02 |
| |
牛布鲁氏菌抗体试剂盒 |
5板 |
10008-05 |
| |
羊布鲁氏菌抗体试剂盒 |
2板 |
10009-02 |
| |
羊布鲁氏菌抗体试剂盒 |
5板 |
10009-05 |
| |
副结核抗体试剂盒 |
2板 |
10010-02 |
| |
副结核抗体试剂盒 |
5板 |
10010-05 |
| |
副结核抗体试剂盒(确认) |
2板 |
10057-02 |
| |
副结核抗体试剂盒(确认) |
5板 |
10057-05 |
| |
牛蓝舌病抗体试剂盒 |
2板 |
10014-02 |
| |
牛蓝舌病抗体试剂盒 |
5板 |
10014-05 |
| |
衣原体抗体试剂盒 |
2板 |
10021-02 |
| |
衣原体抗体试剂盒 |
5板 |
10021-05 |
| |
牛羊布鲁氏菌抗体试剂盒 |
2板 |
10022-02 |
| |
牛羊布鲁氏菌抗体试剂盒 |
5板 |
10022-05 |
| |
布鲁氏菌抗体试剂盒(猪牛羊) |
2板 |
10023-02 |
| |
布鲁氏菌抗体试剂盒(猪牛羊) |
5板 |
10023-05 |
| |
伊氏锥虫抗体试剂盒 |
2板 |
10025-02 |
| |
伊氏锥虫抗体试剂盒 |
5板 |
10025-05 |
| |
牛结核γ干扰素试剂盒 |
2板 |
10031-02 |
| |
牛结核γ干扰素试剂盒 |
5板 |
10031-05 |
| |
牛白血病抗体试剂盒 |
2板 |
10041-02 |
| |
牛白血病抗体试剂盒 |
5板 |
10041-05 |
| |
口蹄疫NS抗体试剂盒 |
2板 |
10040-02 |
| |
口蹄疫NS抗体试剂盒 |
5板 |
10040-05 |
| |
口蹄疫NS抗体试剂盒(celisa) |
2板 |
10040-02C |
| |
口蹄疫NS抗体试剂盒(celisa) |
5板 |
10040-05C |
| |
牛病毒性腹泻抗原试剂盒 |
2板 |
10047-02 |
| |
牛病毒性腹泻抗原试剂盒 |
5板 |
10047-05 |
| |
布病cElisa抗体试剂盒 |
2板 |
10043-02 |
| |
布病cElisa抗体试剂盒 |
5板 |
10043-05 |
| |
牛病毒性腹泻抗体试剂盒 |
2板 |
10061-02 |
| |
牛病毒性腹泻抗体试剂盒 |
5板 |
10061-05 |
| |
鹿流行性出血热抗体试剂盒 |
2板 |
10048-02 |
| |
鹿流行性出血热抗体试剂盒 |
5板 |
10048-05 |
| |
牛蓝舌病抗体试剂盒 celisa |
2板 |
10049-02 |
| |
牛蓝舌病抗体试剂盒 celisa |
5板 |
10049-05 |
| |
牛结节病抗体试剂盒 可以检测牛结节和羊痘 |
2板 |
10071-02 |
| |
牛结节病抗体试剂盒 可以检测牛结节和羊痘 |
5板 |
10071-05 |
| |
赤羽病抗体试剂盒 |
2板 |
10070-02 |
| |
赤羽病抗体试剂盒 |
5板 |
10070-05 |
| |
施马伦贝格抗体试剂盒 |
2板 |
10072-02 |
| |
施马伦贝格抗体试剂盒 |
5板 |
10072-05 |
| |
牛传染性鼻气管炎gB抗体试剂盒 |
2板 |
10074-02 |
| |
牛传染性鼻气管炎gB抗体试剂盒 |
5板 |
10074-05 |
| |
裂谷热抗体试剂盒 |
2板 |
10080-02 |
| |
裂谷热抗体试剂盒 |
5板 |
10080-05 |
| |
牛型结核菌素 皮试用 |
20T |
|
| |
禽型结核菌素 皮试用 |
20T |
|
| |
魏氏梭菌α毒素抗体试剂盒 |
2板 |
10084-02 |
| |
魏氏梭菌α毒素抗体试剂盒 |
5板 |
10084-05 |
| |
小反刍兽疫抗体试剂盒 |
2板 |
10087-02 |
| |
小反刍兽疫抗体试剂盒 |
5板 |
10087-05 |
| |
口蹄疫A型抗体试剂盒 cELISA |
2板 |
10065-02 |
| |
口蹄疫A型抗体试剂盒 cELISA |
5板 |
10065-05 |
| |
口蹄疫O型抗体试剂盒 cELISA |
2板 |
10089-02 |
| |
口蹄疫O型抗体试剂盒 cELISA |
5板 |
10089-05 |
| |
口蹄疫亚洲1型抗体试剂盒 cELISA |
2板 |
10090-02 |
| |
口蹄疫亚洲1型抗体试剂盒 cELISA |
5板 |
10090-05 |
| |
牛支原体抗体试剂盒 |
2板 |
10073-02 |
| |
牛支原体抗体试剂盒 |
5板 |
10073-05 |
| 禽 |
鸡败血支原体抗体试剂盒 |
2板 |
10011-02 |
| |
鸡败血支原体抗体试剂盒 |
5板 |
10011-05 |
| |
鸡滑液囊支原体抗体试剂盒 |
2板 |
10015-02 |
| |
鸡滑液囊支原体抗体试剂盒 |
5板 |
10015-05 |
| |
鸡毒/滑液囊支原体抗体试剂盒 |
2板 |
10016-02 |
| |
鸡毒/滑液囊支原体抗体试剂盒 |
5板 |
10016-05 |
| |
禽流感抗体试剂盒 |
2板 |
10017-02 |
| |
禽流感抗体试剂盒 |
5板 |
10017-05 |
| |
新城疫抗体试剂盒 |
2板 |
10018-02 |
| |
新城疫抗体试剂盒 |
5板 |
10018-05 |
| |
禽网状内皮增生抗体试剂盒 |
2板 |
10024-02 |
| |
禽网状内皮增生抗体试剂盒 |
5板 |
10024-05 |
| |
禽白血病抗原试剂盒 |
2板 |
10026-02 |
| |
禽白血病抗原试剂盒 |
5板 |
10026-05 |
| |
禽白血病A/B亚型抗体试剂盒 |
2板 |
10027-02 |
| |
禽白血病A/B亚型抗体试剂盒 |
5板 |
10027-05 |
| |
禽白血病J亚型抗体试剂盒 |
2板 |
10028-02 |
| |
禽白血病J亚型抗体试剂盒 |
5板 |
10028-05 |
| |
禽病毒性关节炎抗体试剂盒 |
2板 |
10029-02 |
| |
禽病毒性关节炎抗体试剂盒 |
5板 |
10029-05 |
| |
禽法氏囊抗体试剂盒 |
2板 |
10030-02 |
| |
禽法氏囊抗体试剂盒 |
5板 |
10030-05 |
| |
禽脑脊髓炎抗体试剂盒 |
2板 |
10032-02 |
| |
禽脑脊髓炎抗体试剂盒 |
5板 |
10032-05 |
| |
鸡传染性贫血抗体试剂盒 |
2板 |
10033-02 |
| |
鸡传染性贫血抗体试剂盒 |
5板 |
10033-05 |
| |
禽腺病毒1型(FAD-1)抗体试剂盒 |
2板 |
10034-02 |
| |
禽腺病毒1型(FAD-1)抗体试剂盒 |
5板 |
10034-05 |
| |
禽腺病毒2型(FAD-2)抗体试剂盒 |
2板 |
10075-02 |
| |
禽腺病毒2型(FAD-2)抗体试剂盒 |
5板 |
10075-05 |
| |
禽腺病毒4型(FAD-4)抗体试剂盒 |
2板 |
10076-02 |
| |
禽腺病毒4型(FAD-4)抗体试剂盒 |
5板 |
10076-05 |
| |
禽腺病毒8型(FAD-8)抗体试剂盒 |
2板 |
10077-02 |
| |
禽腺病毒8型(FAD-28)抗体试剂盒 |
5板 |
10077-05 |
| |
禽腺病毒11型(FAD-11)抗体试剂盒 |
2板 |
10078-02 |
| |
禽腺病毒11型(FAD-11)抗体试剂盒 |
5板 |
10078-05 |
| |
鸡传染性喉气管炎抗体试剂盒 |
2板 |
10037-02 |
| |
鸡传染性喉气管炎抗体试剂盒 |
5板 |
10037-05 |
| |
禽传染性支气管炎抗体试剂盒 |
2板 |
10045-02 |
| |
禽传染性支气管炎抗体试剂盒 |
5板 |
10045-05 |
| |
禽流感抗体试剂盒 celisa |
2板 |
10050-02 |
| |
禽流感抗体试剂盒 celisa |
5板 |
10050-05 |
| |
禽流感H7亚型抗体试剂盒 celisa |
2板 |
10051-02 |
| |
禽流感H7亚型抗体试剂盒 celisa |
5板 |
10051-05 |
| |
禽流感H5亚型抗体试剂盒 celisa |
2板 |
10052-02 |
| |
禽流感H5亚型抗体试剂盒 celisa |
5板 |
10052-05 |
| |
禽肺病毒抗体试剂盒 |
2板 |
10060-02 |
| |
禽肺病毒抗体试剂盒 |
5板 |
10060-05 |
| |
禽肠炎沙门氏菌抗体试剂盒 (D群) |
2板 |
10062-02 |
| |
禽肠炎沙门氏菌抗体试剂盒(D群) |
5板 |
10062-05 |
| |
鼠伤寒沙门氏菌抗体试剂盒 (B群) |
2板 |
10063-02 |
| |
鼠伤寒沙门氏菌抗体试剂盒 (B群) |
5板 |
10063-05 |
| |
禽减蛋综合征抗体试剂盒 |
2板 |
10066-02 |
| |
禽减蛋综合征抗体试剂盒 |
5板 |
10066-05 |
| |
禽腺病毒1型(FAD-2)抗体试剂盒 |
2板 |
10075-02 |
| |
禽腺病毒1型(FAD-2)抗体试剂盒 |
5板 |
10075-05 |
| |
禽腺病毒1型(FAD-4)抗体试剂盒 |
2板 |
10076-02 |
| |
禽腺病毒1型(FAD-4)抗体试剂盒 |
5板 |
10076-05 |
| |
禽腺病毒1型(FAD-8)抗体试剂盒 |
2板 |
10077-02 |
| |
禽腺病毒1型(FAD-8)抗体试剂盒 |
5板 |
10077-05 |
| |
禽腺病毒1型(FAD-11)抗体试剂盒 |
2板 |
10078-02 |
| |
禽腺病毒1型(FAD-11)抗体试剂盒 |
5板 |
10078-05 |
| |
禽马立克抗体试剂盒 |
2板 |
10091-02 |
| |
禽马立克抗体试剂盒 |
5板 |
10091-05 |
| 猪 |
猪蓝耳抗体试剂盒 |
2板 |
10020-02 |
| |
猪蓝耳抗体试剂盒 |
5板 |
10020-05 |
| |
布鲁氏菌抗体试剂盒(猪牛羊) |
2板 |
10023-02 |
| |
布鲁氏菌抗体试剂盒(猪牛羊) |
5板 |
10023-05 |
| |
伊氏锥虫抗体试剂盒 |
2板 |
10025-02 |
| |
伊氏锥虫抗体试剂盒 |
5板 |
10025-05 |
| |
猪瘟抗体试剂盒 |
2板 |
10038-02 |
| |
猪瘟抗体试剂盒 |
5板 |
10038-05 |
| |
猪瘟抗体试剂盒 |
2板 |
10038-02C |
| |
猪瘟抗体试剂盒 |
5板 |
10038-05C |
| |
猪瘟抗体试剂盒 阻断 |
2板 |
10064-02 |
| |
猪瘟抗体试剂盒 阻断 |
5板 |
10064-05 |
| |
猪瘟ERNS抗体试剂盒 |
2板 |
10068-02 |
| |
猪瘟ERNS抗体试剂盒 |
5板 |
10068-05 |
| |
猪瘟抗原试剂盒 |
2板 |
10069-02 |
| |
猪瘟抗原试剂盒 |
5板 |
10069-05 |
| |
塞尼卡谷试剂盒 |
2板 |
10039-02 |
| |
塞尼卡谷试剂盒 |
5板 |
10039-05 |
| |
塞尼卡谷试剂盒 |
2板 |
10039-02C |
| |
塞尼卡谷试剂盒 |
5板 |
10039-05C |
| |
口蹄疫NS抗体试剂盒 |
2板 |
10040-02 |
| |
口蹄疫NS抗体试剂盒 |
5板 |
10040-05 |
| |
口蹄疫NS抗体试剂盒(阻断法) |
2板 |
10040-02C |
| |
口蹄疫NS抗体试剂盒(阻断法) |
5板 |
10040-05C |
| |
布病cElisa抗体试剂盒 |
2板 |
10043-02 |
| |
布病cElisa抗体试剂盒 |
5板 |
10043-05 |
| |
非洲猪瘟抗体试剂盒 P54 |
2板 |
10058-02 |
| |
非洲猪瘟抗体试剂盒 P54 |
5板 |
10058-05 |
| |
非洲猪瘟抗体试剂盒 P54 |
2板 |
10057-02 |
| |
非洲猪瘟抗体试剂盒(阻断法) P54 |
5板 |
10057-05 |
| |
非洲猪瘟抗体试剂盒 I177L |
2板 |
10058-02AB |
| |
非洲猪瘟抗体试剂盒 I177L |
5板 |
10058-05AB |
| |
非洲猪瘟抗原试剂盒 P30 |
2板 |
10046-02 |
| |
非洲猪瘟抗原试剂盒 P30 |
5板 |
10046-05 |
| |
猪流行性腹泻IgG抗体体试剂盒 |
2板 |
10055-02 |
| |
猪流行性腹泻IgG抗体体试剂盒 |
5板 |
10055-05 |
| |
猪流行性腹泻IgA抗体体试剂盒 |
2板 |
10056-02 |
| |
猪流行性腹泻IgA抗体体试剂盒 |
5板 |
10056-05 |
| |
猪伪狂犬gB抗体试剂盒 |
2板 |
|
| |
猪伪狂犬gB抗体试剂盒 |
5板 |
|
| |
猪伪狂犬gE抗体试剂盒 |
2板 |
|
| |
猪伪狂犬gE抗体试剂盒 |
5板 |
|
| |
猪弓形虫抗体试剂盒 |
2板 |
10067-02 |
| |
猪弓形虫抗体试剂盒 |
5板 |
10067-05 |
| |
口蹄疫A型抗体试剂盒 cELISA |
2板 |
10065-02 |
| |
口蹄疫A型抗体试剂盒 cELISA |
5板 |
10065-05 |
| |
口蹄疫O型抗体试剂盒 cELISA |
2板 |
10089-02 |
| |
口蹄疫O型抗体试剂盒 cELISA |
5板 |
10089-05 |
| |
口蹄疫亚洲1型抗体试剂盒 cELISA |
2板 |
10090-02 |
| |
口蹄疫亚洲1型抗体试剂盒 cELISA |
5板 |
10090-05 |
| |
猪传染性胸膜肺炎抗体试剂盒 |
2板 |
10079-02 |
| |
猪传染性胸膜肺炎抗体试剂盒 |
5板 |
10079-05 |
| |
猪肺炎支原体抗体试剂盒 |
2板 |
10082-02 |
| |
猪肺炎支原体抗体试剂盒 |
5板 |
10082-05 |
| |
猪回肠炎抗体试剂盒 |
2板 |
10083-02 |
| |
猪回肠炎抗体试剂盒 |
5板 |
10083-05 |
| |
魏氏梭菌α毒素抗体试剂盒 |
2板 |
10084-02 |
| |
魏氏梭菌α毒素抗体试剂盒 |
5板 |
10084-05 |
| |
猪圆环病毒3型抗体试剂盒 |
2板 |
10086-02 |
| |
猪圆环病毒3型抗体试剂盒 |
5板 |
10086-05 |
| |
猪德尔塔冠状病毒抗体试剂盒 |
2板 |
10092-02 |
| |
猪德尔塔冠状病毒抗体试剂盒 |
5板 |
10092-05 |
| 马 |
马媾疫锥虫抗体试剂盒 |
2板 |
10012-05 |
| |
马媾疫锥虫抗体试剂盒 |
5板 |
10012-05 |
| |
马鼻疽抗体试剂盒 |
2板 |
10013-02 |
| |
马鼻疽抗体试剂盒 |
5板 |
10013-05 |
| |
伊氏锥虫抗体试剂盒 |
2板 |
10025-02 |
| |
伊氏锥虫抗体试剂盒 |
5板 |
10025-05 |
| |
马巴贝斯虫抗体检测试剂盒 |
2板 |
10035-02 |
| |
马巴贝斯虫抗体检测试剂盒 |
5板 |
10035-05 |
| |
马努巴贝斯虫抗体检测试剂盒 |
2板 |
10036-02 |
| |
马努巴贝斯虫抗体检测试剂盒 |
5板 |
10036-05 |
| |
马传贫抗体试检测试剂盒 |
2板 |
10059-02 |
| |
马传贫抗体试检测试剂盒 |
5板 |
10059-05 |
| |
非洲马瘟抗体试检测试剂盒 |
2板 |
10081-02 |
| |
非洲马瘟抗体试检测试剂盒 |
5板 |
10081-05 |
| |
马乙型脑炎抗体检测试剂盒 |
2板 |
|
| |
马乙型脑炎抗体检测试剂盒 |
5板 |
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