SP 琼脂糖凝胶 HP
产品名称:SP-Crystarose High performance
SP 琼脂糖凝胶 HP
一、简介
SP- Crystarose Fast Flow是强阳离子交换层析填料,它采用平均粒径为90um的多孔型琼脂糖通过化学键合弱阳离子功能配基形成,配基如下:
-O-CH2CHOHCH2OCH2CH2CH2SO3-
其具有更高的比表面积和更好的生物兼容性,它再高流速下保持更高载量,同时又具有很高的分辨率。由于比表面积大,平衡和洗脱的时间也更短。
本产品特点:流速快、刚性强、载量高、物化稳定性好、寿命长、重复性好;容易放大。
二、产品技术指标:

测试坏境:柱内径5cm,高度15cm,压力1bar
三、应用的注意事项:
1)色谱柱填装
1、柱子装填前应在柱子下端加入小量的缓冲溶液,排出柱子内部的气泡,关闭柱子出口,在柱内保留少量的缓冲溶液。可以在里面加少许吐温避免气泡产生,也可以换成纯水装柱子。在装柱之前可用抽滤漏斗将胶用缓冲液或者纯净水抽洗3-5倍胶体积。
2、将填料倒入层析柱中,必要时可用玻璃棒紧靠柱子内壁引流,以减少气泡的产生,可让填料自然沉降,也可以装柱的过程中可以施加一定的压力加快装柱的速度,可以提高一定的柱效。注意在层析过程中的层析的更大流速要小于装柱时的流速。
3、在柱子装填前,填料从冰箱中取出后应在室温环境中放置 1-3 个小时,使之填料温度与环境温度保持一致,这样可以避免柱子装填时由于温度剧烈变化产生大量气泡,从而影响柱效。
2) 蛋白的结合
样品的盐浓度和 pH 要尽量和平衡柱子的缓冲液一致,盐浓度过高或者 pH 过高都有可能影响结合挂柱效果,所以要根据自己的样品做适当调整。
3) 蛋白的洗脱
1、离子交换一般是低盐吸附高盐洗脱。如果采用线性梯度洗脱,上样量应控制在柱填料总载量的10%或更低,上样量低,可以有效提高分离效果,样品浓度不宜过高。如果采用阶段洗脱的方法,上样量可以控制在柱总载量30%左右。阶段洗脱相对更容易放大,重复性好。离子交换层析柱子装填高度一般不超过30cm,要增加柱子规模只增加柱子直径便可。线性梯度洗脱和阶段洗脱方法各有优缺点,一般线性梯度洗脱方法适合摸索洗脱条件,而阶段洗脱适合大规模纯化。
四、再生、清洗
五、层析柱用完后用 0.2-0.5M NaOH (可添加1M NaCl)、DH2O和0.1-0.2M HCL循环清洗 3-5 个床体积,再用1M NaCL平衡至PH中性用纯水和20%各冲洗3个柱床体积后保存。步骤:先用NaOH清洗3-5个柱体积,再用水洗3--5 个柱床体积,然后再用HCL清洗3---5个柱体积。如果遇到顽固的物质用上述方法无法洗脱的话,可以在清洗液中加入适当的去污剂,液可以直接用6M盐酸胍或者8M尿素清洗柱子。然后 20%的乙醇流洗 5 个柱床体积并保存。
六、保存
在 20%乙醇中,4℃下长
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武汉市东湖高新技术开发区光谷三路777号自贸生物创新港B区
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