β-淀粉酶检测试剂（Betamyl-3），R-BAMR3

简介：
β-淀粉酶在谷物发芽或麦芽过程中淀粉完全降解为可代谢或可发酵糖的过程中起着核心作用。它与淀粉脱支酶一起在生产高麦芽糖浆中也有相当大的应用。β-淀粉酶通常使用淀粉作为底物的非特异性还原糖测定法进行测量。在某些方法中，α-淀粉酶首先通过在低pH值下处理而失活。
Megazyme Betamyl-3®β-淀粉酶检测试剂采用高纯度β-葡萄糖苷酶和对硝基苯-β-D-麦芽三糖苷（PNPβ-G3）。使用的β-葡萄糖苷酶水平可确保测定的最大灵敏度。当PNPβ-G3被β-淀粉酶水解为麦芽糖和对硝基苯-β-D葡萄糖时，对硝基苯-α-D-葡萄糖立即被底物混合物中存在的β-葡萄糖苷酶裂解为D-葡萄糖和游离的对硝基苯酚（方案1）。因此，对硝基苯酚的释放速率与β-淀粉酶释放麦芽糖的速率直接相关。在加入高pH Tris缓冲溶液后，反应停止，酚盐颜色显现。
PNPβ-G3加β-葡萄糖苷酶混合物含有稳定剂，可显著提高其稳定性。当在4或20°C下储存时，Betamyl-3®底物溶液的空白吸光度值比Betamyl®试剂的类似增加慢得多。
套件：
用于进行100/200检测的试剂盒。试剂盒包含：
瓶1:（x2）每瓶含有对硝基苯-β-D-麦芽三糖苷（PNPβ-G3）、β-葡萄糖苷酶（50U）和稳定剂。在-10°C以下稳定4年以上。
瓶2：Tris/HCl缓冲液（25 mL，1 M，pH 8.0）加EDTA二钠（20 mM）和叠氮化钠（0.02%w/v）。在4°C下稳定约4年。
瓶3: MES缓冲液（48 mL，1 M，pH 6.2）加EDTA二钠（20 mM）、BSA 10 mg/mL和叠氮化钠（0.09%w/v）。在4°C下稳定约4年。
瓶4：盐酸半胱氨酸（16克）。在室温下稳定4年以上。
瓶5：具有标准化β-淀粉酶活性的麦芽粉（如瓶子标签上所示）。在室温下稳定4年以上。
试剂溶液/悬浮液的制备：
1.将瓶子1的内容物溶解在10毫升煮沸并冷却的蒸馏水中。这是Betamyl-3®底物溶液。在使用之间，将其分成适当大小的等分试样，并储存在-10°C以下的聚丙烯管中。将未使用的试剂放在冰上等待使用。在需要之前，不要溶解第二瓶的内容物。在-10°C以下稳定2年以上。
2.用蒸馏水将2.5 mL瓶2的内容物稀释至50 mL。使用前，加入0.88 g半胱氨酸HCl（瓶4；Megazyme目录号g-LCYST200）（半胱氨酸HCl的终浓度约为100 mM），并用4 M NaOH将pH值调节至8.0。在4°C下稳定8小时。
3.用蒸馏水将瓶子3的全部内容物稀释至500毫升。在4°C下稳定约1年。
4.按供应使用。在室温下稳定4年以上。
5.使用提供的瓶子5中的内容物。在室温下稳定4年以上。
概要：
高纯度Betamyl-3；β-淀粉酶测定试剂——4瓶，用于研究、生化酶测定和体外诊断分析的β-淀粉酶测量。
对硝基苯基β-D-麦芽三糖苷，加上过量的耐热β-葡萄糖苷酶（稳定试剂）。
规格：每个试剂盒200次检测（4瓶）
运输温度：环境温度
储存温度：短期稳定性：2-8°C，
长期稳定性：见单个组件标签
稳定性：在推荐的储存条件下>2年
分析物：β-淀粉酶
检测形式：分光光度计
检测方法：吸光度
波长（nm）：400
检测限：0.05 U/mL
再现性（%）：~3%
反应时间（分钟）：~10分钟