结晶紫中性红胆盐琼脂培养基(VRBA)
结晶紫中性红胆盐MUG琼脂培养基(VRBA-MUG)
(Violet Red Bile Agar-MUG)
用 途：
结晶紫中性红胆盐MUG琼脂培养基(VRBA-MUG)用于食品中大肠杆菌的平板计数。(GB/T 4789.38-2008)
原 理：
蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;乳糖是可发酵的糖类;氯化钠可维持均衡的渗透压;3号胆盐和结晶紫抑制革兰氏阳性菌，特别抑制革兰氏阳性杆菌和粪链球菌;中性红为pH指示剂;琼脂为凝固剂;大肠埃希氏杆菌含有的葡萄糖醛酸苷酶作用于4-甲基伞形酮-β-D葡萄糖醛酸苷(4-Methylumbellifery-β-D-Glucuronide简称MUG)的β糖醛酸苷键，使其水解，释放的4-甲基伞形酮在366nm紫外灯下产生蓝白色荧光。97%的大肠埃希氏杆菌、10%的沙门氏菌以及少量的志贺氏菌具有葡萄糖醛酸苷酶。
配方(每升)：
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蛋白胨 |
7.0g |
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酵母膏粉 |
3.0g |
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乳糖 |
10.0g |
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氯化钠 |
5.0g |
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3号胆盐 |
1.5g |
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中性红 |
0.03g |
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结晶紫 |
0.002g |
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琼脂 |
15.0g |
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MUG |
0.1g |
最终pH 7.4±0.2
使用方法：
1、 称取结晶紫中性红胆盐MUG琼脂培养基(VRBA-MUG)41.6g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，无需高压灭菌，备用。
{C}2、 {C}以无菌手续取样品25g或25mL，加入含225mL无菌磷酸盐缓冲液(或生理盐水)的三角瓶内，充分振摇或用均质器均质1min成1：10稀释液，然后以1：10继续稀释，选择2～3个适宜的连续稀释度，每个稀释度接种两个平皿，倾注加热溶解并冷至45℃左右的培养基，琼脂凝固后再加3-4mL培养基覆盖平板表层。
3、36±1℃培养18—24h。
4、观察菌落形态，并于暗室中用360nm～360nm波长紫外灯照射，计数平板上发浅蓝色荧光的菌落。
质量控制：
质控菌株接种后于36±1℃培养18—24h结果如下：
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菌 名 |
菌 号 |
生长状况 |
培养特征 |
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大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
良好 |
有荧光，深红色菌落，周围有红色沉淀 |
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产气肠杆菌 |
CMCC(B)45103 |
良好 |
无荧光，红色菌落，周围可有淡红色沉淀 |
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粪链球菌 |
CMCC32223 |
受抑制 |
----- |
贮 存：结晶紫中性红胆盐MUG琼脂培养基(VRBA-MUG)贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期二年。
规 格：100g
参考文献:
1. GB/T 4789.38-2008 中华人民共和国国家标准 食品安全国家标准 食品卫生微生物检验 大肠杆菌计数
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