尿素琼脂培养基基础
尿素琼脂培养基基础
(Urea Agar Base)
用 途：
用于鉴别肠道菌尿素酶试验 (GB4789.4-2010，《中华人民共和国药典》2010年版，SN0170-92和GB13091-91，ISO标准)。
原 理：
蛋白胨提供碳源和氮源;氯化钠维持均衡的渗透压;磷酸二氢钾是缓冲剂;具有尿素酶的细菌分解培养基中的尿素，产生大量的氨，使培养呈碱性，酚红指示剂在pH6.8时呈黄色，pH8.1呈粉红色;琼脂是培养基的凝固剂。
配方(每升)：
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蛋白胨 |
1g |
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氯化钠 |
5g |
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葡萄糖 |
1g |
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磷酸二氢钾 |
2g |
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酚红 |
0.012g |
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琼脂 |
15g |
最终pH7.2±0.2
使用方法：
1、 称取尿素琼脂培养基基础24g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15min，待冷却至50—55℃，每200mL培养基加入经过滤除菌的20%的尿素溶液20mL或5支(029100)40%的尿素溶液共10mL，尿素的最终浓度为2%。分装无菌试管，制成斜面。
{C}2、 {C}挑取待检菌的新鲜纯培养物，浓密地涂布在尿素琼脂斜面上，置36±1℃培养24h。
{C}3、 {C}于2—4h及24h各观察一次结果。培养基呈现红色时为阳性反应，颜色不变者为阴性反应。如为阴性可继续培养观察至4d。
质量控制：
质控菌株接种后于36±1℃培养24h结果如下 ：
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菌 名 菌 号 生长状况 培养特征 |
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普通变形杆菌 HK7131 良好 培养基变红色
大肠埃希氏菌 ATCC25922 良好 培养基不变色 |
贮 存：尿素琼脂培养基基础贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
规 格：250g
参考文献：
1.GB/T4789.4-2003 中华人民共和国国家标准食品卫生微生物检验 沙门氏菌检验
2.GB/T4789.28-2003中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物检验 染色法，培养基和试剂
3.SN0170-92 中华人民共和国进出口商品检验行业标准 出口食品中沙门氏菌属(包括亚利桑那菌)检验方法
4.GB/T4789.4-2008 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物检验 沙门氏菌检验
5.GB 4789.4-2010 中华人民共和国国家标准 食品安全国家标准 食品卫生微生物检验 沙门氏菌检验
6.GB 13091-91 中华人民共和国国家标准 饲料中沙门氏菌的检验方法
7. 《中华人民共和国药典》2010年版，附录XI J 微生物限度检查。
8.ISO 6579：2002 Microbiology of food and animal feeding stuffs-----Horizontal method for the detection of Salmonella spp.
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