Western Blot PVDF膜（0.45um,0.22um)
一，PVDF膜的作用原理以及优势：
联系人：陈天添，微信号/手机号：13439225985，QQ:609810384
聚偏二氟乙烯（PVDF）膜作为基质的转印膜由Millipore公司在1985年首先推出。 PVDF膜适用的检测方法也不少，化学发光、常规显 色、同位素和标准染色都一样OK，但不适合荧光。PVDF膜与硝酸纤维素膜相比，PVDF膜在蛋白质截留能力，机械强度和化学相容性上都更优越的性能。市售硝酸纤维素膜的典型结合量是80-100μg/cm2,而PVDF膜结合量是100-200μg/cm2（而结合强度PVDF比硝纤膜强6倍！）。更好的机械强度和化学耐受性使PVDF膜在各种染色应用和多重免疫检测中成为理想选择；PVDF也是要做蛋白测序的唯一选择，在使用PVDF膜前，一定要先用无水甲醇预处理，再在transfer buffer中平衡好才可以使用（PVDF膜用甲醇泡的目的是为了活化PVDF膜上面的正电基团，使它更容易跟带负电的蛋白质结合）。经过预处理的PVDF膜在转膜时，可以使用不含甲醇的transfer buffer。而使用NC膜时，有的需要用无水甲醇处理，有的则不必，直接用transfer buffer平衡好就可以了。PVDF膜同样分0.45um和0.2um的，后者孔径小，对小分子蛋白有较好的拦截吸附，背景可能会比前者稍高。PVDF膜即聚偏二氟乙烯膜（polyvinylidene fluoride）是蛋白质印迹法中常用的一种固相支持物。PVDF膜是疏水性的，膜孔径有大有小，随着膜孔径的不断减小，膜对低分子量的蛋白结合就越牢固。大于20000的蛋白选用0.45um的膜，小于20000的蛋白选用0.2um的膜。PVDF膜在使用时需预处理，用甲醇处理的目的是活化膜上的正电基团，使其更容易与带负电的蛋白结合。PVDF膜具有较高的机械强度，是印迹法中的理想固相支持物材料。
二，关于Millipore公司的PVDF膜特点：
Millipore公司的PVDF膜Immobilon系列分为Immobilon-P（0.45um）, -PSQ(0.2um), -FL(用于荧光显色) 。Immobilon-P膜孔径均一，具有极强的吸附能力，染色性能好、抗溶剂能力强和信噪比高，有助于提高检测灵敏度，而且开放 的孔结构容易接近被吸附的蛋白质，并有助于去除背景上没有吸附的探针，可以说是免疫印迹检测理想的印迹膜。Immobilon-PSQ转印膜是印迹小分子 蛋白质（<20KDa）的理想选择——优良的蛋白质吸附性能，渗漏少。内表面面积较大，可供蛋白质吸附从而提高蛋白质测序的得率。mmobilon-FL也是Millipore第一个 专门为荧光显色优化的转移膜。通过实验证明，这种膜在Kodak成像系统可以显示仅7ng的蛋白。
|
|
Immobilon-P |
Immobilon-PSQ |
Immobilon-FL |
|
孔径大小 |
0.45um |
0.22um |
0.45um |
|
优点 |
适用于免疫印迹、斑点印迹和其它蛋白质印迹的最佳 PVDF 膜 |
小孔状结构生成 MW <20 kDa 的出众吸附蛋白质 |
针对荧光免疫检测应用进行了优化与所有常用的荧光探针（所有激发和发射波长）兼容 |
|
应用 |
Western blotting、吸附分析、氨基酸分析、N 端蛋白质测序、Dot/Slot blotting、糖蛋白显色和脂多糖分析 |
低分子量 Western blotting、氨基酸分析和 |
Western blotting，Dot/Slot blotting |
|
蛋白质结合量µg/cm2 胰岛素 BSA 山羊 IgG |
160 215 294 |
262 340 448 |
155 205 300 |
|
可湿润性： |
疏水 |
||
|
主要吸附基质： |
静电与疏水 |
||
|
滤膜表面： |
光面 |
||
三，Millipore公司的PVDF膜相关产品货号规格：
ISEQ00011 PVDF膜(0.22um) Millipore 13.25厘米*15厘米 张
ISEQ00010 PVDF膜(0.22um) Millipore 26.5cm*3.75米 卷
IPVH00011 PVDF膜(0.45um) Millipore 13.25厘米*15厘米 张
IPVH00010 PVDF膜(0.45um) Millipore 26.5cm*3.75米 卷
BSP0161 PVDF膜（0.2um） PALL 26cm×3.3m 卷
四，关于PVDF膜，NC膜，尼龙膜的区别：
|
|
NC膜 |
尼龙膜 |
PVDF膜 |
|
灵敏度和分辨率 |
高 |
高 |
高 |
|
背景 |
低 |
较高 |
低 |
|
结合能力 |
80－110 ug/cm2 |
>400 ug/cm2 |
125－200 ug/cm2（适合于SDS存在下与蛋白质的结合） |
|
材料质地 |
干的NC膜易脆 |
软而结实 |
机械强度高 |
|
溶剂耐受性 |
无 |
无 |
有 |
|
操作程序 |
缓冲液润湿,避免气泡 |
缓冲液润湿 |
使用前100%甲醇润湿 |
|
染色方法 |
胶体金、丽春红、氨基黑、印度墨汁 |
不能用阴离子染料 |
胶体金、丽春红、氨基黑、印度墨汁、考马斯亮蓝 |
|
检测方式 |
化学显色、化学发光、荧光检测、放射性检测 |
化学显色、化学发光、放射性检测 |
化学显色、化学发光、荧光检测、放射性检测 |
|
适用范围 |
0.45um 一般蛋白_x000B_0.2um一分子量小于20kD蛋白_x000B_0.1um一分子量小于7kD蛋白 |
低浓度小分子蛋白、酸性蛋白、糖蛋白和蛋白多糖(主要用在核酸检测中) |
糖蛋白检测和蛋白质测序 |
|
价格 |
价格较便宜 |
便宜 |
较贵 |
联系人：陈天添，微信号/手机号：13439225985，QQ:609810384
| 单位名称： |
|
详细地址：
北京市通州区马驹桥联东U谷景盛南四街85A三层
|
|
qq：
609810384
|
|
联系电话：
010-56371210
|
| Email： |
