冰冻切片组织琥珀酸脱氢酶活性染色试剂盒
冰冻切片组织琥珀酸脱氢酶活性染色试剂盒产品说明书(中文版)
主要用途
冰冻切片组织琥珀酸脱氢酶(SDH)活性染色试剂是一种旨在使用合成电子受体四氮唑兰染料,通过反应系统的作用,组织样本中酶活性部位呈现出蓝黑色沉淀现象的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于各种动物组织冰冻切片样品琥珀酸脱氢酶的活性检测。用于衰老、能量代谢、蛋白组学、病理生理学、神经病变等研究。产品不含污染性蛋白酶,严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,反应优化,显色清晰。
技术背景
琥珀酸脱氢酶(succinnate dehydrogenase;SDH;EC 1.3.99.1)是三羧酸循环(tricarboxylic acid cycle;TCA)或Krebs循环中与细胞线粒体膜相关的重要元素,位于线粒体内膜,参与细胞呼吸链。琥珀酸脱氢酶由27kd和70kd两个单体组成。其功能在于催化琥珀酸(succinate)的氧化反应,产生延胡索酸(furmarate),通过黄素腺嘌呤二核苷酸(Flavin Adenine Dinucleotide;FAD)传递电子。基于琥珀酸脱氢酶的反应原理,使用人工电子受体染料硝基蓝四氮唑(Nitro Blue Tetrazolium;NBT),接受来自还原型黄素腺嘌呤二核苷酸(Reduced flavin Adenine Dinucleotide;FADH2)的电子,而被还原,产生不溶性蓝色或蓝黑色甲暨色素。据此证明组织细胞琥珀酸脱氢酶的活性。
产品内容
清理液(Reagent A) 100毫升
染色液(Reagent B) 10毫升
反应液(Reagent C) 1毫升
固着液(Reagent D) 10毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存染色液(Reagent B)和反应液(Reagent C)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里,有效保证6月
用户自备
1.5毫升离心管:用于工作液配制的容器
培养箱:用于反应孵育
中性树脂:用于切片封片
光学显微镜:用于切片染色后观察分析
实验步骤
染色开始前,将-20℃冰箱里的试剂置于室温下融化;移取900微升染色液(Reagent B)到新的1.5毫升离心管,加入100微升反应液(Reagent C),混匀后,标记为染色工作液,置于冰槽里,避免光照。然后进行下列操作。
注意事项
质量标准
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