Bio-Turbo（TM）萤火虫荧光素酶分析试剂盒

报告基因检测是基因表达调节研究的重要手段，目前已被广泛应用于分子生物学及细胞生物学研究领域。报告基因检测法是一种将转录调控和报告基因（如荧光素酶）偶联表达，通过报告基因表达产物（如荧光素酶）活性的测定判断细胞刺激物（如小分子化合物、重组蛋白）生物学活性的方法。《中国药典》2015年版已将报告基因检测方法列为干扰素活性测定法第二法（通则3523）。目前在生物制品PD1/PD-L1、IL6/IL6R等相关单抗药物的生物学活性检测和Fc效应功能研究中，报告基因检测法已经起到了至关重要的作用。以往只能采用体内动物学活性研究的细胞因子如EPO、GH、FSH、TSH等，也在逐步采取体外报告基因检测法替代原有的动物体内法作为产品批放行的关键指标。

萤火虫荧光素酶（Firefly Luciferase）是一种分子量为61kDa的蛋白，因其在宿主细胞中无背景萤光，同时无需翻译后修饰，是报告基因的理想选择。Bio-Turbo^TM萤火虫荧光素酶分析试剂盒为针对萤火虫荧光素酶开发的一款快速、稳定的能够满足高通量测定的检测试剂盒，是Bright-Turbo^TM的升级产品，具有超高的检测灵敏度，主要开发用于ADCC或ADCP活性检测体系以及对灵敏度有特殊要求的其他检测项目。本试剂盒以D-荧光素（D-luciferin）为底物，在ATP、镁离子和氧气存在的条件下，可以被萤火虫荧光素酶催化进行氧化脱羧反应，产生激活态的氧化荧光素（Oxyluciferin），并产生生物萤光（Bioluminescence）（图1）。生物萤光与与荧光素酶的启动子活性成比例，间接反映了细胞刺激物的生物学活性。

图1. 萤火虫荧光素酶底物的发光原理

本试剂盒具有超高的检测灵敏度及超强的光输出，ADCC活性检测效果及与某知名大公司产品的检测效果对比如图2所示，可以检测最低10^-20mol的荧光素酶，在10^-20至10^-14mol的酶浓度范围内呈很好的线性关系。信号半衰期通常都超过15min。

图2. Bio-Turbo^TM和某公司竞争产品对相同样品的检测效果。

注意：实际读数会因细胞数量、转染效果、检测仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。

产品信息：

特点-优点：

Bio-Turbo^TM萤火虫荧光素酶分析试剂盒具有操作简便、灵敏度超高等特点。

ü 快速：细胞裂解在10-15min内完成；

ü 方便：将冻干粉底物与缓冲液简单混合即可使用，样品检测步骤简单；

ü 灵活：试剂与常用培养基兼容，客户根据实验需要可自行决定是否去除培养基；

ü 高通量：配套微孔板化学发光检测仪可实现高通量、自动化检测；

ü 高灵敏度：能够检测最低10^-20mol的荧光素酶；

ü 超高发光强度：更强的光输出，产生比其它荧光素酶检测试剂高至10 倍的光强度。

应用：

Bio-Turbo^TM萤火虫荧光素酶分析试剂盒超高的发光强度主要适用于ADCC、ADCP活性的常规检测及批签发检测指标。是抗体筛选、抗体糖基化修饰等研究的有效手段。同时，在对检测灵敏度有更高要求时，该试剂盒也可用于小分子化合物、重组蛋白药物活性的常规检测，如用于IFN、EPO、FSH、TSH、GH、GLP-1、PTH等药用蛋白的生物学活性检测。

注意事项:

我们也提供一系列ADCC、ADCP效应细胞株，详情请咨询techserv@rhinobio.com。