血清/培养基

Gibco(10639011)StemPro™-34 SFM(1X)

基本信息
产品名称:
Gibco(10639011)StemPro™-34 SFM(1X)
英文名称:
Gibco(10639011)StemPro™-34 SFM(1X)
国产/进口:
进口
产地/品牌:
美国/Gibco
型号:
500mL
参考报价:
¥6823
总点击数:
5249
更新日期:
2025-10-31
产品类别:

性能参数
名称 品牌 货号 规格 保存 有效期
StemPro®-34 SFM套件
包含:
StemPro®-34 SFM(1X),液体
StemPro®-34营养补充剂(40X)
Gibco 10639011
 
10640-019
10641-025
1套
 
500mL
13mL
 
 
2-8°C避光
-20°C至-5°C避光
 
 
18个月
30个月
 
一、产品概述
StemPro-34 SFM是一种无血清培养基,专门用于支持人类造血祖细胞(如CD34)的体外培养。该培养基可用于研究来自骨髓、外周血或新生儿脐带血的造血细胞。StemPro-34 SFM由基础液体培养基和冻存的40倍浓度营养补充剂(StemPro-34 Nutrient Supplement)组成,使用时再添加冷冻的40倍浓缩营养液。本培养基生产过程中未添加任何细胞因子和造血生长因子,使研究人员能够自由选择研究所需的单一或组合因子。StemPro-34 SFM含有来源于人类、重组或合成的成分,并已在正常人骨髓中完成性能验证。

 二、产品特点 
1.无血清与化学成分明确:不含血清、牛血清白蛋白(BSA)及不明添加剂,所有成分均经过严格筛选与定量,确保实验结果的可重复性与一致性,降低外源污染物风险。
2.高效支持干细胞扩增:通过优化的营养配比(如氨基酸、维生素、重组蛋白等),促进干细胞在贴壁培养条件下快速增殖,维持细胞形态均一性,传代次数可达10代以上仍保持未分化表型。
3.维持干细胞多能性:配方中添加特异性生长因子(如FGF-2、EGF等)及小分子抑制剂,有效抑制干细胞自发分化,维持其干性标志物(如Oct4、Sox2、Nanog)的高表达。
4.无动物源成分:避免传统血清培养基中的异源蛋白、病毒或朊病毒污染,符合临床前研究及细胞治疗应用的严格标准。


三、产品性能展示
细胞因子驱动的扩散。
 
与经典培养基(IMDM+20%FBS)相比,在StemPro®-34SFM中培养的细胞因子驱动的骨髓来源的CD34+细胞扩增了3倍,CD34+细胞的数量增加了13倍,总细胞数量增加了13倍,而CD34+细胞的数量减少了3%。StemPro®-34SFM在细胞因子驱动的CD34+细胞扩增方面比经典培养基(IMDM+20%FBS)增加了3倍。CD34+骨髓细胞来自10名捐赠者,分别接种在2x104细胞/mL的24孔平底培养皿中,培养6至8天。StemPro®-34SFM或经典培养基(IMDM+20%FBS)被补充生长因子SCF(100ng/mL)、IL-3(50ng/ml)和GM-CSF(25ng/mL)。总数被统计。CD34+细胞在第0天和第6至第8天通过FACS分析确定。


四、产品规格
细胞类型 造血干细胞、造血细胞、骨髓
内毒素水平 ≤ 10 EU/mL
产品线 StemPro™
产品类型 干细胞无血清培养基 (SFM)
数量 500 mL
种属
分类 无血清
培养类型 固定悬浮培养
形式 液体
血清水平 无血清
加有添加剂 酚红
不加添加剂 无谷氨酰胺
Unit Size Each

五、使用方法
 (1)准备步骤
1.复温:使用前将培养基从2–8°C取出,室温静置30–60分钟至完全复温,禁止加热或剧烈摇晃。
2.无菌检查:使用前目测培养基是否有浑浊、沉淀或污染迹象,若出现异常请勿使用。


(2)制备介质
补充剂StemPro®-34SFM基础培养基含StemPro®-34营养补充剂和L-谷氨酰胺:
1.将ThermStemPro®-34营养补充剂在4°C下过夜解冻。多次轻轻颠倒小瓶,充分混合。
2.使用前,将全部内容物(13mL)StemPro-34营养补充剂直接无菌添加至500mLStemPro-34SFM基础培养基中。旋
转混匀。注意:StemPro-34营养补充剂可解冻、分装并再次冷冻一次。避免反复冻融循环,解冻后立即使用。
3.无菌添加5mL 200mM L-谷氨酰胺(终浓度为2mM)至使用前500mL StemPro®-34SFM基础培养基。
4.补充完整StemPro-34 SFM中添加细胞因子或生长因子,以延长祖细胞的培养支持。注意:对于造血干细胞(HSC)培养,我们建议在使用前立即向完整StemPro-34SFM中添加细胞因子自洽场(100ng/mL)、IL-3(50ng/mL)和GM-CSF(25ng/mL)。


3)细胞接种
1.细胞复苏:将冻存的hMSCs在37°C水浴中快速解冻,加入预热的完全培养基(含补充剂的StemPro™-34 SFM)离心(200×g,5分钟),弃上清后重悬细胞。
2.接种密度:以5,000–10,000 cells/cm²的密度接种于明胶包被的培养器皿中(明胶包被浓度:0.1%,37°C孵育30分钟后吸弃)。
3.培养条件:37°C、5% CO₂、湿度饱和的培养箱中培养。


4)培养基更换
1.首次换液:接种后24–48小时更换新鲜完全培养基,以去除未贴壁细胞和残留的冻存保护剂。
2.常规换液:此后每2–3天更换一次培养基,换液前将培养基预热至37°C,操作时避免直接冲击细胞层。


 (5)细胞传代 
1.传代时机:当细胞融合度达到70–80%时进行传代,避免过度融合导致细胞分化。
2.消化步骤:
①.吸弃旧培养基,用PBS(不含Ca²⁺/Mg²⁺)轻柔洗涤细胞1–2次。
②.加入0.25%胰蛋白酶-EDTA(37°C预热),覆盖细胞层,37°C孵育2–5分钟至细胞变圆脱落。
③.加入等量完全培养基终止消化,轻轻吹打细胞至单细胞悬液,离心(200×g,5分钟)后重悬,按1:3–1:5比例传代至新的明胶包被培养器皿中。


 (6)细胞冻存 
当细胞处于对数生长期(融合度60–70%)时,用胰蛋白酶消化后离心,重悬于冻存液(含10% DMSO的完全培养基)中,密度为1–5×10⁶ cells/mL,梯度降温后于-80°C过夜,次日转移至液氮中长期储存。

 (7)注意事项 
1.无菌操作:全程严格无菌操作,避免污染;分装或更换培养基时使用无菌吸管和离心管。
2.避免反复冻融:基础培养基和补充剂分装后,建议-20°C单次冻存,避免多次冻融影响性能。
3.细胞监测:定期通过显微镜观察细胞形态(典型成纤维样梭形),若出现形态异常或生长缓慢,需检查培养条件或细胞活力。
4.安全提示:DMSO对皮肤和黏膜有刺激性,操作时佩戴手套和护目镜;废弃培养物需按生物安全规定处理。


 (8)预期结果 
在正确使用条件下,hMSCs可在StemPro™-34 SFM中稳定传代8–10代,保持CD73、CD90、CD105等表面标志物阳性,CD34、CD45阴性,并维持向成骨、成脂、成软骨方向的分化潜能。

 (9)故障排除 
1.细胞贴壁不良:检查明胶包被是否充分,或尝试提高接种密度;确保培养基pH值(7.2–7.4)和渗透压正常。
2.细胞增殖缓慢:确认培养箱CO₂浓度和温度稳定;检查培养基是否添加补充剂,或是否超过保质期。
3.细胞分化:避免细胞过度融合(超过80%),控制传代次数(建议不超过10代),换液时避免剧烈晃动。


六、质量控制
•每批次产品均通过无菌性、内毒素(<0.1 EU/mL)、pH值、渗透压(280-340 mOsm/kg)及干细胞增殖/分化活性验证。
•符合ISO 13485质量管理体系标准,支持药物主文件(DMF)备案需求。


七、内容与储存
•500mL StemPro™-34无血清培养基(在黑暗环境中于 2°C 至 8°C 下储存)
•13mL StemPro™-34营养素补充剂(在黑暗环境中于 -5°C 至 -20°C 下储存)
完全培养基在黑暗环境中于 2°C 至 8°C 下储存。


八、引用和文献
1.Functional profiling of single CRISPR/Cas9-edited human long-term hematopoietic stem cells.
Authors:Wagenblast E,Azkanaz M,Smith SA,Shakib L,McLeod JL,Krivdova G,Araújo J,Shultz LD,Gan OI,Dick JE,Lechman ER
Journal:Nature communications
PubMed ID:31628330

2.Ex vivo expanded human cord blood-derived hematopoietic progenitor cells induce lung growth and alveolarization in injured newborn lungs.
Authors:Mao Q,Chu S,Ghanta S,Padbury JF,De Paepe ME
Journal:Respiratory research
PubMed ID:23522153

3.Human pluripotent stem cells differentiated in fully defined medium generate hematopoietic CD34- and CD34+ progenitors with distinct characteristics.
Authors:Chicha L,Feki A,Boni A,Irion O,Hovatta O,Jaconi M
Journal:PloS one
PubMed ID:21364915

4.Development of the hemangioblast defines the onset of hematopoiesis in human ES cell differentiation cultures.
Authors:Kennedy M,D'Souza SL,Lynch-Kattman M,Schwantz S,Keller G
Journal:Blood
PubMed ID:17148580

5.Differentiation of Human-Induced Pluripotent Stem Cells to Macrophages for Disease Modeling and Functional Genomics.
Authors:Shi J,Xue C,Liu W,Zhang H
Journal:Current protocols in stem cell biology
PubMed ID:30537374
公司简介
北京智杰方远科技有限公司成立于2011年是一家进口胎牛血清专业供应商,专注细胞生物学试剂开发、销售、服务的高新技术企业。
主要代理产品如下: 1.进口胎牛血清:美国GIBCO、德国PAN-biotech、以色列BI、澳大利亚Ausgene-X、德国Cegrogen、美国GEMINI、美国Hyclone等。
2.MP Bio、日本同仁、TAKARA、Biolog微生物鉴定板、Borer清洗产品、台湾旭基。 3.Thermo、SIGMA、QIAGEN、MERCK、LEICA、Millipore、Whatman等。
好产品+好价格+好服务为经营理念,希望不断发展的智杰方远成为您最佳的选择!

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