BCIP/NBT即用型显色液

特别提示：包括BCIP/NBT即用型显色液在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：BCIP/NBT即用型显色液
英文名称：BCIP/NBT Solution，Premixed
产品货号：RFT082
产品规格：100ml

本染色液为即用型工作液，可以直接使用，不用稀释。BCIP＋NBT是碱性磷酸酶(AP)最佳的底物组合之一。在碱性磷酸酶的催化下，BCIP会被水解而产生强反应性的产物，该产物与NBT发生反应，形成不溶性的深蓝色至蓝紫色化合物。该试剂盒可用于AP系统的IHC 和Western Blot 实验的酶促显色。在AP催化下，在组织切片或印迹膜上结合了AP偶联物的地方产生深蓝色沉淀，可根据颜色反应来确定目的蛋白的位置及表达情况。

使用方法：
1. 印迹膜显色：
将本产品滴加在待检测的印迹膜上(或将印迹膜浸入到 BCIP/NBT 显色液中)，室温避光孵育 10-20 分钟。显色完毕后，将膜浸入水中，终止反应。
注：印迹膜显色前要用1×TBST漂洗3次，每次10分钟。不要用1×PBST漂洗，因为无机磷是AP的强烈抑制剂。

2. 组织切片或细胞爬片显色：
滴加适量的BCIP/NBT显色液于需要显色的组织切片或细胞爬片上，室温避光孵育10-20分钟。显微镜下观察控制显色时间，当达到最佳显色效果后，自来水冲洗终止显色。显色后的切片经复染、脱水透明，封片后可长期保存。

储存条件：2～8℃，有效期一年。

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名称：真菌总蛋白质微量提取试剂盒
货号：BTN81202
规格：50次
本产品专门用于快速提取微量酵母蛋白用于SDS-PAGE凝胶电泳和Western印迹分析。本产品结合玻璃珠破壁和化学法破壁两种方法，适合于各种形态的各种酵母材料。

产品特点：
1．破壁效率高，能达到80-90%。
2．可以处理各种酵母样品。
3．操作简单，得到的裂解液可以直接用于SDS-PAGE和Western印迹分析。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	100ml
溶液B成分一	50ml
溶液B成分二	1.5g
玻璃珠，400μm	5g
说明书	1份

储存条件：常温运输、4℃保存(溶液B成分二需-20℃保存)，有效期一年。

使用方法：
准备工作：将溶液B成分二(干粉)全部加到50mL溶液B成分一中，充分摇晃使之全部溶解，成为溶液B，然后分装成小分(体积根据每次实验的样品数决定)并放-20℃长期保存。

1．将酵母细胞接种到5mL YPD培养基中，30℃摇晃(250rpm/分钟)过夜培养使其OD600达到0.5～2.0。
2．把酵母细胞培养物转到装有2mL预冷溶液A的10-15mL离心管中，混匀。
3．4℃，5000g离心5分钟沉淀酵母细胞，吸出上清液。
4．用30μL溶液B悬浮酵母细胞，并快速转移到1.5mL塑料离心管中。
5．100℃下保温3分钟，使蛋白酶失活，样品存放于-20℃。
6．加入0.1g的玻璃珠。
7．在旋涡振荡器上剧烈振荡混合2-10分钟。
8．加入70μl溶液B，稍加振荡，置100℃保温1分钟。
9．取5-20μl抽提液上样直接进行SDS-PAGE凝胶电泳。

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货号	名称	规格
BTN140649	1mL亲和层析柱	1mL
BTN90402	蛋白胶微量回收试剂盒	50次
WE0285	0.5 M Tris-HCl缓冲液(pH6.8)	500ml
WE0319	EDTA缓冲液(IHC抗原修复液，50×)	100ml
SNM478	BCIP/NBT显色试剂盒	1
SNM485	复合消化液	10ml
RFT041	蛋白Marker(66KD)	50mg