特别提示：包括大肠杆菌Rosetta-gami B(DE3)菌种在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：大肠杆菌Rosetta-gami B(DE3)菌种
英文名称：E.coli Rosetta-gami B(DE3) Strain
产品货号：BTN12-206y
产品规格：1 mL

Rosetta-gami B(DE3)系列菌株来源于Origami B系列菌株，携带有TrxB和Gor基因突变，集合了BL21系列，Rosetta系列菌株和Origami系列菌株的优点，极大的增强了细胞内二硫键的形成和含有在大肠杆菌中稀有密码子的真核细胞蛋白的表达能力。

Rosetta-gami B(DE3)系列菌株含有pRARE质粒，包含稀有密码子；含有BL21系列菌株中的lacZY基因突变，能够通过IPTG高效控制目的基因的表达；含有溶源性的λDE3，带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝。

产品特点：
1．携带pLysSRARE质粒，质粒上面有6种tRNA基因，大肠杆菌染色体上稀缺这六种tRNA，故可以提高本菌种在表达相关基因时的产量。pLysS还携带T7溶菌酶基因，故可以严谨控制表达。
2．染色体上有lacUV5启动子控制的T7 RNA聚合酶基因，在IPTG的诱导下能大量产生T7 RNA聚合酶。
3．缺失lon和ompT两个蛋白酶基因，有利于外源蛋白的纯化。
4．EcoB系统Eco位点识别能力缺失，导致EcoB甲基化修饰和限制功能均失，甲基化和非甲基化质粒均可转入本菌种。
5．Dcm甲基化系统缺失，制备的质粒CCWGG中的第二个C是非甲基化。
6．具有氯霉素抗性。

基因型：
F^-ompT hsdS_B(r_B^-m_B^-)gal dcm lacY1 aphC(DE3)gor522::Tn10 trxB pRARE(Cam^R,Kan^R,Tet^R)

菌种扩繁步骤如下：
1.配制LB固体培养基和液体培养基，高压蒸汽灭菌，固体的培养基倒平板备用。
2.复苏：挑取菌种，在培养基上划线。37℃培养24小时至长出菌落。
3.摇菌：配制LB液体培养基，高压蒸汽灭菌。无菌试管内加入3mLLB培养基，挑取单菌落加入培养基中，37℃，200rpm摇菌过夜。
4.扩大培养：三角瓶中加入50 mL液体LB培养基，加入1 mL菌液，37℃，200rpm摇菌至所需OD值。
  注：培养基内需加入菌株所具有抗性的抗生素。

保存条件：4℃。

根据您的关注的大肠杆菌Rosetta-gami B(DE3)菌种，大肠杆菌Rosetta-gami B(DE3)菌株，您可能还对以下产品有需求：



名称：毕赤酵母X33菌种
货号：BTN12-213y
规格：1 mL

名称：大肠杆菌DB3.1菌种
货号：BTN12-230y
规格：1 mL

名称：大肠杆菌DH5α(pir)菌种
货号：BTN12-231y
规格：1 mL

名称：大肠杆菌HMS174（DE3）菌种
货号：BTN12-112y
规格：0.5 mL
HMS174（DE3）是染色体上携带lacUV-T7 RNA聚合酶基因的专门用于蛋白表达的K-12菌株。

产品特点：
1．染色体携带DE3溶源性?原噬菌体，其上带有lacUV-T7 RNA聚合酶基因，可在IPTG诱导下表达T7 RNA聚合酶。跟pET系列载体和其他T7启动子驱动的表达体系兼容。
2．RecA突变使得三种重组途径缺失，外源基因（包括整合进入染色体的DE3?原噬菌体）非常稳定。
3．具有完整的乳糖代谢途径，故在诱导蛋白表达时，可以用乳糖同时作为唯一碳源和诱导剂（乳糖在细胞内被?-半乳糖苷酶降解成葡萄糖和半乳糖后，后者可以诱导lac启动子的表达），因此不需要IPTG作为诱导剂，成本比BL21（DE3）以葡萄糖做碳源，以ITPG做诱导剂的表达模式低，适合工业级大规模表达外源蛋白。
4．菌株具有利福平抗性。

基因型：
大肠杆菌HMS174(DE3)菌种的基因型是：K-12,F-,λDE3[lacI,lacUV5-T7 gene1,ind1,sam7,nin5],recA1,hsdR19,IN(rrnD-rrnE)1,rph-1,rpoB331(rif^R)。

大肠杆菌HMS174(DE3)菌株的基因型符号及其含义列表如下：

基因型	表现型
K-12	K-12系的所有菌种默认都携带F因子和λ、e14、rac三种原噬菌体。其中的e14携带野生型mcrA基因，其产物可对甲基化的CG切割。
F-	此菌种缺失F因子
λDE3[lacI,lacUV5-T7 gene 1,ind1,sam7,nin5]	染色体携带DE3 λ原噬菌体，此片段又携带lacI、sam7I等基因和由lacUV5启动子控制的T7 RNA聚合酶基因
hsdR19	EcoK系统的限制性内切酶Eco失活，不酶切没甲基化的Eco位点
IN(rrnD-rrnE)1	rrnD-rrnE区域发生颠倒
recA1	DNA重组活性降低
rph-1	通过移码突变影响其下游的pyrE基因表达，使得嘧啶的合成达不到最佳浓度
rpoB331(rifR)	具有利福平抗性

保存条件：-80℃，有效期一年

关注大肠杆菌Rosetta-gami B(DE3)菌种，大肠杆菌Rosetta-gami B(DE3)菌株的同时，为您推荐更多您可能感兴趣的产品：
 

货号	名称	规格
BTN12-114y	毕赤酵母SMD1168菌种	1 mL
BTN12-284	大肠杆菌AG1菌种	1 mL
BTN12-25y	大肠杆菌BL21(DE3)菌种	1 mL
BTN12-106y	大肠杆菌BL21-Trxb(DE3)菌种	1 mL
BTN12-228y	大肠杆菌C43(DE3)菌种	1 mL
BTN12-229	大肠杆菌C600菌种	0.5mL
BTN12-234y	大肠杆菌ER2738菌种	1 mL