细胞活力检测试剂盒(化学发光法)

特别提示：包括细胞活力检测试剂盒(化学发光法)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：细胞活力检测试剂盒(化学发光法)
英文名称：Luminescent Cell Viability Assay Kit
产品货号：YT897
产品规格：100次|500次

本试剂盒是一种通过化学发光法测定细胞内ATP含量从而来定量检测活细胞数目的试剂盒。本试剂盒的性能和用途与Promega公司的同类产品基本相同，对于相同的细胞样品本试剂盒的发光效果更强一些。

本试剂盒比常见的MTT、alamarBlue、Calcein-AM、WST-1、CCK-8等其它细胞活力测定方法更加简单快捷。只需把试剂盒提供的检测试剂与培养细胞等体积混合，反应10分钟后即可进行化学发光检测。无需洗涤细胞，也无需更换或去除培养液。并且化学发光非常稳定，在反应开始后的10分钟内无显著变化，30分钟内的下降不超过10%。

本试剂盒不仅适合少量样品的检测，也非常适合大量样品的高通量筛选检测。

本试剂盒线性范围广，检测灵敏度高。用96孔板进行检测时，本试剂盒在0-50,000个细胞/孔的细胞密度范围内有良好的检测效果，并且在仅有几百个细胞时仍有良好的线性关系。当细胞数量仅为50个/孔时，发光强度可达空白孔的5倍左右。

ATP，作为最重要的能量分子，在细胞的各种生理、病理过程中起着重要作用。ATP是细胞新陈代谢的一个重要指标，也是具有代谢活性细胞的重要标志性分子，并和活细胞数目成良好的线性关系。因此，ATP含量能很好地反应活细胞的数目，即本试剂盒可以通过测定ATP含量来进行细胞计数或检测细胞活力。

本试剂盒通过ATP检测细胞活力的原理参考下图。借助ATP依赖的萤光素酶催化的萤光素发光反应，ATP可以通过测定化学发光来进行定量。由于ATP含量能很好地反映活细胞的数目，而ATP含量和发光强度成正比，这样就可以简单地通过化学发光强度来计算出细胞活力或细胞数目。



对于96孔板，我们推荐使用100μl细胞培养液和100μl的检测试剂，总体积为200μl，此时本试剂盒可以进行100次检测。对于384孔板，我们推荐使用25μl细胞培养液和25μl的检测试剂，总体积为50μl，此时本试剂盒可以进行400次检测。也可以用其它体积的试剂进行检测，但细胞培养液和检测试剂体积的比例必须为1:1。

注意事项：
1. 本试剂盒的检测试剂中含有萤光素酶，反复冻融会导致其逐渐失活。尽管经测试本试剂反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，为取得良好的使用效果，第一次解冻后可适当分装保存。反复冻融过程中，可能会导致检测试剂中出现少量沉淀，此时宜平衡至室温，并尽量溶解。如仍有残留的不溶物，可以离心去除后使用，经测试不会影响后续的检测效果。
2. 检测时需使用白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板，相邻孔之间会产生相互干扰。
3. 使用说明中提供了检测ATP标准品的方法，实际检测细胞活力时通常并不需要检测ATP标准品。

储存条件：室温，有效期2年。

根据您的关注的细胞活力检测试剂盒(化学发光法)，您可能还对以下产品有需求：



名称：Annexin V-PE细胞凋亡检测试剂盒
货号：YT132
规格：20次
本试剂盒是用PE(藻红蛋白标记的重组人Annexin V来检测细胞凋亡时出现在细胞膜表面的磷酯酰丝氨酸的一种细胞凋亡检测试剂盒。一个包装的本试剂盒共可以检测20个样品。可以使用流式细胞 仪、荧光显微镜或其它荧光检测设备进行检测。本试剂盒检测的是红色荧光，因此在待检测的细胞已经表达GFP等绿色荧光蛋白的情况下，特别适合使用本试剂盒检测细胞凋亡。PE可以被495nm、545或564nm的激发光所激发，发出峰值为575nm的荧光。(参考下图)



Annexin是一类广泛分布于真核细胞细胞浆内钙离子依赖的磷酯结合蛋白，参与细胞内的信号转导。但仅Annexin V被报道可以调控一些PKC的活性。

Annexin V选择性结合磷酯酰丝氨酸(phosphatidylserine，简称PS)。磷酯酰丝氨酸主要分布在细胞膜内侧，即与细胞浆相邻的一侧。在细胞发生凋亡的早期，不同类型的细胞都会把磷酯酰丝氨酸外翻到细胞表面，即细胞膜外侧。磷酯酰丝氨酸暴露到细胞表面后会促进凝血和炎症反应。而Annexin V和外翻到细胞表面的磷酯酰丝氨酸结合后可以阻断磷酯酰丝氨酸的促凝血和促炎症反应活性。

用带有红色荧光的荧光探针PE标记的Annexin V，即Annexin V-PE，就可以用流式细胞仪或荧光显微镜非常简单而直接地检测到磷酯酰丝氨酸的外翻这一细胞凋亡的重要特征。

正常细胞不会被Annexin V-PE所染色，凋亡细胞和坏死细胞都会被Annexin V-PE所染色。如果希望进一步区分凋亡和坏死细胞，可以使用其它细胞凋亡检测试剂盒进行检测。

注意事项：
1. 如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
2. 染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
3. 如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，最终导致染色失败。
4. 荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。

储存条件：4℃避光，有效期6个月。

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货号	名称	规格
YT133	Annexin V-EGFP细胞凋亡检测试剂盒	20次|50次
KFS319	WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒	100T|500T
KFS336	Ki67细胞增殖检测试剂盒(ICF/FACS法)	20T
SY0500	Hoechst 33342/PI双染试剂盒	100T
SY1066	Bcl-2抑制剂(GDC-0199)	250mg|1g
ZN1525	细胞凋亡检测试剂盒I(POD)	20T