分子生物学试剂

WB抗体清除液(中性,去污剂法)

基本信息
产品名称:
WB抗体清除液(中性,去污剂法)
英文名称:
国产/进口:
国产
产地/品牌:
百奥莱博
型号:
KFS063
参考报价:
总点击数:
414
更新日期:
2025-07-31
产品类别:

性能参数

特别提示:包括WB抗体清除液(中性,去污剂法)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


产品名称:WB抗体清除液(中性,去污剂法)
产品货号:KFS063
产品规格:500ml

Western Blot 抗体清除缓冲液(Stripping buffer),用于Western Blot 中做完免疫杂交之后的膜重复利用。在Western 中完成了一抗二抗结合和后续的化学发光检测后,有时还需要检测其它蛋白,通过使用抗体清除液,充分去除结合的一抗二抗,可以非常方便地重新利用使用过的膜检测其它蛋白。和重新跑一个SDS-PAGE 胶相比,不仅省时省力,而且可以消除重新上样而带来的误差,使可比性更强。

Western Blot 抗体清除缓冲液,经过多个抗体的检测试验,通常可以重复利用膜3-5 次。

中性抗体清除液基于去污剂法,无腐蚀性,可快速地应用于PVDF 膜上一抗和二抗的去除。

使用说明
1. 在完成Western 化学发光检测后,蒸馏水中漂洗5 分钟。
2. 弃蒸馏水,加入适量的Western 一抗二抗去除液(中性),至少需把膜完全覆盖。在摇床上漂洗10 分钟。
3. 弃抗体清除液,并吸尽残余液体。加入TBS、TBST 或PBS 漂洗3-4 次,每次在摇床上漂洗3-5 分钟。
4. 进行封闭(blocking)等Western 的后续操作。

注意事项
1. 为取得最佳效果,推荐使用PVDF 膜。
2. 如多次重复使用同一张膜5 次以上,有可能会导致蛋白信号的减弱,建议膜重复使用不超过5 次。
3. 使用ECL 等类似的化学发光试剂进行的Western Blot 检测适用本试剂。使用非化学发光试剂进行的Western Blot检测,例如DAB,NBT/BCIP 等,不适用于本试剂。

储存:4℃,有效期12个月。

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名称:十二烷基磺酸钠
货号:BTN131049
规格:100g
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SDS分子结构式

储存条件:常温运输和保存,有效期一年。

名称:SDS-PAGE电泳液
货号:YT619
规格:1L|10×1L
本品可以用于SDS-PAGE时的电泳缓冲液。使用时每个包装加蒸馏水溶解,定容到一升即可使用。本电泳缓冲液可以回收,回收后可以再使用1-2次。

注意事项:
1. 配制好的电泳液使用时间不宜超过两周。
2. 回收的电泳液可以重复使用,但为了取得最佳的电泳效果,应使用没有使用过的电泳液。

储存条件:室温,有效期2年。

名称:SDS-PAGE浓缩胶缓冲液(4×)
货号:WE0286
规格:200ml
  本产品为配制SDS-PAGE浓缩胶缓冲液,可用于配制各种浓度的变性及非变性PAGE凝胶,方便、快捷。产品中已加入10%SDS,使用时不用另外加入。

操作步骤
根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶配制浓度,最佳胶浓度请参考附表1。

I 灌制分离胶(各试剂使用量请参考附表2)
1、参照凝胶模具说明书,装配好凝胶模具。
注:加入上层筛板有助于加样时保持填料与样品均匀接触,是否加入上层筛板可根据实际情况选择。
2、将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、分离胶缓冲液和纯水在小烧杯或试管中混合。
3、加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
4、在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于mini-gel,凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5 cm或距梳齿约0.5 cm即可), 然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1 cm的水层,使凝胶表面保持平整。
5、静置30-60分钟,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后,表面凝胶已聚合。

II 灌制浓缩胶(各试剂使用量请参考附表3)
1、去除覆盖在分离胶上的水层。
2、将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、SDS-PAGE Stacking Gel Buffer(4×)浓缩胶缓冲液和纯水在一个小烧杯或试管中混合。
3、加入10%过硫酸铵和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
4、将浓缩胶溶液加至分离胶的上面,直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
5、将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
6、静置10~20分钟,等待浓缩胶聚合。
7、待凝胶聚合后,小心地拔出梳子,以免破坏加样孔。
8、进行常规电泳操作。

附表1. SDS-PAGE分离胶的浓度与最佳分离范围
SDS-PAGE 分离胶浓度 最佳分离范围
6%胶 50-150 kD
8%胶 30-90 kD
10%胶 20-80 kD
12%胶 12-60 kD
15%胶 10-40 kD


附表2. 配制SDS-PAGE分离胶
分离胶浓度 凝胶体积 所需各组分体积(单位:ml)
纯水 30%Acr-Bis(29:1) 分离胶缓冲液(4×) 10%APS TEMED
6% 5ml 2.75 1.0 1.25 0.05 0.004
10ml 5.5 2.0 2.5 0.1 0.008
15ml 8.25 3.0 3.75 0.15 0.012
20ml 11 4.0 5 0.2 0.016
8% 5ml 2.42 1.33 1.25 0.05 0.003
10ml 4.8 2.7 2.5 0.1 0.006
15ml 7.25 4.0 3.75 0.15 0.009
20ml 9.7 5.3 5 0.2 0.012
10% 5ml 2.08 1.67 1.25 0.05 0.002
10ml 4.17 3.33 2.5 0.1 0.004
15ml 6.25 5.0 3.75 0.15 0.006
20ml 8.3 6.7 5 0.2 0.008
12% 5ml 1.75 2.0 1.25 0.05 0.002
10ml 3.5 4.0 2.5 0.1 0.004
15ml 5.25 6.0 3.75 0.15 0.006
20ml 7.0 8.0 5 0.2 0.008
15% 5ml 1.25 2.5 1.25 0.05 0.002
10ml 2.5 5.0 2.5 0.1 0.004
15ml 3.75 7.5 3.75 0.15 0.006
20ml 5 10.0 5 0.2 0.008


附表3. 配制5%SDS-PAGE浓缩胶
凝胶体积 所需各组分体积(单位:ml)
纯水 30%Acr-Bis(29:1) 浓缩胶缓冲液(4×) 10%APS TEMED
2ml 1.14 0.34 0.5 0.02 0.002
4ml 2.28 0.68 1 0.04 0.004
6ml 3.42 1.02 1.5 0.06 0.006
8ml 4.56 1.36 2 0.08 0.008


储存条件:2~8℃


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