特别提示：包括核酸外切酶I在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：核酸外切酶I
英文名称：Exonuclease I
产品货号：JN0071
产品规格：750U

  本酶是单链特异性3"→5"核酸外切酶，从ssDNA的3"-OH末端分解生成5"-单核苷酸。对单链DNA的特异性非常高，不分解双链DNA及RNA。可通过80℃，15分钟的热处理使之失活。本制品是把Exo I基因(E. coli)在大肠杆菌中进行表达后，经多次纯化分离而得到的。

产品用途：
1、酶解法清洁PCR反应产物。
2、如需对PCR产物进行测序，需去除反应体系中残存的引物及dNTP，否则测序反应则不能正常进行。外切核酸酶I可用来去除残留的单链引物以及扩增反应中产生的多余的单链DNA。虾碱性磷酸酶（SAP）用来去除残存的单核苷酸（dNTP），之后不需要对PCR产物进行纯化，即可以进行测序反应。此法可以避免繁琐的胶回收、柱纯化、沉淀、磁珠、过滤、透析等方法。
3、在反应液中去除ssDNA fragment。

活性定义：以热变性小牛胸腺DNA为底物，在37℃、pH9.5的 条件下，30分钟内产生10 nmol的酸可溶性物质所 需要的酶量定义为1个活性单位 (U)。

质量保证：经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单 一的目的条带；PCR方法检测无大肠杆菌DNA残 留，无核酸内、外切酶污染。

热失活：65℃，20分钟。

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名称：Therminator II DNA聚合酶
货号：BTN131196
规格：100U
Therminator II DNA聚合酶是9°Nm DNA聚合酶中的一种，但有较强的修饰底物掺入能力，如dNTP、rNTP和acyNTP。Therminator II DNA聚合酶是Therminator DNA聚合酶的衍生物，前者比后者多了一个氨基酸突变。这种改变提高了rNTP和3′功能基团经修饰核苷酸的掺入效率。

产品特点：
1．提高了修饰核苷酸特别是rNTP的掺入能力；
2．部分核糖核酸置换法测定DNA序列；
3．ddNTP或acyNTP的链终止法测序；
4．ddNTP或acyNTP链终止法测序用于SNP分析。

产品组成：

成份	规格
Therminator II DNA聚合酶(2000U/mL)	50μL
10×Buffer	1.5mL
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：1单位指75℃条件下，30分钟内使10nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量。

名称：Tth DNA聚合酶
货号：BTN90501
规格：250U
本酶来源于嗜热菌Thermus thermophilus HB8。在有Mg2+等二价阳离子存在的情况下，具有DNA多聚酶活性。它与Taq酶一样被广泛用于PCR反应，但耐热性比Taq酶高，因此对高GC含量模板的PCR 也有较好的效果。本酶基本上没有3′→5′外切酶活性及5′→3′外切酶活性，所以也可用于双脱氧法测序。另外，本酶具有RTase活性，在Mn2+存在的情况下，RTase活性会得到强化。利用该特性，可以用来在同一管中进行逆转录反应和PCR反应，即一步法RT PCR。(但是，在Mn2+存在时，RT-PCR的准确性不高)此外，本酶与Taq DNA多聚酶一样，PCR产物可通过T载体进行TA克隆。

产品特点：
1．RT-PCR反应的特异性增加：在较高的温度下进行逆转录，增加了引物杂交和延伸的特异性。
2．二级结构减少：在较高的温度下进行逆转录，减少了由于RNA二级结构引起的问题。

产品组成：

成分	规格
Tth DNA聚合酶(5U/μL)	50μl
10×Tth Buffer	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
以λDNA为模板，以10×Tth Buffer(+MgCl2)作为缓冲液进行体积为50μL的PCR扩增反应为例

1．按下列组份配制PCR反应液。

成分	终浓度	用量
Tth DNA聚合酶(5U/μL)	1.25U	0.25μl
10×Tth Buffer(+MgCl2)	1×	5μl
dNTP Mixture(各2.5mM)	各0.2mM	4μl
模板DNA	50pg～1μg	详见下表
引物1(10μM)	0.1～1μM	最多到1μL
引物2(10μM)	0.1～1μM	最多到1μL
灭菌蒸馏水		加到50μL

推荐50μL PCR反应体系中模板DNA推荐使用量：

哺乳动物基因组DNA	0.5～1μg
酵母基因组DNA	5～500ng
细菌基因组DNA	0.5～50ng
质粒DNA	5～500pg
PCR回收片段	1～100pg

2．PCR反应条件
以λDNA为模板，扩增1kbp的DNA片段的PCR反应条件如下：

注：PCR反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况，设定最佳的反应条件(温度、时间等)。

注意事项：
1．循环测序：该酶为耐热性酶，可通过与PCR 同样的温度条件进行测序反应。由于其高温稳定性好，对于复杂高级结构的模板效果较好。
2．引物：用于耐热性酶测序的引物需比用于非耐酶测序的引物设定更长的时间。采用较短的引物时，可能会出现不能获得条带变淡的情况。

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