以下是
家兔骨髓间充质干细胞;2012083MSC图详细说明:
细胞名称 家兔骨髓间充质干细胞;2012083MSC图片
形态特性 成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞系来源于一雄性家兔的骨髓。2012年由中科院昆明细胞库建立。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
传代方法 1:2传代;3-4天一次
传代情况 P2
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR -
同工酶
染色体
应用:
1、细胞因子检查试剂盒,如白介素、肿瘤坏死因子、干扰素、转化生长因子、凋亡因子等等; 2、心肌梗塞检查ELISA试剂盒,如肌钙蛋白、肌红蛋白、C-反响蛋白等等;
3、内分泌检查ELISA试剂盒,如甲状腺、胰腺、性激素、孕酮、睾酮、生长激素、生长抑素、催乳素、促肾上腺皮质激素等等;
4、肝纤维化检查ELISA试剂盒,如纤维连接蛋白、胶原、基质金属蛋白酶,层粘蛋白等等;
5、本身免疫检查,如甲状腺、抗核抗体、DNA、抗胰岛细胞抗体、蛋白酶、角蛋白抗体、抗核糖体蛋白抗体、抗聚角蛋白微丝蛋白抗体、抗平滑肌抗体等等。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)
家兔骨髓间充质干细胞;2012083MSC图摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM,常温条件下离心5分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,吹打均匀后,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。
培养操作步骤
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。

inin) ELISA Kit 人钙结合蛋白
BMP-6(Human Bone Morphogenetic Protein 6) ELISA Kit 人骨形成蛋白6
FABP(Human fatty acides) ELISA Kit 人α谷胱甘肽S转移酶
GSH-Px kit(human) 人谷胱甘肽过氧化物酶elisa试剂盒
Hcy(Human Homocysteic acid) ELISA Kit 人同型半胱氨酸
FFA(Human free fatty acids) ELISA Kit 人游离脂肪酸
ON(Human osteonectin) ELISA Kit 人骨粘连蛋白
FA(Human Folic acid) ELISA Kit 人叶酸
ET(Human endotoxin) ELISA Kit 人内毒素
PPAR- Gamma(Human Peroxisome Proliferator-activated receptor Gamma) ELISA Kit 人过氧化物酶体增殖因子活化受体γ
CsA(Human Cyclosporine
0蛋白 规格: 96T/48T 英文名称
Mouse apelin-12 ELISA Kit 小鼠apelin-12(apelin-12) 规格: 96T/48T 英文名称
Mouse Apelin-12 ELISA KIT 小鼠Apelin-12 规格: 96T/48T 英文名称
Mouse Apelin-12 ELISA Kit 小鼠Apelin-12 规格: 96T/48T 英文名称
Mouse anti-alpha-Fodrin IgG/IgA ELISA Kit 小鼠alpha-Fodrin抗体IgG/IgA ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 英文名称
Mouse AGRP ELISA Kit 小鼠Agouti相关蛋白(AGRP)ELISA试剂盒
A) ELISA Kit 人环孢素A
GFAP(Human glial fibrillary acidic protein) ELISA Kit 人神经胶质纤维酸性蛋白
15-LO/LOX(Human 15-lipoxygenase) ELI