一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(绿色荧光)

中文名称：一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(绿色荧光)
英文名称：One Step TUNEL Apoptosis Assay Kit
产品规格：20次|50次
发货周期：～3天
本试剂盒提供了一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。对于经过固定和洗涤的细胞或组织，只要经过一步染色反应，洗涤后就可以通过荧光显微镜或流式细胞仪检测到呈现绿色荧光的凋亡细胞。本试剂盒足够检测20个样品。
试剂盒组份：
TdT酶——————————40μl
荧光标记液————————960μl
TdT酶稀释液(选用)————500μl
细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测，可以发现80-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时，暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT)的催化下加上绿色荧光探针荧光素(FITC)标记的dUTP(fluorescein-dUTP)，从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测，这就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法检测细胞凋亡的原理。注：FITC是fluorescein isothiocyanate的缩写，实际上大多数情况下所谓的FITC即为fluorescein。
本试剂盒有如下优点。
()高灵敏度：背景染色极低，阳性染色明亮，可以在单细胞水平检测到细胞凋亡，同时由于凋亡早期就有DNA断裂，可以检测到早期的细胞凋亡。
(2)特异性：TUNEL检测时通常更容易标记凋亡细胞，而不容易标记坏死细胞。
(3)快速：仅需约-2个小时即可完成。
(4)方便：只需一步染色反应，洗涤后即可观察，不必使用二抗等进行多步操作。
(5)应用范围广：可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况，也可以检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。
TUNEL法特异性检测细胞凋亡时产生的DNA断裂，但不会检测出射线等诱导的DNA断裂(和细胞凋亡时的断裂方式不同)。这样一方面可以把凋亡和坏死区分开，另一方面也不会把射线等诱导发生DNA断裂的非凋亡细胞判断为凋亡细胞。
极少数细胞凋亡时没有DNA断裂，此时不适用TUNEL法检测。在个别类型的坏死细胞中也发现TUNEL检测呈阳性。在需要严格判断细胞凋亡的情况下，最好同时检测多个凋亡指标。
储存条件：-20℃。


一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(绿色荧光)注意事项：
、悬浮细胞用此法时必须经离心后才能吸出上清再加DMSO。
2、Formazan 的生成不仅与活细胞数成比例，也受作用时间的影响，因此当样品较多时测定的OD 值可能随时间而变。
3、MTT 溶液为黄色，需避光保存，长时间光照会导致失效。当颜色变为灰绿色时，请勿使用。MTT 溶液在4℃或较低温度情况下会凝固，可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
操作规程
、在96孔板加入细胞00μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入00微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入00微升5000～0000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0～0μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及00%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。
8、结果分析
 a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（完全培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（完全培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×00
 b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 0%时的药物浓度(IC90)
Precoated （Mouse AntiRabbit IgG） EIA Well Strip Plate （5 ea）     Precoated （Mouse AntiRabbit IgG） EIA Well Strip Plate
Danazol （500 mg）     Danocrine|Ladogal|NSC 270|WIN ,7； pregna2,4dien20yno[2,3d]isoxazolαol
SRBVADFMK [Sulforhodamine BVADFMK]     SRBVADFMK [Sulforhodamine BVADFMK]
CellBased Assay Neutrophil Isolation Histopaque （25 ml）     CellBased Assay Neutrophil Isolation Histopaque
Decanoyl mNitroaniline （25 mg）     N（3nitrophenyl）decanamide； DemNA； Decanoyl mNitroaniline
2（4tertButylphenyl）Hbenzimidazole， 2[4（，Dimethylethyl）phenyl]Hbenzimidazole     ZLN005
DNAMWMARKER,WIDERANGEDNA Marker生物技术级无色粘稠液体FROZENsigma
L高丝酸;L类丝酸;L2基4羟基LHoMoserine;(S)2AMino4xy7noxybutyric acid;Hse
2,5二甲基醇shēng huà shì jì容量：保存：20℃克
3醇 3Pyridinqmqthcnol 00220
,2,4丁三醇shēng huà shì jì容量：25克
BOCL酪酸25克
884Boc4派啶NBOCpipeni7ine4carboxylic acid
铝芬，英文名或英文缩写：Aluminum，级别：AR，99%，规格：500克
2己基癸醇 97% 2Hqxyldqccnol 7
D(+)密二糖一水，英文名或英文缩写：Melibiose，级别：高，98%，规格：毫克
小鼠组织蛋白酶K(CTSK)ELISA试剂盒 ，英文名： CTSK ELISA Kit
绵羊白介素6(IL-6)ELISA检测试剂盒SheepIerleukin6,IL-6ELISAKit 96T/48T
犬胰岛素样生长因子II(IGF2)免疫试剂盒 Dog Insulin-like growth factor II,IGF2 ELISA kit
英文名称Mouseai-alpha-FodrinIgG/IgAELISAKit小鼠alpha-Fodrin抗体IgG/IgAELISA试剂盒规格：96T/48T
玻璃清洁剂(橱窗、大门、汽车玻璃等)500毫升/瓶
RatFMS-liketyrosinekinase3,Flt3ELISA试剂盒大鼠FMS样酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA试剂盒规格：96T/48T
小鼠α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)ELISA试剂盒 ，英文名： α-glucosidase ELISA Kit
大鼠苗条素受体(LR/Ob-R)ELISA检测试剂盒RatLeptieceptor,LR/Ob-RELISAKIT 96T/48T
人N(ε)羧乙基赖氨酸(CEL)免疫试剂盒 Human N(epsilon)(carboxyethyl)lysine(CEL)ELISA kit
一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(绿色荧光)英文名称MouseMacrophageInflammatoryProtein-3β,MIP-3βELISAkit小鼠巨噬细胞炎性蛋白-3β(MIP-3β)规格：96T/48T
冰冻切片DNA分离试剂盒50次
RabbitUrokinase-typePlasminogenActivatorReceptor,PLAUR/uPARELISA试剂盒兔尿激酶型纤溶酶原激活物受体(PLAUR/uPAR)ELISA试剂盒规格：96T/48T