特别提示:包括冰冻切片活性氧检测试剂盒(DHE探针)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:冰冻切片活性氧检测试剂盒(DHE探针)
英文名称:Frozen section ROS detection kit(DHE probe)
产品货号:HR9069
产品规格:200T|400T
本试剂盒可以快速定性检测冰冻切片样本内活性氧(ROS)水平变化差异。在激发波长535nm,发射波长610nm附近,使用荧光显微镜/激光共聚焦检测红色荧光,从而测定样本内活性氧水平。
活性氧(ROS)包括超氧自由基、过氧化氢、及其下游产物过氧化物和羟化物等,参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程。
冰冻切片活性氧检测试剂盒是一种利用荧光探针DHE进行活性氧检测的试剂盒。DHE是一种细胞膜通透性的荧光探针,被活性氧特异性氧化生成红色荧光物质,红色荧光强度与活性氧水平成正比,检测红色荧光就可知组织内活性氧的水平。
试剂盒组成:
| 组份 |
200T |
400T |
| 组份A:活性氧荧光探针DHE |
200μL |
200μL×2 |
| 组份B:10×清洗液B |
10mL |
20mL |
保存条件:探针-20℃避光保存;清洗液2-8℃保存,有效期6个月。
·染料长期不用可以-20℃保存。避免反复冻融。
·染色液A为DMSO溶液,冬季气温较低时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
·可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
·试剂拆封后请尽快使用完!
试剂盒特点:
1.使用方便:可用荧光显微镜直接观察;
2.背景低,灵敏度高;
3.线性范围宽,使用方便。
检测方法:
·荧光显微镜
·激光共聚焦显微镜
样本类型:新鲜冰冻切片
试剂盒以外自备试剂和仪器:
·荧光显微镜/激光共聚焦显微镜激发波长535nm,发射波长610nm。
· PBS/HBSS(无酚红)
使用注意事项:
·螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液体洒落。
·尽量缩短探针标记后到测定所用的时间,以减少各种可能的误差。
·对于某些样本,如果荧光太强,可以按照1:200-1:1000稀释探针。探针标记的时间也可以根据情况在20-60分钟内适当进行调整。
·以下操作步骤仅供参考,请根据实际样本情况调整。
使用方法:
一、试剂配制
1.根据样本数,用纯水将DHE探针100-200倍稀释,配成染色工作液。
2.用纯水将10×清洗液10倍稀释,配成1×清洗液工作液。
二、探针标记
1.准备待测的厚为10μm的未经固定处理的冰冻切片。
必须使用新鲜组织(手术切除后1小时内)制成的冰冻切片。否则不新鲜的样本可能检测不到活性氧。
2.室温下,小心加上200μL清洗液工作液,铺满整个切片表面,静置3-5分钟。
3.小心吸除清洗液。
4.滴加100μL染色工作液,在37℃培养箱避光孵育20-60分钟。
最好在湿盒中孵育,避免液体蒸发。
5.移除染色液。
6.用PBS洗涤切片2-3次。
7.加盖玻片或甘油封片。
8.荧光显微镜检测。
①染色完成后,立即进行荧光定性分析。
②激发波长535nm,发射波长610nm。
③荧光强,表明活性氧(ROS)含量高。
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β-葡糖醛酸苷酶作用于专一性底物释放出游离的酚酞,用比色法测定游离酚酞的量表示酶的活力。β-葡糖醛酸苷酶广泛存在于机体组织中,除肝、脾、肾上腺外,胃肠道粘膜含量也较丰富,它具有水解固醇葡萄糖醛酸和酸性粘多糖的生理功能。胃癌组织内此酶活力要显著高于十二指肠溃疡的胃组织,胃癌组织内此酶含量丰富,主要分布于癌细胞内;胃癌患者胃粘膜表面覆盖着具有此酶强活力的膜状物。这样当含丰富酶的癌细胞破碎时,胞浆中此酶即进入胃液。测定胃液β-葡糖醛酸苷酶活力对于研究胃癌有重要的意义。
产品优点:
1、稳定性:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
2、再现性:变异系数CV=1.7%。
3、回收试验: X =99%。
4、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
名称:全血乳酸测定试剂盒(比色法)
货号:SNM185
规格:50管/48样
检测指标:全血乳酸;Lactic Acid
以NAD+为氢受体,LDH催化乳酸脱氢产生丙酮酸,使NAD+转化成NADH。其中PMS递氢使NBT还原为紫色呈色物,呈色物的吸光度在530nm时与乳酸含量成线性关系。
产品优点如下:
1、快速简便:全程约30分钟,可测50例左右样本。
2、取样量微:本法取样量50ul-100ull即可
3、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
4、再现性好:变异系数CV=1.7%。
5、回收试验: X =99%。
6、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
名称:β2微球蛋白测定试剂盒(胶乳增强免疫比浊法)
货号:SNM270
规格:R1:40ml×1 R2:10ml×1
检测指标:β2微球蛋白;β2-MG
本试剂盒用于定量测定血清或尿液中β2微球蛋白(β2-MG)。有助于鉴别肾小球与肾小管性疾患。将β2微球蛋白抗体包被在胶乳颗粒上,可与标本中的β2-MG产生凝集反应,形成抗原抗体复合物,其浊度高低在一定量抗体存在时与β2-MG浓度成正比。通过测定特定波长的吸光度值,参照多定标校准曲线即可计算出标本中β2-MG的含量。
储存条件:2~8℃,避光密封,有效期12个月。
样本要求
① 血清,采血后应及时分离,避免溶血,2~8℃稳定7天,溶血及脂血的样品不能使用。
② 尿液离心后取上清液,由于尿液中β2微球蛋白在pH<5.5时不稳定,用K2HPO4调至pH 7~8后测定。在2~8℃稳定2天。
参考值范围(建议各实验室建立自己的参考值范围)
血清:1.0~3.0mg/L
尿液:0.1~0.3mg/L
性能指标:
试剂性状:R1无色或淡黄色液体,R2为乳白色液体。
试剂空白吸光度:A546nm(1.0cm) ≤1.3;
线性范围:0.2~18mg/L,判定依据:r2≥0.990;
准确度:质控品浓度≥3.0mg/L,相对误差≤10.0%;质控品浓度<3.0mg/L,相对误差≤0.3mg/L;
精密度:批内CV≤6.0%;批间相对极差≤10.0%
灵敏度:试剂检测下限≤0.2mg/L
注意事项:
1、本试剂盒线性依赖于样本与试剂的比例,降低标本的用量可以增加线性,但试剂灵敏度下降。
2、若以尿液为样本,且按试剂样本比20:1进行检测,则线性上限为3mg/L。测尿液样本时将校准品用生理盐水稀释6倍后使用。
3、在制备工作液前,轻轻振摇胶乳试剂,使其混匀。
4、本方法无前带影响。
5、本法使用多点非线性校准结果更准确。
6、本法标本不用稀释。