Lyz2-Cre
品系名称:B6/JGpt-Lyz2em1Cin(Cre)/Gpt
品系类型:Knock-in
品系编号:T003822
背景:C67BL/6JGpt
品系描述
该品系使用表达于髓样细胞(单核细胞、成熟的巨噬细胞、颗粒细胞)特异性启动子,驱动密码子优化过的Cre(iCre),小鼠品系在髓样细胞中特异性表达Cre蛋白,中靶小鼠可作为髓样细胞内诱导LoxP重组的Cre工具鼠。例如删除FLOX区域,即将该工具鼠与得到的条件性敲除模型小鼠配繁,可删除两个LoxP之间的基因片段。
通过Cas9技术定点整合至Lyz2第一个外显子ATG后面,Lyz2 3′ 增强子对于其组织特异性有重要作用,敲入iCre时不添加polyA,直接使用内源的PolyA。
品系应用
1.髓系细胞内特异性表达Cre的工具鼠;
2.可用于诱导髓系细胞中特异性LoxP系统重组;
3.研究髓系细胞相关基因与疾病。
验证数据
1.特异性表达检测
图1 使用Lyz2-icre鼠配繁rosa26-loxP-tdtomato-loxP-GFP小鼠。
rosa26-loxP-tdTomato-loxP-GFP小鼠表达红色荧光,当与表达cre重组酶的小鼠交配,后代在表达cre的细胞中tdTomato缺失,则表达绿色荧光。通过冰冻切片观察,可观察到绿色荧光表达情况,从而确认cre蛋白在特定组织中的表达情况。冰冻切片观察。观察肝脏、肺脏、脾脏冰冻切片,可见rosa26-loxP-tdTomato-loxP-GFP与Lyz2-cre交配后代,肝脏细胞中tdTomato及stop原件被切除,可表达绿色荧光EGFP,其他不能表达cre的细胞仍表达红色荧光。结果表明:T004523 Lyz2-iCre配Rosa26 mT/mG雄鼠特异性组织肝、肺、脾横切面均可见不同程度的绿色荧光蛋白(倍数为:200×)。
参考文献
1.Shimshek DR, Kim J, Hübner MR, Spergel DJ. Codon-improved Cre recombinase (iCre) expression in the mouse. Genesis.2002 Jan.32(1):19-26
2.Clausen BE; Burkhardt C; Reith W; Renkawitz R; Forster I. 1999. Conditional gene targeting in macrophages and granulocytes using LysMcre mice. Transgenic Res 8(4):265-77.
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