多重荧光免疫组化试剂盒六色TSA-Rab-24259
基本信息
产品名称：
多重荧光免疫组化试剂盒六色TSA-Rab-24259
英文名称：
国产/进口：
国产
产地/品牌：
佰诺全景
型号：
10081100100
参考报价：
销售商：
总点击数：
1131
更新日期：
2024-09-11
产品类别：
性能参数
【产品名称】 多重荧光免疫组化试剂盒-六色TSA-Rab-24259（100T）
【产品规格】 100T
【预期用途】 主要用于小鼠组织的石蜡切片、TMA芯片的荧光法免疫组化染色。
【检测原理】 多标记免疫荧光染色是基于抗原、抗体特异性结合的原理，选用辣根过氧化物酶（HRP）标记的二抗抗体，对试剂盒中的荧光染料进行活化，将信号共价结合到抗原上。借助于不同的荧光染料标记，通过多轮染色循环实现组织或细胞的原位多靶点染色。
【商品说明】
荧光多标记试剂盒，含羊抗兔二抗、封片剂、反应液，6色染料520,540,620,650,690,DAPI
【存储条件】 荧光染料为DMSO溶液，2～8°C避光保存。产品有效期为12个月，生产日期见外包装印签。
【样本要求】
1 福尔马林固定的蜡块或玻片，大块组织或TMA都可以，封蜡不能有明显的破损。
2 玻片样本，组织需要紧贴玻片，避免褶皱，玻片不能有破损、划伤或污渍。
3 组织最小应包含大于1000个细胞。
4 蜡块需包埋实体瘤组织，坏死瘤组织、细针穿刺物、细胞甩片样品会影响染色效果。
5 组织应当用10%中性福尔马林固定，正常固定时间为18～24小时。
6 切片厚度为4μm左右，使用防脱玻片。建议玻片在固定后一周内制备为佳。
7 不要在水浴捞片环节添加任何粘合剂，样本应置于玻片正面、中央。将捞片竖直置于吸水纸上去除水分，轻敲去
除水滴，不要用纸擦拭玻片。
8 玻片置于45°C热盘上放置30min（自然风干玻片时长不小于1小时）。
【设备耗材】
1 检验所需设备器材：荧光显微镜、通风橱、移液器、恒温干燥箱、微波炉、计时器
2 检测所需耗材器皿：免疫组化笔、微波修复杯、染色缸、孵育湿盒、盖玻片、洗瓶、量筒100ml、量筒1000ml等
【试剂制备】
1 通用试剂：DMSO、灭菌去离子水、二甲苯、乙醇（100%、95%、70%）、10%中性福尔马林、抗原修复液（推荐使用佰诺全景酸性或碱性抗原修复液）、一抗封闭液等。
2 试剂的稀释：使用信号放大反应液按1:100稀释制备染料工作液（现用现配）；DAPI使用无菌水按1:100稀释制备工作液。
3 二抗的使用：请注意试剂盒附带的二抗类型。TSA-RM试剂盒，标配二抗为羊抗鼠兔HRP，适用于人源组织样本；TSA-Rab试剂盒，标配二抗为羊抗兔HRP，适用于鼠源组织样本。
【实验流程】
【操作步骤】
1 脱蜡水合
a) 新鲜二甲苯浸片10min，重复3次。
b) 梯度乙醇浸片：100% 5min；95% 5min；70% 2min。
c) 灭菌水洗片1min，重复3次。
d) 10%中性福尔马林浸片10min，灭菌水洗片1min，重复3次。
2 微波修复抗原
a) 将脱蜡水合后的玻片置于修复杯中，用抗原修复液1×工作液浸没。
b) 将修复杯置于微波炉内高火煮沸。
c) 低火维持15min（注意补液，防止蒸发过度导致干片）。
d) 取出室温自然冷却至室温。
3 封闭
a) 去除玻片上残存洗液。
b) 用组化笔圈出玻片上的样本区域，滴加封闭液，覆盖样本区域。
c) 室温保湿震荡10min。
4 一抗孵育
a) 去除玻片上的封闭液。
b) 用移液器滴加稀释的一抗溶液，浸没样本区域。
c) 室温保湿震荡孵育1hr（需针对不同抗体做优化调整）。
d) 用1×TBST buffer浸洗玻片3min,重复1次。
5 二抗孵育
a) 去除玻片上残存的洗液。
b) 直接滴加HRP二抗工作液溶液，浸没样本区域。
c) 室温保湿孵育10min。
d) 用1×TBST buffer浸洗玻片3min，重复1次。
6 荧光染色放大信号
a) 去除玻片上残存的洗液。
b) 用移液器在玻片上滴加1×染料工作液100μl（使用信号放大反应液按1:100稀释），浸没样本区域。
c) 室温保湿震荡孵育10min。
d) 1×TBST buffer浸洗玻片，室温浸片3min。重复3次。
e) 微波修复，室温自然冷却至室温。
f) 灭菌水洗片1次，1×TBST buffer浸片2min。
g) 单染结束，封片观察或追加后续染色。
7 封片
a) 去除玻片上残存洗液，滴加DAPI工作液，室温保湿孵育。
b) 1×TBST buffer浸洗玻片，室温浸片3min。
c) 用灭菌水洗片2min。
d) 待玻片微干，用移液器在玻片上滴加超强抗淬灭封片剂，浸没样本区域。
e) 加盖玻片，指甲油封片。
8 阅片，对染色后的组织片在荧光显微镜下观察并进行判读。
【结果判读】
1 微波修复抗原、孵育时间、温度的改变均有可能得出错误结果。
2 在每次染色过程中，必须有组织阳性对照和试剂阴性对照实验同时进行。
3 若阳性组织对照不能显示阳性染色，则应判定该批次样本的检测结果无效。
【局限说明】
1 免疫组化染色过程中存在很多步骤或环节，每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果。
2 阳性信号定位不正确即为假阳性，包括着色不匀、背景着色、边缘效应，另外组织的某些特定成分也能导致假阳性。
3 抗原修复方法不当或一抗效价降低、失效，均有可能导致假阴性结果。
4 过度或不足的复染都可能影响结果的正确解释。
5 本试剂盒只对10%中性福尔马林固定石蜡包埋的组织进行了验证。
【性能指标】
1 符合性：取符合性组织片（包括阳性组织片和阴性试剂对照），经相应的免疫组化试验后，阳性对照染色结果为阳性，阴性对照染色结果为阴性。
2 批内重复性：取同一批次的试剂盒，检测同一组织切片3片，染色结果应一致。
【注意事项】
1 本试剂盒只用于免疫组化，不做其他用途。
2 本试剂盒仅限于专业人员使用。
3 应采用适当的防护措施，以避免试剂同皮肤和眼睛接触。
4 超过有效期的试剂活性可能降低，因此不得使用超过有效期的试剂。
5 若将本试剂盒的染色组分与其他公司的产品混合使用，在染色过程中可能出现异常情况。
6 脱蜡不彻底，容易影响染色效果。
7 为了防止可能出现的假阴性、假阳性结果，实验过程中需有阳性对照及阴性对照同时进行。
8 使用本试剂盒中所产生的各种废弃物都应按照《医疗废物管理条例》进行处理。
【产品规格】 100T
【预期用途】 主要用于小鼠组织的石蜡切片、TMA芯片的荧光法免疫组化染色。
【检测原理】 多标记免疫荧光染色是基于抗原、抗体特异性结合的原理，选用辣根过氧化物酶（HRP）标记的二抗抗体，对试剂盒中的荧光染料进行活化，将信号共价结合到抗原上。借助于不同的荧光染料标记，通过多轮染色循环实现组织或细胞的原位多靶点染色。
【商品说明】
荧光多标记试剂盒，含羊抗兔二抗、封片剂、反应液，6色染料520,540,620,650,690,DAPI
【存储条件】 荧光染料为DMSO溶液，2～8°C避光保存。产品有效期为12个月，生产日期见外包装印签。
【样本要求】
1 福尔马林固定的蜡块或玻片，大块组织或TMA都可以，封蜡不能有明显的破损。
2 玻片样本，组织需要紧贴玻片，避免褶皱，玻片不能有破损、划伤或污渍。
3 组织最小应包含大于1000个细胞。
4 蜡块需包埋实体瘤组织，坏死瘤组织、细针穿刺物、细胞甩片样品会影响染色效果。
5 组织应当用10%中性福尔马林固定，正常固定时间为18～24小时。
6 切片厚度为4μm左右，使用防脱玻片。建议玻片在固定后一周内制备为佳。
7 不要在水浴捞片环节添加任何粘合剂，样本应置于玻片正面、中央。将捞片竖直置于吸水纸上去除水分，轻敲去
除水滴，不要用纸擦拭玻片。
8 玻片置于45°C热盘上放置30min（自然风干玻片时长不小于1小时）。
【设备耗材】
1 检验所需设备器材：荧光显微镜、通风橱、移液器、恒温干燥箱、微波炉、计时器
2 检测所需耗材器皿：免疫组化笔、微波修复杯、染色缸、孵育湿盒、盖玻片、洗瓶、量筒100ml、量筒1000ml等
【试剂制备】
1 通用试剂：DMSO、灭菌去离子水、二甲苯、乙醇（100%、95%、70%）、10%中性福尔马林、抗原修复液（推荐使用佰诺全景酸性或碱性抗原修复液）、一抗封闭液等。
2 试剂的稀释：使用信号放大反应液按1:100稀释制备染料工作液（现用现配）；DAPI使用无菌水按1:100稀释制备工作液。
3 二抗的使用：请注意试剂盒附带的二抗类型。TSA-RM试剂盒，标配二抗为羊抗鼠兔HRP，适用于人源组织样本；TSA-Rab试剂盒，标配二抗为羊抗兔HRP，适用于鼠源组织样本。
【实验流程】
【操作步骤】
1 脱蜡水合
a) 新鲜二甲苯浸片10min，重复3次。
b) 梯度乙醇浸片：100% 5min；95% 5min；70% 2min。
c) 灭菌水洗片1min，重复3次。
d) 10%中性福尔马林浸片10min，灭菌水洗片1min，重复3次。
2 微波修复抗原
a) 将脱蜡水合后的玻片置于修复杯中，用抗原修复液1×工作液浸没。
b) 将修复杯置于微波炉内高火煮沸。
c) 低火维持15min（注意补液，防止蒸发过度导致干片）。
d) 取出室温自然冷却至室温。
3 封闭
a) 去除玻片上残存洗液。
b) 用组化笔圈出玻片上的样本区域，滴加封闭液，覆盖样本区域。
c) 室温保湿震荡10min。
4 一抗孵育
a) 去除玻片上的封闭液。
b) 用移液器滴加稀释的一抗溶液，浸没样本区域。
c) 室温保湿震荡孵育1hr（需针对不同抗体做优化调整）。
d) 用1×TBST buffer浸洗玻片3min,重复1次。
5 二抗孵育
a) 去除玻片上残存的洗液。
b) 直接滴加HRP二抗工作液溶液，浸没样本区域。
c) 室温保湿孵育10min。
d) 用1×TBST buffer浸洗玻片3min，重复1次。
6 荧光染色放大信号
a) 去除玻片上残存的洗液。
b) 用移液器在玻片上滴加1×染料工作液100μl（使用信号放大反应液按1:100稀释），浸没样本区域。
c) 室温保湿震荡孵育10min。
d) 1×TBST buffer浸洗玻片，室温浸片3min。重复3次。
e) 微波修复，室温自然冷却至室温。
f) 灭菌水洗片1次，1×TBST buffer浸片2min。
g) 单染结束，封片观察或追加后续染色。
7 封片
a) 去除玻片上残存洗液，滴加DAPI工作液，室温保湿孵育。
b) 1×TBST buffer浸洗玻片，室温浸片3min。
c) 用灭菌水洗片2min。
d) 待玻片微干，用移液器在玻片上滴加超强抗淬灭封片剂，浸没样本区域。
e) 加盖玻片，指甲油封片。
8 阅片，对染色后的组织片在荧光显微镜下观察并进行判读。
【结果判读】
1 微波修复抗原、孵育时间、温度的改变均有可能得出错误结果。
2 在每次染色过程中，必须有组织阳性对照和试剂阴性对照实验同时进行。
3 若阳性组织对照不能显示阳性染色，则应判定该批次样本的检测结果无效。
【局限说明】
1 免疫组化染色过程中存在很多步骤或环节，每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果。
2 阳性信号定位不正确即为假阳性，包括着色不匀、背景着色、边缘效应，另外组织的某些特定成分也能导致假阳性。
3 抗原修复方法不当或一抗效价降低、失效，均有可能导致假阴性结果。
4 过度或不足的复染都可能影响结果的正确解释。
5 本试剂盒只对10%中性福尔马林固定石蜡包埋的组织进行了验证。
【性能指标】
1 符合性：取符合性组织片（包括阳性组织片和阴性试剂对照），经相应的免疫组化试验后，阳性对照染色结果为阳性，阴性对照染色结果为阴性。
2 批内重复性：取同一批次的试剂盒，检测同一组织切片3片，染色结果应一致。
【注意事项】
1 本试剂盒只用于免疫组化，不做其他用途。
2 本试剂盒仅限于专业人员使用。
3 应采用适当的防护措施，以避免试剂同皮肤和眼睛接触。
4 超过有效期的试剂活性可能降低，因此不得使用超过有效期的试剂。
5 若将本试剂盒的染色组分与其他公司的产品混合使用，在染色过程中可能出现异常情况。
6 脱蜡不彻底，容易影响染色效果。
7 为了防止可能出现的假阴性、假阳性结果，实验过程中需有阳性对照及阴性对照同时进行。
8 使用本试剂盒中所产生的各种废弃物都应按照《医疗废物管理条例》进行处理。
公司简介
佰诺全景生物技术（北京）有限公司是专业从事高内涵病理分析技术应用开发和临床转化的创新型技术公司，目前已获得中关村高新技术企业认证。公司按照国际标准化检测的规范和要求，开发了高内涵病理检测分析平台，并完成了相关技术和业务的ISO9001质量管理体系评审认证。佰诺全景分析技术平台面向国内外基础生物学、临床医学和药物研发单位提供专业的高内涵病理染色、成像和分析技术服务，目前建立合作和服务关系的商业伙伴已达200余家，验证抗体500余种，检测各种Panel靶标组合超过300种，覆盖40余种组织类型。
高内涵病理分析技术创新中心是佰诺全景生物技术（北京）有限公司发起成立的创新型研究组织，旨在推动高内涵病理分析技术的应用开发和临床转化。高内涵病理分析技术是近年兴起的新型病理分析技术，以多靶点组织染色、全景数字病理扫描、智能定量病理分析技术为依托，在组织水平实现了单细胞精度的多元统计分析，是细胞组学时代重要的研究技术平台。高内涵病理分析在肿瘤、免疫、神经等研究领域以及对应的药物开发中都有着广泛的应用价值。特别是在热门的肿瘤免疫研究领域，高内涵病理分析技术成为描绘肿瘤微环境免疫状态的重要工具。通过多靶点病理染色和成像分析，可以在肿瘤组织原位准确测定不同免疫细胞亚群的表型、丰度、状态和相互关系，进而定量描绘肿瘤免疫微环境的实际状态，为个性化免疫诊疗策略的制定提供辅助支持。
高内涵病理分析技术创新中心是佰诺全景生物技术（北京）有限公司发起成立的创新型研究组织，旨在推动高内涵病理分析技术的应用开发和临床转化。高内涵病理分析技术是近年兴起的新型病理分析技术，以多靶点组织染色、全景数字病理扫描、智能定量病理分析技术为依托，在组织水平实现了单细胞精度的多元统计分析，是细胞组学时代重要的研究技术平台。高内涵病理分析在肿瘤、免疫、神经等研究领域以及对应的药物开发中都有着广泛的应用价值。特别是在热门的肿瘤免疫研究领域，高内涵病理分析技术成为描绘肿瘤微环境免疫状态的重要工具。通过多靶点病理染色和成像分析，可以在肿瘤组织原位准确测定不同免疫细胞亚群的表型、丰度、状态和相互关系，进而定量描绘肿瘤免疫微环境的实际状态，为个性化免疫诊疗策略的制定提供辅助支持。
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