猪原代主动脉血管内皮细胞
基本信息
产品名称：
猪原代主动脉血管内皮细胞
英文名称：
Primary porcine aortic endothelial cells
国产/进口：
国产
产地/品牌：
深圳/立沃LV-BIOTECH
型号：
Cat# LV- PAEC001
参考报价：
销售商：
总点击数：
311
更新日期：
2022-02-16
产品类别：
性能参数
猪原代主动脉血管内皮细胞
Primary porcine aortic endothelial cells
（可贴壁，Cat# LV- PAEC001）
(仅用于科学研究)
I 简介
本司原代血管内皮细胞采用胶原酶血管管腔灌注消化的方法分离，细胞纯度高、活力高。通过内皮细胞CD31对产品进行了鉴定，保证细胞高纯度、高质量。原代提取的猪主动脉内皮细胞经过夜培养后，细胞贴壁生长，部分细胞成团簇状，细胞形态呈梭形。公司可个性化定制原代细胞，可分离不同品系、满足不同客户的需求。
II 试剂与材料
-猪原代主动脉血管内皮细胞（Cat# LV- PAEC001）
-复苏培养基（Cat#LV-Rec001）
-内皮细胞培养基（Cat#LV-PAECM001）
-碎冰及冰盒
-无菌15ml离心管（冰上预冷）
-胶原包被瓶（Cat#LV-Coated）
-宽口移液枪头（普通移液枪头剪去尖头，再灭菌使用）
-移液枪
-恒温水浴锅（38℃预热）
-75%酒精
-生物安全柜
-37℃/5%CO2培养箱
-冷冻水平离心机（带水平转子，可离心15ml离心管）
III 细胞的复苏与铺板
1. 将15ml离心管插入盛有足量碎冰的冰盒中，紫外消毒15min；4℃预冷离心机。
2. 复苏培养基放碎冰中充分预冷，铺板培养基放入38℃恒温水浴锅中充分预热。
3. 将冻存的细胞从冷藏位置迅速转移至38℃恒温水浴锅中，尽可能多的浸入38℃水中，顺时针水平摇动，但必须确保冻存管盖管盖保持在水面以上。
4. 解冻冻存管约90-120s，至冻存管中只有少量碎冰漂浮即可。
5. 用75%酒精消毒冻存管，并将其转移到生物安全柜。
6. 用宽口枪头将细胞重悬（轻轻吹打2次），并转移至预冷的15ml离心管中（注意：冻存管与枪头上残留细胞，可用1ml复苏培养基清洗冻存管与枪头）。
7. 向细胞悬液逐滴加入预冷复苏培养基，每1ml细胞悬液加入10ml复苏培养基（注意：前3ml要缓慢逐滴加入并轻微摇晃，后面7ml可加快速度），最后轻微上下颠倒1次混匀。
8. 300×g，4℃离心5min，去上清。
9. 沉淀的细胞用内皮细胞培养基重悬并定容至4ml，用台盼蓝排除法测定细胞的活力和细胞总量。
10. 将细胞以3×104cells/cm2的密度接种至胶原包被的培养瓶中，摇匀，在37℃/5%CO2培养箱中培养,16-24h换液。
IV 细胞培养与传代
1. 细胞融合度达到80-85%时可进行传代。
2. 提前将培养基、PBS、胰酶放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内。
3. 吸除旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2-3min显微镜下观察
4. 待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜内皮细胞培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液（控制吹打的力度，避免产生大量的气泡）。
5. 300×g，室温离心5min，去上清并用内皮细胞培养基重悬。
6. 以3×10cells/cm密度将细胞悬液接种到新的胶原包被培养瓶内， 置37℃/5%CO培养箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
V 关于售后
如您发现有产品任何质量问题，请您收集原始数据，请第一时间联系公司销售或者技术支持，公司安排人员保证售后。每个实验室条件不同，操作人员习惯不同，熟练程度不一样，实验失败存在客观因素。如未严格按照说明书操作、超过售后时限，公司不做售后，请老师理解与支持。
售后有效期与提供的原始数据：
复苏问题：复苏24小时以内；提供台盼蓝染色或者PI染色。
污染问题：复苏96小时以内；提供相差显微镜照片。
纯度问题：一个月内；提供免疫荧光或者流式结果。
VI 联系电话
公司电话：0755-28284050；
技术支持：19902901483（周博士）
公司简介
立沃生物科技（深圳）有限公司 （Liver Biotechnology (Shenzhen) Co., Ltd），坐落于深圳市大鹏新区国际生物谷生命科学产业园，是国内专业从事原代细胞分离、冻存、再生的国家高新技术企业，拥有国家生物二级实验室、ISO9001质量管理体系认证、GB/T29490-2013知识产权贯标认证。瞄准糖尿病、肝衰竭、肿瘤等重大临床疾病，聚焦未来精准医疗新技术，开发胰岛细胞治疗、肝细胞/人工肝治疗、肿瘤精准用药等新方法和新产品，转化于深圳未来医院，满足深圳市乃至全国的重大临床需求。公司首席科学顾问由美国医学与生物工程院院士担任，拥有国家杰青、国家“973”首席科学家、深圳市高层次人才等多名技术专家，拥有博士后、博士、硕士、本科等全职工作人员20余人。目前，公司正式落户于深圳市大鹏新区国际生物谷生命科学产业园，拥有2000+平方米实验室、2000+平方米办公场地、2000+万仪器设备、SPF级动物房等，配套建设有1000平方米GMP车间。 有需要合作的同行可随时咨询！ 合作咨询：0755-28284050 下单咨询：181-2981-2531微信同号（邓）9540132657 技术支持：199-0290-1483微信同号（周）7788987205 网址: https://www.liver-biotech.com 地址：深圳市大鹏新区国际生物谷生命科学产业园A10栋
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