1.产品介绍
DEAE Seplife A25层析介质是蓝晓科技自主研发的一种新型高度交联的葡聚糖层析介质,具有高流速、低反压、高动态载量及良好的化学稳定性。DEAE Seplife
® A-25层析介质方便进行规模放大,可以缩短生产时间,提高生产效率,降低大规模生产成本。
2.性能介绍
| 产品牌号 |
DEAE Seplife A25 |
| 外观 |
白色粉末,无臭无味 |
| 种类 |
弱阴离子交换填料 |
| 基质 |
葡聚糖G25 |
| 配基 |
二乙胺基乙基 |
| 粒径(干粉,μm) |
40~120 |
| 吸附量(mg /ml) |
140 (α-乳白蛋白) |
| 离子交换量(mmol /g干胶) |
3.0~4.0 |
| pH工作范围 |
2~9 |
| pH稳定性 |
2~13(长期),2~13(短期) |
| 化学稳定性 |
以下溶液中稳定:常用的水相缓冲溶液:如8M尿素、6 M盐酸胍
|
| 耐热性 |
121℃,0.1M NaCl溶液30min |
| 应用 |
用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的离子交换层析纯化 |
3.使用方法
DEAE seplife
® A-25是粉末状,使用时需要溶胀,其溶胀比取决于所使用的缓冲溶液,不同溶液中的溶胀比不同,而且存在较大差异。溶胀时不能使用磁力搅拌,否则易导致凝胶破碎。
3.1预处理
称取所需量的DEAE seplife
® A-25(以下简称A-25),置于50~100倍蒸馏水或者上样平衡液中,溶胀,室温条件下一般需要溶胀1~2天,沸水中一般需要2小时。
3.2 装柱
装柱按照标准操作规程操作。必须保证每种材料都处于工作温度,凝胶装柱前需要脱气。
3.3平衡
使用2~5倍柱床体积的上样平衡液平衡柱子,务必使流出液的电导和pH同上样缓冲液的电导和pH完全一致。
3.4上样
根据目标产物浓度和凝胶的载量确定上样量。
3.5清洗
上样完毕后,再使用上样缓冲液平衡柱子,清洗掉不结合的蛋白和杂质,直至流出液的电导和pH同上样缓冲液的电导和pH完全一致。
3.6洗脱
可以使用增大缓冲液中盐离子浓度或者降低pH的连续洗脱或者梯度洗脱。
3.7 再生
先以1~2M NaCl洗去柱上的杂蛋白,再以蒸馏水洗去柱中盐,使流出液的电导和pH稳定。然后用上样缓冲液过柱,直至流出液的电导和pH稳定。
3.8存储
A-25干粉保存于4~30℃、干燥、通风、清洁处;溶胀后的凝胶保存于4~8℃,20%乙醇或者0.1M NaOH溶液中。
3.9运输
运输中避免日晒、雨淋、重压,严禁与有毒、有害物品混运。
4.注意事项
(1)柱的选择:从理论上说,只要柱足够长,就可以获得理想的分辨率,但由于层析柱流速同压力梯度有关,柱长增加使流速减慢,峰变宽,分辨率降低;柱的直径增加,使液体流动的不均匀性增加,分辨率明显下降。
(2)纯化过程必须严格控制洗脱缓冲液的pH及离子强度。样品与DEAE seplife
® A-25必须用洗脱缓冲液彻底平衡后,才能进行柱层析。
(3)所装的柱床必须表面平整,无沟流及气泡,否则应重装。
(4)洗脱过程中应严格控制流速,且勿过快。
(5)上样的体积要小,浓度不宜过高。
(6)加样及整个洗脱过程中,严防柱面变干。
5.订货信息
| 产品名称 |
货号 |
包装规格 |
| DEAE Seplife A25 |
D2017210 |
25g |
| D2017211 |
100g |
| D2017212 |
500g |
| D2017213 |
1kg |
| D2017214 |
5kg |
| D2017215 |
10kg |