生化试剂

MitoTracker Red CMXRos

基本信息
产品名称:
MitoTracker Red CMXRos
英文名称:
MitoTracker Red CMXRos
国产/进口:
国产
产地/品牌:
warbio沃博生物
型号:
50μg
参考报价:
470.8
总点击数:
532
更新日期:
2024-07-16
产品类别:

性能参数
产品信息
 
货号 名称 规格 价格
LX6252 MitoTracker Red CMXRos 线粒体红色荧光探针 50µg 428



产品简介
是一种细胞渗透型的X-rosamine衍生物,包含标记线粒体的弱巯基反应性的氯甲基官能团。本品是一种氧化型的红色荧光染料(Ex=579 nm,Em=599 nm),只需简单孵育细胞,即可被动运输穿过细胞膜并直接聚集在活性线粒体上。一旦线粒体被染色后,还能根据后续实验的需求进行固定(醛类固定剂如甲醛)和透化(醛类去污剂如Triton X-100),探针依然维持在细胞内。本品适合双标实验,因其红色荧光与其他的绿色荧光探针具有良好的分辨率。
虽然传统的线粒体荧光探针如TMR和罗丹明123,也能很容易的聚集在功能线粒体上,但是一旦线粒体膜电位丧失即会被洗掉,从而在一些需要细胞进行醛类固定或者包含线粒体能量状态影响因子的实验中,使其应用大受限制。
使用方法
1储存液的配制
本品是以粉末形式提供,使用前需将本品回温至室温。
之后使用细胞培养级别的无水DMSO将其充分溶解至终浓度1 mM。
本品M. Wt.= 531.52 g/mol,换算下来,50 µg粉末只需加入94 µL DMSO即可得到1 mM储存液。
可根据单次的使用量将储存液分装后放到-20℃避光,避免反复冻融。
2工作液的配制
根据不同的实验目的使用不同的探针浓度,以下的起始操作条件仅作参考,可根据细胞类型和其他的相关因素如细胞或组织的透化等进行适当调整。
用适当的缓冲液或者细胞培养基稀释1 mM储存液至工作液浓度。一般推荐使用浓度为25-500 nM。对于后续需要做固定或透化的样本,推荐工作浓度为100-500 nM,为了降低过度加载导致的潜在伪影和线粒体毒性,在不影响实验结果的前提下应尽可能低浓度染色。另外,浓度过高也可能对其他细胞结构进行染色。
3染色及检测
1)壁细胞的染色
培养皿/板内加入适量的培养基覆盖盖玻片进行爬片培养。当细胞长至所需丰度,吸除培养液,加入37℃预热的染色工作液。在所使用细胞正常培养条件下孵育15-45 min(最佳孵育时间需优化)。染色结束后,使用新鲜培养液或缓冲液替换上述染色液,即可将其置于荧光显微镜下观察或荧光酶标仪下读数。或者进行后续的固定和透化步骤,见步骤4。
2)浮细胞的染色
离心收集细胞,吸除上清,利用37℃预热的染色工作液轻轻重悬细胞。在所使用细胞正常培养条件下孵育15-45 min(最佳孵育时间需优化)。染色结束后,离心收集细胞,利用37℃预热的新鲜培养液或缓冲液重悬细胞,被染色的细胞可用流式细胞仪、荧光酶标仪、荧光显微镜进行分析。
如果需要盖玻片上固定化的细胞,那么可在铺片前先用多聚赖氨酸(poly-D-lysine)包被载玻片或盖玻片。
或者进行后续的固定和透化步骤,见步骤4。
4固定和透化
1)色结束后,利用培养液或缓冲液清洗细胞;
2)小心吸走清洗液。换用新鲜配制且预热的含2-4%甲醛的缓冲液或培养液进行细胞固定。经验证,本染料由含3.7%甲醛的完全培养液于37℃孵育内皮细胞15min能起到良好的固定效果。
3)清洗细胞:吸除固定液,用适当缓冲液冲洗细胞数次。
4)细胞透化(可选):
像ICC等实验需要细胞要做透化,则可将已固定的细胞直接加入含有去污剂如Triton X-100的缓冲液中孵育。透化结束后,用缓冲液清洗细胞即可进行后续ICC实验。经检测,利用含0.2% Triton X-100的PBS孵育内皮细胞10min可以达到良好的透化效果。
另外,还可利用预冷的丙酮透化5 min,之后用PBS清洗细胞。经验证,即使后继没有进一步的抗体标记,丙酮透化处理也可降低背景信号。
注意事项
1)DMSO有毒,使用时请小心操作。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作
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公司简介
南京沃博生物科技有限公司专注于生命科学和生物技术领域。
致力于为客户提供一系列高质量和有价格竞争力的产品,包括分子生物学、免疫学、生物化学和细胞生物学相关的试剂、试剂盒,
并提供一系列相关的技术服务。2015年,南京沃博生物科技有限公司正式成立.
自主生化试剂品牌warbio已经入驻多家高校平台,先后入驻南京大学,南京农业大学,东南大学,西湖大学,华南理工大学,北京师范大学,福建农林大学,北京库巴扎,天津基理,上海至采信息采购平台等公司秉持诚信经营,为科研工作者提供更好的产品。专业代理销售国内外生命科学领域的知名品牌以及warbio沃博生物常规生化试剂,公司长期以来与众多国内外知名厂家和多家专业代理销售公司保持密切联系、沟通与合作,拥有稳定、有效的产品供应渠道。公司长期以来以提供高质量的产品、实惠的价格和优质的服务赢得客户的好评,与多家高等院校、研究所、医院、制药企业等大型科研机构建立长期稳定的合作关系。
主要代理北京庄盟生物分子试剂,Abmart艾比玛特抗体,美国Phytoteche一级代理,美国AATBIO细胞染料,安普未来恒温扩增试剂盒,英国TwistDx公司RPA等温扩增试剂盒,美国GLPBIO抑制剂,Tolobio吐露港生物 ,药物发现一站式平台 陶术生物Topscience等国外知名生命科学产品试剂耗材。

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