快速转膜液（10×）

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产品描述

快速转膜液使用独特配方，能高效快速地将蛋白转移到印迹膜（PVDF或硝酸纤维素膜）上。使用湿转法（Tank blot）或半干转法（Semi-dry blot）方法，能在15-35分钟内完成转膜过程。

产品特点

1. 快速和环保：快速转膜液不使用甲醇，减轻了对实验者和环境的伤害。
2. 兼容性好：快速转膜液能兼容Laemmli胶，预制胶，Bis-Tris胶等多种凝胶。
3. 转移效率高：快速转膜液对分子量跨度较大的蛋白也有很好的转移效率，有效解决了大小蛋白不能在同一张膜上同时转移的问题。

浓度

10×

使用方法

转膜前的准备：5-6张裁好的滤纸；裁好的转印膜；足够的1×快速转移buffer

一、湿转法（Tank blot）：
1. 按照下表配制1×快速转膜液
100mL配制量：10mL 10×快速转膜液 + 20mL 无水乙醇 + 70mL 超纯水
500mL配制量：50mL 10×快速转膜液 + 100mL 无水乙醇 + 350mL 超纯水
1L配制量：100mL 10×快速转膜液 + 200mL 无水乙醇 + 700mL 超纯水

2. 将滤纸和海绵浸泡在1×快速转膜液中，完全浸透。
3. 将凝胶在超纯水中浸泡漂洗25分钟，去除胶表面的SDS；随后将凝胶浸泡在1×快速转膜液中。
注意：水中漂洗时间一定不能超过25分钟，否则分子量较大的蛋白不能完全转移。
4. 按照以下顺序做好转印三明治结构：
负极（阴极）
一块海绵
2mm滤纸
凝胶
转印膜
1mm滤纸
一块海绵（根据三明治的厚度选择是否使用）
正极（阳极）
注意：①要彻底清除三明治结构中的气泡，适当补加1×快速转膜液保持三明治结构湿润。②PVDF膜使用前要用无水甲醇润湿30秒。③三明治结构的制作不能太紧，也不能太松，太紧和太松都会影响转印效果。如果太紧的话，可以去除阳极一侧的海绵或滤纸。
5. 将三明治结构放于转移槽中。
注：转移槽中可以不用1×快速转膜液，可以用1×TGS（Tris-Glycine-SDS）电泳缓冲液取代。三明治结构中的快速转膜液足够保证转膜的完成。

二、半干转（Semi-dry blot）：
1. 按照下表配制1×快速转膜液
100mL配制量：10mL 10×快速转膜液 + 20mL 无水乙醇 + 70mL 超纯水
500mL配制量：50mL 10×快速转膜液 + 100mL 无水乙醇 + 350mL 超纯水
1L配制量：100mL 10×快速转膜液 + 200mL 无水乙醇 + 700mL 超纯水

2. 将滤纸浸泡在1×快速转膜液中，完全浸透。
3. 将凝胶在超纯水中浸泡漂洗25分钟，去除胶表面的SDS；随后将凝胶浸泡在1×快速转膜液中。
注意：水中漂洗时间一定不能超过25分钟，否则分子量较大的蛋白不能完全转移。
4. 按照以下顺序做好转印三明治结构：
负极（阴极）
下层滤纸
凝胶
转印膜
上层滤纸
正极（阳极）
半干转时，滤纸、胶、膜之间的大小，一般是下层滤纸>膜>胶>上层滤纸。上下两层的滤纸一定不能接触；滤纸、胶、膜之间千万不能有气泡，接触的滤纸和气泡会造成短路。
注意：PVDF膜使用前要用无水甲醇润湿30秒。

三、转移条件：
推荐使用恒流转移
300mA：30 to 35 min
330mA：25 to 30 min
350mA：25 to 30 min
375mA：20 to 25 min
400mA：15 to 20 min

储存/保存方法

室温保存，有效期12个月。

温馨提示：本产品仅作科研实验使用，不支持临床等研究