痤疮丙酸杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒
基本信息
产品名称：
痤疮丙酸杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：
Propionibacterium acnes
国产/进口：
国产
产地/品牌：
谷研
型号：
50T
参考报价：
销售商：
总点击数：
105
更新日期：
2025-11-13
产品类别：
性能参数
产品概述
本试剂盒基于探针法荧光定量PCR（qPCR）技术开发，专用于快速、特异性检测痤疮丙酸杆菌（Propionibacterium acnes）。该菌为厌氧或兼性厌氧菌，与皮肤痤疮等感染性疾病密切相关。试剂盒采用即用型设计，用户仅需提供样品DNA模板，即可通过荧光信号实时监测扩增过程，实现高灵敏度和高特异性的定量检测。
| 产品简称 | 痤疮丙酸杆菌探针法 | 保存 | -20℃低温 |
| 货号 | GOY-M3643 | 规格 | 50T |
| 有效期 | 12个月 | 用途 | 仅供科研 |
检测原理
探针法原理：
探针完整时，报告基团（如FAM）的荧光信号被淬灭基团（如BHQ）吸收；
PCR扩增过程中，Taq酶的5'→3'外切酶活性切割探针，使报告基团与淬灭基团分离，释放荧光信号；
荧光强度与扩增产物量成正比，实现实时定量分析。
技术优势
避免非特异性扩增（如SYBR Green法的假阳性风险）；
适用于低浓度样本检测，动态范围广。
实验步骤
样本DNA提取（建议方法）
细胞裂解：取冻存裂解样本，室温静置5分钟充分溶解。
两相分离：每1 mL裂解液加入0.2 mL氯仿，振荡混匀15秒，15–30℃孵育2–3分钟；4℃ 12,000 rpm离心15分钟，取上层水相（含RNA/DNA）。
核酸沉淀：水相中加入等体积异丙醇，混匀后15–30℃孵育10分钟；4℃ 12,000 rpm离心10分钟，收集沉淀。
清洗：用75%乙醇（DEPC水配制）清洗沉淀，4℃ 7,000 rpm离心5分钟，晾干后溶于无核酸酶水中。
qPCR反应体系配制
按以下比例配制反应混合液（以50 μL体系为例）：
| 组分 | 体积（μL） |
| 2× qPCR Master Mix | 25 |
| 探针引物混合液 | 5 |
| 模板DNA | 5–10 |
| 无核酸酶水 | 补至50 |
扩增程序
预变性：95℃ 3分钟；
循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）；
熔解曲线分析（可选）：60℃升至95℃，每0.5℃采集信号。
结果分析
定量标准曲线：使用已知浓度标准品建立Ct值与拷贝数的对数线性关系（R²≥0.99）；
阈值设定：以基线荧光信号的10倍标准差为阈值（通常由软件自动计算）；
样本浓度计算：根据标准曲线反推待测样本的初始拷贝数。
注意事项
实验全程需在无核酸污染环境下操作，建议使用紫外线灭菌工作台；
探针避光保存，反复冻融不超过3次；
阴性对照（无模板）与阳性对照（标准品）需同步检测；
若熔解曲线出现杂峰，需排查引物二聚体或污染。
应用领域
科研用途：痤疮发病机制研究、微生物组学分析；
临床辅助：皮肤感染病原体快速筛查。
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公司简介
上海谷研生物是一家专业经营生化试剂、仪器、实验室耗材的公司， 代理许多国际先进水平的高科技产品，包括分子生物学、细胞生物学、免疫学、诊断等多个研究及应用领域。我们努力将欧美专业生产厂家的具有国际先进水平的产品推荐给各类研究人员；另一方面也非常重视自主产品研究和开发，推出了一系列具有竞争力的产品和服务。同时国家对于生物行业的发展给予了极大的重视，更多地侧重于科研的投入。
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