细胞基本信息:
| 中文名称 |
NCI-H526[H526]细胞 |
别名 |
NCI-H526[H526] |
| 规格 |
1×10⁶/T25培养瓶 |
形态特征 |
悬浮生长 |
| 货号 |
YLS-XB12978 |
培养环境 |
气相:空气,95% |
细胞名称:NCI-H526[H526]细胞
细胞别名:NCI-H526[H526]
NCI-H526 是一种人小细胞肺癌(SCLC)细胞系,具有独特的生长特性和分子表达特征,常用于肿瘤机制研究和药物筛选。
1. 细胞基本参数
别称 H 526; H-526; NCI H526
细胞类型 人小细胞肺癌细胞 (Small Cell Lung Carcinoma)
组织来源 肺(Lung),源自骨髓转移灶
细胞形态 上皮细胞样,呈多细胞团簇
生长特性 悬浮生长 (Suspension)
种属 人 (Homo sapiens)
供体信息 55岁,白人男性 (Caucasian male)
2. 研究背景与特征
来源背景:该细胞系于1987年由A.F. Gazdar等人建立,源自一位未经治疗前的骨髓转移灶。这意味着它保留了原始肿瘤的许多生物学特性。
生长方式:与之前介绍的NCI-H378不同,NCI-H526属于悬浮生长细胞,通常以圆形细胞团簇的形式存在于培养基中,而不是贴附在瓶壁上。
分子表达:
胰岛素样生长因子II (IGF II):该细胞系表达IGF II,这与其自分泌生长刺激机制有关。
蛙皮素 (Bombesin):表达蛙皮素样免疫反应物,这是小细胞肺癌的一个特征性标志。
致瘤性:在裸鼠体内具有致瘤性,且表达多种癌基因(如myc, myb, fes, fms, raf, ras)。
应用领域:常用于小细胞肺癌的信号转导研究、抗肿瘤药物(特别是针对IGF通路或神经内分泌靶点的药物)的筛选及细胞增殖机制研究。
3. 细胞培养条件
基础培养基:
推荐配方:RPMI-1640 培养基。
血清及添加剂:
10% - 20% 优质胎牛血清 (FBS)
1% 青霉素-链霉素双抗 (P/S)
注:部分特定培养条件可能建议添加NaHCO3 (1.5g/L) 和丙酮酸钠 (0.11g/L)。
培养环境:
温度:37°C
气相:95% 空气,5% 二氧化碳 (CO)
湿度:饱和湿度(70%-80%)
4. 细胞培养操作步骤(重点:悬浮细胞)
细胞复苏
快速解冻:将冻存管从液氮中取出,迅速放入37°C水浴中摇晃,约1-2分钟内使冻存液完全融化。
转移:用酒精消毒管口,在超净台内将细胞悬液直接转移至含有5-6mL预热完全培养基的离心管中,混匀。
离心:1000 rpm (约150-200g) 离心5分钟,弃上清(此步骤是为了去除DMSO)。
重悬:加入新鲜完全培养基重悬细胞,接种至T25培养瓶中,放入37°C培养箱培养。
换液:复苏后第二天更换培养基以去除残留的死细胞和DMSO。
细胞传代
当细胞密度达到较高水平(通常观察到团簇密集)时进行传代。
收集:由于是悬浮细胞,直接将培养瓶中的细胞悬液转移至离心管中。
注:如果细胞有轻微贴壁,需先轻柔吹打使其悬浮。
离心:1000 rpm 离心5分钟。
弃上清:小心吸弃上清液。
重悬:加入适量新鲜完全培养基重悬细胞沉淀。
计数与分瓶:进行细胞计数,按 1:2 至 1:3 的比例分装至新培养瓶中。
注意:该细胞生长较慢,且有密度依赖性,传代时不要稀释过度。
细胞冻存
收集:离心收集对数生长期的细胞。
配制冻存液:推荐配方为 90% FBS + 10% DMSO(现用现配)。
调整密度:细胞密度通常调整为 1×10 至 1×10 cells/mL。
分装:将细胞悬液分装入冻存管(通常1mL/管)。
程序降温:将冻存管放入程序降温盒中,置于 -80°C冰箱 过夜,第二天转移至 液氮 中长期保存。
5. 注意事项
悬浮特性:这是NCI-H526与之前介绍的NCI-H2030等贴壁细胞最大的区别。切勿在换液时将培养基倒掉而保留瓶底“无物”,因为细胞就在培养基中悬浮。
聚团生长:该细胞倾向于形成多细胞团簇,这属于正常现象,但在计数时需吹打均匀以保证准确性。
生长速度:NCI-H526生长相对较慢,倍增时间较长,通常需要每3-4天甚至更久才需传代一次。
运输处理:
干冰运输(冻存管):收到后立即转入液氮或-80°C保存,或直接复苏。
常温运输(T25培养瓶):收到后用75%酒精消毒瓶壁,直接放入37°C培养箱静置2-4小时,观察细胞状态(通常细胞已在培养基中悬浮)。
公司正在出售的产品:
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前沿研究方向:
前沿研究方向
细胞衰老机制
端粒缩短、DNA损伤累积导致细胞功能衰退,与老年性疾病相关。
细胞器互作
如线粒体-内质网接触位点(MAMs)调控钙信号与凋亡。
合成生物学应用
人工设计细胞通路(如工程菌生产胰岛素)。