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人血管紧张素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA试剂盒

基本信息
产品名称:
人血管紧张素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA试剂盒
英文名称:
Ang-Ⅰ  Elisa Kit
国产/进口:
国产
产地/品牌:
上研生
型号:
48T/96T
参考报价:
总点击数:
29
更新日期:
2026-03-23
产品类别:

性能参数

产品概述:

产品名称 人血管紧张素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA试剂盒 英文名称 Ang-Ⅰ  Elisa Kit
规格 48T/96T 货号 Y-E679
保存 2-8℃ 用途 仅供科研
 
人血管紧张素Ⅰ(Angiotensin I, Ang-Ⅰ)ELISA试剂盒是一种用于定量检测生物样本中血管紧张素Ⅰ含量的体外科研工具。血管紧张素Ⅰ是肾素-血管紧张素系统(RAS)中的关键前体多肽,由血管紧张素原经肾素作用裂解产生,其血浆水平是评估肾素活性和RAS系统功能状态的重要指标。
以下为您详解该试剂盒的原理、组成、操作流程及关键注意事项:
检测原理
该试剂盒通常采用双抗体夹心法(Sandwich ELISA)。
固相包被:酶标板微孔中预包被了抗人血管紧张素Ⅰ的特异性捕获抗体。
结合抗原:加入样本(如血清、血浆)后,样本中的血管紧张素Ⅰ抗原与固相抗体特异性结合。
酶标识别:随后加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体,它会与已结合的血管紧张素Ⅰ形成“抗体-抗原-酶标抗体”的夹心复合物。
显色定量:加入TMB(3,3',5,5'-四甲基联苯胺)底物液后,HRP酶催化其显色,溶液由无色变为蓝色。加入终止液(通常为硫酸溶液)后,颜色由蓝变黄。在酶标仪450nm波长下测定各孔的吸光度(OD值)。样本中血管紧张素Ⅰ的浓度与OD值呈正相关,通过标准曲线即可计算出精确浓度。
主要组成成分
一个标准的试剂盒通常包含以下核心组分:
预包被微孔板:96孔或48孔,已包被捕获抗体(部分试剂盒可能提供未包被的板条,需用户自行包被)。
标准品:用于绘制标准曲线,浓度已知的重组人血管紧张素Ⅰ蛋白,使用前需按说明书用样品稀释液溶解并进行系列倍比稀释。
酶标二抗/检测溶液:HRP标记的抗血管紧张素Ⅰ抗体,用于识别已结合的抗原。
样品稀释液:用于稀释血清、血浆等样本,以减少基质效应。
浓缩洗涤液:通常为20×浓缩液,使用前需用蒸馏水稀释,用于洗去未结合的物质。
TMB显色液:底物溶液,需避光保存。
终止液:用于终止酶促反应,通常为2M或2N的硫酸溶液。
封板膜/封口胶:用于孵育时密封微孔板,防止蒸发和污染。
适用样本类型
该试剂盒可用于定量检测多种生物液体样本中的血管紧张素Ⅰ含量,包括:
血浆(推荐使用EDTA或肝素抗凝,避免使用含肾素激活剂的抗凝管)。
血清。
细胞培养上清液。
组织匀浆液(如肾组织等)。
标准操作流程 (SOP)
试剂准备:将试剂盒从2-8℃冷藏环境中取出,在室温(18-25℃)平衡15-30分钟。检查浓缩洗涤液是否有结晶析出,如有需水浴加热溶解。
配液:按说明书比例用蒸馏水稀释浓缩洗涤液。
加样:在微孔中加入50-100μL标准品或待测样本,每个样本建议设复孔以减少误差。
孵育:用封板膜封板,在37℃恒温箱中孵育(通常30-60分钟)。
洗涤:弃去孔内液体,用洗涤液注满每孔,静置1-2分钟后弃液,在吸水纸上拍干。此过程通常重复5次。
加酶与显色:每孔加入酶标二抗工作液,重复孵育和洗涤步骤。然后加入TMB显色液,37℃避光显色10-20分钟。
终止与读数:每孔加入终止液,混匀后立即在酶标仪450nm波长下测定OD值。
结果计算
计算均值:将每个标准品和样本的复孔OD值取平均数。
绘制标准曲线:以标准品的浓度为横坐标,对应的平均OD值为纵坐标,在坐标纸上或使用专业软件绘制标准曲线。
计算浓度:根据待测样本的OD值,在标准曲线上查出对应的浓度,或代入直线回归方程计算。如果样本经过稀释,最终结果需要乘以稀释倍数。
关键注意事项
样本采集与处理:血管紧张素Ⅰ在体外极不稳定,易受温度和酶的影响而降解。
抗凝剂:推荐使用EDTA或肝素抗凝。
抑制剂:建议在采血时加入酶抑制剂(如EDTA、8-羟基喹啉等)以防止Ang-Ⅰ降解。
温度:采血后应立即置于冰上,并尽快分离血浆(通常需低温离心),分离后的样本应立即检测或冻存于-20℃或-80℃,避免反复冻融。"
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