细胞简介:
人肾动脉内皮细胞分离自肾组织;肾脏是机体的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除体内代谢产物及某些废物、毒物,同时经重吸收功能保留水份及其他有用物质,如葡萄糖、蛋白质、氨基酸、钠离子、钾离子、碳酸氢钠等,以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。肾脏同时还有内分泌功能,生成肾素、促红细胞生成素、活性维生素D3、前列腺素、激肽等,又为机体部分内分泌激素的降解场所和肾外激素的靶器官。肾脏的这些功能,保证了机体内环境的稳定,使新陈代谢得以正常进行。肾动脉的分支为叶间动脉,穿行于肾柱内,上行至皮质与髓质交界处,形成与肾表面平行的弓状动脉。小叶间动脉向被膜发出毛细血管,并向周围的肾小体发出入球小动脉,进入肾小囊后形成球形的毛细血管网,再汇集成出球小动脉,出肾小体。直小动脉分支形成毛细血管网,再汇合成直小静脉,入弓状静脉、叶间静脉,最后汇合成肾静脉经肾门出肾,注入下腔静脉。肾动脉既是肾的营养血管,又是肾的机能血管,与肾泌尿机能密切相关。肾动脉在肾实质内形成两个毛细血管网:肾小球毛细血管网,血压较高,利于血浆滤过形成原尿;球后毛细血管网,血压较低,利于肾小管的重吸收。肾动脉内皮细胞是肾动脉的重要结构细胞之一,在机体的正常生理过程中发挥着重要作用。肾动脉内皮细胞主要功能有:①在血浆滤过形成原尿的过程中起重要作用,②在肾小管的重吸收过程中起重要作用,③保持凝血和纤溶的动态平衡。
方法简介 公司实验室分离的人肾动脉内皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的人肾动脉内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
商品属性:
| 产品名称 |
人肾动脉内皮细胞 |
货号 |
YS-01X7259 |
| 英文名称 |
Human Renal Artery Endothelial Cells |
组织来源 |
肾组织 |
| 规格 |
5×10⁵Cells/T25培养瓶 |
种属 |
人 |
产品信息
产品名称 人肾动脉内皮细胞
组织来源 肾组织
默认种属 人
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养信息:
包被条件 PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
人肾动脉内皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
原代细胞培养过程:
第一阶段:准备与取材
这是整个实验的基础,直接决定了细胞的初始活性和后续培养的成功率。
器材与试剂准备
器材: 确保超净工作台、培养箱、离心机、倒置显微镜等设备运行正常。所有培养瓶、培养皿、移液管、手术器械等必须经过严格的高压灭菌处理。
试剂: 根据细胞类型配制好合适的培养基(如DMEM、RPMI-1640等),并添加胎牛血清(FBS)、抗生素(如青霉素-链霉素)等必需成分。准备好无菌的PBS或Hanks'平衡盐溶液用于洗涤。
组织获取
在无菌条件下,从实验动物或临床手术样本中快速、轻柔地获取目标组织。
取材过程应尽量减少对组织的机械损伤和缺血时间,以保持细胞的高活力。
获取的组织应立即放入预冷(4℃)的、含有高浓度抗生素的PBS或专用运输液中,以抑制污染并维持细胞活性。
第二阶段:分离与纯化
此阶段的目的是从组织中获取高纯度、高活性的单细胞悬液。
组织处理
在超净台内,用含双抗的PBS或Hanks'液反复洗涤组织,彻底去除血液、脂肪和结缔组织等杂质。
用无菌手术剪或刀片将组织剪切成1-3 mm³的小块,以增加酶消化的接触面积。
细胞分离
主要有两种方法,可根据组织类型选择:
酶消化法: 这是最常用的方法。向组织块中加入适量的消化酶(如胰蛋白酶、胶原酶等),在37℃条件下孵育并间歇性振荡或吹打。显微镜下观察,当大部分组织块变得松散、细胞开始游离时,立即加入含血清的培养基终止消化。
组织块贴壁法: 将组织小块直接贴附于培养瓶底,加入少量培养液(不没过组织块),静置数小时让细胞从组织块边缘迁移出来,然后翻转培养瓶,让培养液浸没组织块继续培养。
第三阶段:接种与培养
将分离好的细胞置于模拟体内环境的条件下进行培养。
细胞接种
将调整好浓度的细胞悬液接种到合适的培养容器(如培养瓶、培养板)中。
对于某些难贴壁的细胞,可预先用多聚赖氨酸、胶原等细胞外基质蛋白包被培养表面。
培养条件
将培养容器放入37℃、5% CO₂的恒温恒湿培养箱中静置培养。
接种后24小时内,应在倒置显微镜下观察细胞的贴壁情况、形态和有无污染。
第四阶段:观察与传代
监测细胞状态并在适当时机进行扩增。
日常观察
每天通过倒置显微镜观察细胞的形态、密度和生长状态。健康的原代细胞形态规则,折光性好,立体感强。
细胞传代
当细胞增殖至覆盖培养表面80%-90%(汇合度)时,即可进行传代。
弃去旧培养基,用PBS洗涤后,加入适量胰蛋白酶在37℃下消化,待细胞变圆、间隙增大时,加入含血清的培养基终止消化。
吹打成单细胞悬液,离心后按1:2或1:3的比例分装到新的培养瓶中继续培养。
原代细胞与细胞系的比较;
比较维度 原代细胞 细胞系
来源 直接从活体组织分离 由原代细胞或肿瘤组织经长期传代或转化形成
生物学真实性 高,最接近体内状态 较低,长期培养可能导致特性丢失或改变
遗传背景 稳定,通常为二倍体 不稳定,常发生基因突变和染色体异常
细胞群体 异质性,可能包含多种细胞 均质性,来源于单个克隆,背景单一
增殖能力 有限,会衰老死亡 无限,可长期传代
主要应用 药物筛选、毒理研究、个性化医疗 高通量筛选、机制研究、大规模生产
公司正在出售的产品:
| 组织胱硫醚-β-裂解酶(cystathionine β-lyase;CBL)活性比色法定量检测试剂盒 |
尼莫样激酶单克隆抗体 |
| 组织SPHK激酶总活性荧光定量检测试剂盒 |
环指蛋白39抗体 |
| 转基因油菜(canola)GT73品系基因检测试剂盒 |
富含亮氨酸跨膜纤连蛋白1抗体 |
| 体液人体腺病毒(adenovirus)定量PCR扩增检测试剂盒 |
p53凋亡刺激蛋白1抗体 |
| 细胞分泌型碱性磷酸酶化学发光法定量检测试剂盒 |
中心体蛋白152抗体 |
| 石蜡切片组织IGF 蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 |
丝氨酸蛋白酶8抗体 |
| 石蜡切片组织PARP蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 |
DNA甲基转移酶相关蛋白1抗体 |
| 通用型CHIP DNA分子库构建试剂盒 |
磷酸化周期素依赖性激酶9抗体 |
| 二苯胺(DPA)DNA比色定量测定试剂盒 |
垂体同源盒蛋白1抗体 |
| 组织磷酸二酯酶(PDE)总活性酶连续循环光谱法定量检测试剂盒 |
溴区结构域相邻锌指蛋白1A抗体 |
| 食物总抗氧化能力(TAC)比色法(DDPH)定量检测试剂盒 |
3号染色体开放阅读框18抗体 |
| 药品环(cyclamate)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒 |
颗粒酶B抗体 |
| 人骨髓来源内皮祖细胞 |
人肾动脉内皮细胞Human Cervical Cancer Tissue-Derived Cells |
| 人横纹肌细胞 |
Primary human tendon cells |